Cornelia Amlinei, Histologie special

SISTEMUL IMUN

Noiuni introductive
Mecanismele prin care organismul uman i asigur rezistena la invazia de ctre diverse
organisme i corpi strini sunt:
Protecia de suprafa, mecanism ne-specific, realizat prin:
o Keratin la nivel cutanat;
o Mucus la nivelul tractului respirator i digestiv;
o Aciditate la nivel vaginal;
Inflamaia acut, mecanism ne-specific, cu neutralizarea i distrugerea agentului determinant
prin neutrofile;
Rspunsul imun, mecanism cu nalt specificitate, direcionat mpotriva a diverse substane
i microorganisme.
Rspunsul imun este realizat de esuturi specializate i celule ale sistemului imun. Prima etap
n declanarea unui rspuns imun este cea de recunoatere a unui Antigen- orice material exogen
strin organismului. Recunoaterea activeaz sistemul imun, n care limfocitele dein rolul principal,
cu sau fr implicarea celulelor fagocitare, la momentul iniial sau final.
Microorganismele sunt recunoscute mai nti de celulele prezentatoare de antigen (APC) i sunt
scindate de ctre acestea n componente care sunt prezentate celulelor efectorii specializate.
Limfocitele recunosc antigenele prin cuplarea specific la acestea, prolifereaz i determin unul
din urmtoarele rspunsuri imune care se pot asocia:
Imunitate umoral: secreia de proteine denumite anticorpi, cu urmtoarele caracteristici:
o sintetizate de ctre plasmocite care deriv din limfocitele B activate;
o reprezint proteine de tip Imunoglobuline, de cinci tipuri: IgG, IgA, IgD, IgM i IgE;
o compuse din dou componente principale: lan uor ( sau ) i lan greu (, , ,
sau );
o lanurile grele i uoare prezint regiuni cu variabilitate nalt- situsuri de cuplare a
antigenului;
o lanurile grele i uoare prezint regiuni constante care reprezint partea principal a
moleculelor respective;
o pot circula n fluidele corporale sau rmne cuplate la suprafaa limfocitelor B pe
care le activeaz la contactul cu antigenul adecvat;
Imunitate mediat celular caracterizat prin cooperarea limfocite-macrofage pentru
neutralizarea sau distrugerea agentului strin.
Dezvoltarea, meninerea i programarea celulelor implicate n aceste mecanisme au loc n
organele sistemului imun.
Markeri
Proteinele citoplasmice i membranare specifice celulelor sistemului imun sunt denumite
conform unui sistem internaional, fiind desemnate cu termenul de cluster designation sau CD.
Anticorpii monoclonali, utilizai n tehnicile de imunohistochimie, direcionai mpotriva diverselor
clase de molecule CD permit identificarea celulelor limfoide, cu utilitate practic major n
diagnosticul afeciunilor neoplazice ale organelor sistemului imun.
Moleculele CD pot fi clasificate n trei mari categorii:
Markeri exprimai de o linie celular de-a lungul ntregii sale viei;
Markeri tranzitorii din cursul unor faze de difereniere;
Markeri exprimai n cursul activrii celulei respective.






Cornelia Amlinei, Histologie special
Markerii CD cu utilitate practic pot fi sistematizai astfel:

CD Funcie/identitate Expresie
CD1 Glicoprotein de clas I-like Timocite corticale, celule Langerhans, unele
celule B
CD2 Receptorul LFA-3 Celule T, unele celule NK
CD3 Complexul receptor al celulei T Celule T
CD4 Receptorul MHC de clas II Unele celule T (T heleper), monocite
CD5 Receptorul de fagocitoz Celule T i unele celule B
CD8 Receptorul MHC de clas I Unele celule T (T citotoxice)
CD10 CALLA Celule pre-B
CD16 FcRIIIA Celule NK i monocite
CD19 Celule B
CD20 L26 Celule B
CD21 CR2, receptorul C3d Celule B mature
CD22 BL-CAM Celule B
CD35 CR1 Celule B, monocite
CD40 Semnalizarea celular Celule B
CD45 Antigenul comun leucocitar Limfocite, granulocite, macrofage
CD45RA Antigen comun restricionat
leucocitar
Celule Ts, monocite, celule B
CD45RO Antigen comun restricionat
leucocitar
Celule Th, monocite, celule B
CD56 NCAM Celule NK
CD79a Ig Celule B
CD79b Ig Celule B

Limfocite
Limfocitele pot fi clasificate n trei mari grupe:
Limfocite sau celule B;
Limfocite sau celule T;
Limfocite sau celule natural killer NK.
Limfocitele B sunt concentrate n organele limfoide i circul n sngele periferic, reprezentnd
5-15% din limfocitele sanguine. Cnd sunt stimulate de un antigen adecvat prolifereaz i se
transform n plasmocite care secret imunoglobuline vehiculate prin fluidele organismului, ca baz
a rspunsului imun umoral.
n cursul dezvoltrii lor, celulele B germinale, prezint gene comune care codific producerea
de imunoglobuline. Celulele pre-B exprim CD10, marker care dispare ulterior. n timpul maturrii
lor i dup stimularea antigenic, aceste gene sufer rearanjamente pentru a produce proteine
imunoglobulinice unice care reacioneaz specific cu antigenul respectiv. n acest mod se genereaz
diversitatea rspunsului umoral. Celulele care produc o imunoglobulin care recunoate un antigen
propriu (self) sunt eliminate n timpul dezvoltrii acestora. Unele celule activate devin dormante,
rmnnd ca celule cu memorie care pot prolifera rapid la un nou contact cu acelai antigen.
Limfocitele B inactive sunt mici, cu diametrul de 6-8 m, cu o citoplasm extrem de redus,
nucleul fiind rotund, cu o cromatin compact care reflect lipsa transcripiei ADN.
n stadiul activat, nucleul se lrgete, nucleolii devin evideni i cantitatea de citoplasm crete,
celulele fiind denumite limfoblaste, centroblaste i imunoblaste.
Celulele B recunosc antigenul prin expresia IgM pe suprafaa lor, ca parte a complexului
receptor antigenic al celulei B, fiind asociat cu proteinele CD79a i CD79b.
De asemenea, suprafaa lor exprim i IgD, IgG, IgE, IgA, IgM i antigene ale complexului
major de histocompatibilitate de clas II.
Cornelia Amlinei, Histologie special
Limfocitele B pot fi identificate datorit exprimrii urmtorilor markeri: CD19, CD20, CD22 i
CD79a. n stare activat amai exprim CD21 i CD35. CD40 este exprimat n activarea semnalizrii
celulelor T helper (Th).
Limfocitele T se gsesc concentrate n organele limfoide dar de asemenea circul n fluxul
sanguin i migreaz n diverse esuturi. Prolifereaz n urma stimulului antigenic, devenind capabile
s recruteze alte celule ale sistemului imun i s atace direct celulele afectate. Prezint receptori de
suprafa care recunosc antigenul specific ntr-o modalitate similar celei utilizate de anticorpi.
Celulele T activate secret citokine (limfokine) care, alturi de TcR constituie baza rspunsului
imun mediat celular.

Citokinele produse de diverse tipuri celulare

Citokine Celule de origine Activitate
GM-CSF Epieliale,
maccrofage,precursori de
celule T
Proliferarea i activarea granulocitelor i
monocitelor, proliferarea celulelor
progenitor a mai multor linii hematopoietice
G-CSF Monocite, enoteliale, fibrobaste Proliferarea i maturarea precursorilor
granulocitelor
M-CSF Endoteliale, monocite,
fibroblaste, endometriale
Proliferarea i activarea precursorilor
monocitelor
Factorul celulei
stem
Stromale medulare, endoteliale,
fibroblaste
Proliferarea celulelor progenitor iniiale i
angajate n sinergie cu alte citokine
Eritropoietina Renale, hepatice Proliferarea precursorilor eritroizi i
megacariocitari
IL-1 Monocite, endoteliale,
fibroblaste
Induce intrarea celulelor stem n ciclul
celular, inducia producerii de G-CSF, GM-
CSF, M-CSF, IL-3, eliberarea neutrofilelor
din mduv
IL-2 Celule T Proliferarea i activarea celulelor T, NK,
monocitelor
IL-3 Celule T Proliferarea celulelor setm hematopoietice
iniiale i angajate, n special a
megacariocitelor
IL-5 Celule T Proliferarea i activarea precursorilor
eozinofilelor i a bazofilelor
IL-6 Monocite, fibroblaste, celule T Inducia proliferrii celulelor stem, n special
a progenitorilor megacariocitelor
IL-8 Endoteliale, monocite,
fibroblaste
Activarea neutrofilic
IL-9 Monocite Proliferarea precursorilor eritroizi i
mastocitari, maturarea megacariocitelor
Il-11 Fibroblaste Proliferarea precursorilor monocitelor i a
cellelor progenitor iniial angajate

Proteinele TcR realizeaz un complex cu CD3- complexul TcR. n timpul maturrii, mutaiile
somatice i rearanjamentele genice ale genei TcR genereaz diversitatea celulelor T, cele care
recunosc antigenele self fiind eliminate.
Celulele T germinale prezint gene comune care codific producerea proteinelor TcR. TcR
prezint regiuni variabile care se pot cupla cu antigenele n aceeai manier ca anticorpii. Receptorii
sunt asamblai ca perechi (dimeri) de peptide care cupleaz antigenele. Se difereniaz dou tipuri
de TcR:
Cornelia Amlinei, Histologie special
TcR 1 exprim lanurile i ; caracterizeaz circa 90% din limfocitele sanguine i
MALT;
TcR 2 exprim lanurile i i este prezent n doar 10% din limfocitele sanguine.
Aspectul histologic al celulelor T este corelat cu statusul lor funcional, astfel:
Celulele T inactive pot fi reprezentate de dou tipuri morfologice:
o Limfocitele mici reprezint 60-90% din limfocitele din sngele periferic,
prezint un diametru de 6-7 m, cu o citoplasm redus i un nucleu rotund, cu
o cromatin compact; ME evideniaz corpusculul Gall care reprezint o
agregare de lizozomi asociat unei mici picturi lipidice, observabil ca o pat
paranuclear la utilizarea metodelor histochimice pentru enzimele lizozomale;
o LGL (limfocitul mare granular) prezint un diametru de 7-10 m, cu o
cantitate moderat de citoplasm care conine un numr redus de granule
azurofile;
Celulele T stimulate spre diviziune sunt mai mari, conin o cantitate moderat de
citoplasm bazofil, nucleul fiind mare, conturul su prezint convoluii, un aspect
cromatinian vezicular, nucleol vizibil ca o reflexie a transcripiei genice.
Celulele T activate spre secreia de limfokine prezint o citoplasm bazofil datorit
coninutului abundent n RER, nucleul fiind mare i conturul su convolut.
Din punct de vedere funcional corelat cu expresia markerilor specifici se difereniaz mai
multe subseturi funcionale:
Celule TcR-2
+
:
o T
H
sau T helper exprim molecula CD4 i ajut alte limfocite s-i ndeplineasc
funciile efectorii: induc producerea de anticorpi de ctre celulele B, activeaz
sistemul defensiv macrofagic; recunoaterea antigenic se realizeaz n
combinaie cu moleculele MHC de clas II; virusul HIV-1 care determin
sindromul de imunodeficien dobndit (SIDA) capt accesul la celule prin
utilizarea proteinei CD4 ca receptor, astfel nct cel mai valoros marker al
progresiei acestei infecii este numrarea celulelor CD4+ sanguine; dup
citokinele pe care le secret, pot fi subtipate n:
T
H
P sunt nestimulate i secret IL-2;
T
H
O sunt stimulate de antigen s secrete IL-2, IL-4, IL-10 i IFN-;
T
H
1 secret IL-2, IL-3, GM-CSF i IFN-;
T
H
2 secret IL-3, IL-4, IL-10 i GM-CSF;
T
H
M sunt celule inactive cu memorie care secret IL-2;
dup expresia diferitelor clase de CD pot fi subtipate n dou categorii:
Subtip care exprim CD29 i CD45RO i promoveaz expresia
celulelor T i B
Subtip care exprim CD45RA i induce funcia supresor/citotoxic a
celulelor CD8;
o T
C
sau T citotoxic exprim molecula CD8 i omoar celulele int, recunoscnd
antigenele prezentate n asociere cu moleculele MHC de clas I; stimularea in
vitro, prin incubarea cu IL-2, determin apariia unei populaii celulare desemnat
cu termenul de celule killer activate de limfokine (LAK) care probabil deriv din
LGL (combinaie de TcR-1+, TcR-2+, CD8+ i NK), tehnic a crei utilitate la
pacienii diagnosticai cu diverse maligniti este n atenia cercettorilor;
o T
S
sau T supresor exprim fie CD8, fie CD4 i sunt capabile s inhibe rspunsul
T
H
, modulnd rspunsul imun;
Celule TcR-1
+
nu exprim CD4, ocazional pot exprima CD8 i sunt abundente n
MALT, avnd n general funcii citotoxice.


Cornelia Amlinei, Histologie special
Limfocitele NK
Limfocitele NK prezint morfologia LGL, fiind prezente n sngele periferic i n splin;
este activat de IL-2 pentru care prezint un receptor specific i determin o citotoxicitate mediat
celular, avnd rol n eliminarea celulelor infectate viral i a unor celule tumorale; la activare
elibereaz citokine, cum ar fi IL-1 i GM-CSF prin acre moduleaz rspunsurile imune.
Imunohistochimic, NK pot fi recunoscute datorit faptului c nu exprim CD3, ci CD16- un
receptor de suprafa implicat n activare, CD56- o molecul de adeziune celular i frecvent i
CD2.
Macrofagele i celulele dendritice
Macrofagele i celulele dendritice reprezint componente ale sistemului fagocitar
mononuclear, mpreun cu monocitele (din care deriv). n esuturi, aceste celule devin rezidente i
capt aspecte morfologice variabile corelate cu activitatea lor funcional, astfel:
Macrofagele fixe sau histiocitele formeaz o populaie celular adaptat mai ales
ndeplinirii funciei de fagocitoz; prezint un aspect rotund, cu pseudopode scurte
i groase;
Macrofagele secretorii produc citokine care controleaz rspunsurile imune
celulare locale, sub stimulul celulelor T; prezint dimensiuni mai mari, cu
citoplasm eozinofil datorit dezvoltrii complexelor Golgi i a REN; rareori
vizibile n esuturile normale dar importante n rspunsurile imune mediate celular,
cnd sunt denumite celule epitelioide
Celulele dendritice prezentatoare de antigen, APC constituie celule specializate de
imuno-supraveghere; prezint procese celulare alungite, ramificate i un coninut
redus de enzime lizozomale; fagociteaz materialul antigenic, l proceseaz i
prezint fragmentele limfocitelor; exprim nivele ridicate de molecule MHC de
clas II (HLA-DR); tipurile componente sunt: celulele Langerhans cutanate, celulele
reticulare dendritice limfoganglionare, celulele dendritice foliculare, celulele
dendritice interstiiale (din stroma majoritii organelor), celulele velate sanguine
(reprezint probabil forme circulante ale APC n tranzit printre esuturi), microglia
SNC; celulele dendritice foliculare care nu deriv din monocite, nu exprim MHC
de clas II i prezint antigenul celulelor B.
Macrofagele specializate localizrii i funciei pe care le ndeplinesc sunt:
Macrofagele alveolare (pulmonare);
Celulele Kupffer (hepatice);
Celulele microgliale (encefal);
Celule Langerhans (tegument).


ORGANE LIMFATICE PRIMARE

n organele limfatice primare are loc limfopoieza primar antigenoindependent i
monoclonal. Se consider c exist dou organe care aparin acestei categorii: Mduva osoas
hematogen, n care alturi de limfopoiez au loc i poiezele celorlalte elemente figurate sanguine i
timusul, unde are loc limfopoieza Limfocitelor T.

HEMATOPOIEZA

Celulele mature ale sngelui au o via relativ scurt, astfel nct trebuie s fie continuu
rennoite de celulele stem progenitor produse n organele hematopoietice (haima-snge, poiesis-
producere).
n producerea elementelor figurate ale sngelui se pot distinge urmtoarele etape:
1. Etapa prenatal
a. prehepatic, din sptmna a III-a (intravascular) pn n luna a II-a
Cornelia Amlinei, Histologie special
n stadiile iniiale ale embriogenezei, celulele sanguine iau natere din mezodermul
sacului vitelin. Din insulele Wolff-Pander, celulele vor coloniza organele hematopoietice cu
celule stem i se va diferenia megacarioblastul i hematogonia.
b. hepato-spleno-timic, din luna a II-a pn n luna a IV-a
Mai trziu, ficatul i splina servesc drept esuturi hematopoietice tranzitorii. La acestea
se adaug i timusul care i ncepe funcia.
c. medulo-ganglionar, din luna a IV-a
nc din luna a II-a, clavicula ncepe s se osifice i ncepe s dezvolte mduv osoas
(MO) n interiorul su. Pe msur ce osificarea prenatal a restului scheletului se
accelereaz, mduva osoas devine un esut hematopoietic din ce n ce mai important.
2. Etapa postnatal
Dup natere i n copilrie, eritrocitele, granulocitele, monocitele i plachetele deriv
din celulele stem ale mduvei osoase. Hematopoieza are loc la nivelul epifizelor proximale a
oaselor lungi, coastelor, corpilor vertebrali, sternului, coxalului, claviculelor i craniului.
Originea i maturarea elementelor figurate ale sngelui poart denumirile urmtoare:
Eritropoiez (erytros-rou)
Granulocitopoiez
Monocitopoiez
Trombocitopoiez
Limfopoiez.
nainte de a atinge maturitatea i a fi eliberate n circulaie, celulele sanguine trec prin stadii
specifice de difereniere i maturare, dup cum urmeaz: celule stem, progenitor i precursor.
Celulele stem, factorii de cretere i de difereniere
Celulele stem sunt celule pluripotente (PPSC- pluripotent stem cell) care se pot divide
continuu i a cror celule fiice formeaz tipuri celulare ireversibil difereniate.
Studiul celulelor stem din MO este posibil datorit unor tehnici experimentale care permit
analiza hematopoiezei in vivo i in vitro.
Tehnicile in vivo se realizeaz prin injectarea MO a unui oarece donor normal la un oarece
iradiat letal, ale crui celule hematopoietice au fost distruse. La aceste animale, celulele MO
transplantate dezvolt colonii de celule hematopoietice n splin.
Investigaiile in vitro ale hematopoiezei se realizeaz prin utilizarea unui mediu de cultur
cu esut semisolid realizat printr-un strat de celule derivate din stroma MO. Acest mediu creeaz
condiii de microclimat favorabile hematopoiezei.
Date provenite dintr-o serie extins de experimente arat c, n condiii adecvate de
micromediu, stimularea de ctre factorii de cretere influeneaz dezvoltarea unor variate tipuri de
celule sanguine.
Celulele stem pluripotente i multipotente
n prezent se consider c toate celulele sanguine provin dintr-un singur tip de celul stem
din MO (Teoria monofiletic). Deoarece aceast celul poate produce toate tipurile de celule
sanguine, este denumit celul stem pluripotent.
Aceste celule prolifereaz i formeaz dou linii celulare de celule stem multipotente:
celule limfoide care genereaz limfocite (celula stem multipotent limfoid- CFU-L);
celule mieloide (CFU-GEMM (celul stem multipotent mieloid din care se dezvolt n MO:
granulocite, monocite, eritrocite i megacariocite).
Precoce, n timpul dezvoltrii lor, celulele limfoide migreaz din MO spre ganglionii
limfatici, splin i timus, unde i completeaz diferenierea spre limfocite.
Celulele progenitor i celulele precursor
Celulele stem multipotente proliferative formeaz celule fiice cu potenialitatea redus.
Aceste celule uni- sau bipotente genereaz celule precursor sau blaste, n care caracteristicile
morfologice se difereniaz pentru prima dat (spre deosebire de acestea, celulele stem i progenitor
nu pot fi distinse morfologic i se asemn limfocitelor), sugernd tipul de celul n care se vor
transforma.
Cornelia Amlinei, Histologie special
Celulele stem pluri- i multipotente se divid la o rat suficient pentru a-i menine populaia
lor relativ redus- autoreproductibilitate (la MO de oarece doar 0,1-0,3% din celule sunt
multipotente). Aceste celule sunt prezente i n circulaie, fiind denumite celule nule. Rata mitotic
este accelerat n celulele progenitor i precursor, producnd numere mari de celule mature,
difereniate (n MO uman 310
9
eritrocite i 0,8510
9
granulocite pe zi). Pe cnd celulele
progenitor se pot divide i pot produce att celule progenitor ct i celule precursor, celulele
precursor produc doar celule sanguine mature. Acest fapt atest scderea treptat a potenialitii.
Astfel, hematopoieza este rezultatul proliferrii simultane, continui i al diferenierii celulelor
derivate din celulele stem al cror potenial este redus pe msur ce diferenierea progreseaz.
Acest proces poate fi observat n studiile in vivo i in vitro, n care apar colonii celulare
derivate din celulele stem cu variate potenialiti. Coloniile derivate dintr-o celul stem
multipotent mieloid pot produce eritrocite, granulocite, monocite i megacariocite, toate n
aceeai colonie.
n aceste experimente, totui, unele colonii produc granulocite i monocite, sau eritrocite i
megacarioblaste, exprimnd o bipotenialitate. Celulele care formeaz colonii sau clone de tipuri
celulare specifice sunt denumite celule formatoare de colonii (CFC) sau uniti formatoare de
coloniii (CFU). Exist convenia de a denumi aceste variate tipuri de colonii celulare cu litera
iniial a celulei produse de acea colonie. Astfel, M-CFC denot o colonie formatoare de monocite,
E- CFC formeaz eozinofile, MC-CFC formeaz monocite i granulocite etc.
Hematopoieza depinde de prezena unui micromediu adecvat i de factori de cretere.
Condiiile de microclimat sunt furnizate de celulele stromei organelor hematopoietice care produc
matricea extracelular. O privire da ansamblu asupra hematopoiezei, ne arat c, pe msur ce acest
proces are loc, att potenialul de difereniere i de auto-nnoire a celulelor iniiale scade gradat. n
contrast, rspunsul mitotic la factorii de cretere se amplific gradat, atingnd maximum la mijlocul
acestui proces. De aici, morfologia i activitatea funcional se dezvolt i se formeaz celulele
mature. Factorii care afecteaz proliferarea i diferenierea celular sunt denumii factori de
cretere, factori stimulatori ai coloniilor (CSF) sau hematopoietine sau poietine. Acetia
prezint compoziii chimice diferite, fiind n general glicoproteine cu un lan polipeptidic bazic de
aproximativ 20000 Da. Funciile ndeplinite de aceste substane sunt suprapuse, complexe,
acionnd prin stimularea proliferrii (a activitii mitogenice) a celulelor imature (mai ales a celor
progenitor i precursor), susinnd diferenierea celulelor imature pe msur ce se matureaz i
amplificnd funciile celulelor mature. Aceste funcii pot fi prezente n acelai factor de cretere sau
pot fi exprimate cu intensiti variabile n diferii factori de cretere.
Izolarea i clonarea genelor mai multor factori de cretere permit att producerea lor ct i
studiul efectelor lor in vivo i in vitro. Factorii de cretere mai cunoscui sunt urmtorii:
G-CSF stimuleaz formarea granulocitelor, le crete metabolismul i stimuleaz celulele
leucemice; este produs de macrofage, celule endoteliale i fibroblaste; gena care l codific este
situat pe cromosomul 17;
GM-CSF stimuleaz in vitro i in vivo producerea de granulocite i macrofage; este produs de
limfocitele T, celule endoteliale i fibroblaste; gena care l codific este situat pe cromosomul
5;
M-CSF stimuleaz formarea macrofagelor in vitro i crete activitatea antitumoral a
macrofagelor in vivo; este produs de macrofage, endotelii i fibroblaste; gena codificant este
situat pe cromosomul 5;
IL-3 stimuleaz producerea de celule mieloide; este produs de limfocitele T CD4
+
; gena
codificant este situat pe cromosomul 5;
EPO sau Eritropoietina stimuleaz formarea hematiilor; este produs de celulele interstiiale
renale; gena codificant este situat pe cromosomul 7;
Trombopietina (TPO) stimuleaz CFU-Mega i megacariocitele;
Multi-CSF stimuleaz celulele progenitor multipotente, seria mieloid i mastocitele tisulare;
IL-1 este produs de neutrofile, monocite, macrofage, celule endoteliale, inta aciunii sale fiind
limfocitele T i B;
Cornelia Amlinei, Histologie special
IL-2 este produs de limfocitele T CD4
+
i stimuleaz limfocitele;
IL-4 este produs de limfocitele T CD4
+
i mastocite i stimuleaz limfocitele i mastocitele
tisulare;
IL-5 limfocitele T CD4
+
i stimuleaz CFU-Eo, eozinofilele i limfocitele B;
IL-6 prezint ca surs celulele endoteliale, neutrofilele, macrofagele, limfocitele T i stimuleaz
limfocitele, granulocitele,celulele progenitor multipotente, macrofagele i hepatocitele;
IL-7 este produs de celulele adventiceale ale MO, inta aciunii lor fiind limfocitele pre-T i
pre-B;
IL-8 este produs de macrofage, endoteliale, inta aciunii lor fiind limfocitele T i neutrofilele;
IL-9 prezint ca surs de producere limfocitele T CD4
+
; inta aciunii fiind limfocitele T CD4
+
,

CFU-GEMM, CFU-E;
IL-10 este produs de macrofage, limfocite T, stimulnd limfocitele T, B i NK;
LIF sau factorul inhibitor al leucemiei acioneaz pe monocite-macrofage;
IL-12 are ca surs macrofagele i ca int CFU-GEMM, CFU-E, CFU-GM, limfocitele B, T,
macrofagele, megacariocitele;
Interferonul (IFN-) are ca surs de producere limfocitele T CD4
+
, NK i ca int limfocitele
B, T, NK, neutrofilele i monocitele.

Mduva osoas

MO se gsete n canalele medulare ale oaselor lungi i n cavitile oaselor spongioase.
Capsula este realizat de endostul osteogenic.
Dup aspectul su macroscopic s-au descris urmtoarele tipuri:
Roie sau hematogen, a crei culoare se datoreaz predominenei celulelor liniei
eritrocitare; aproximativ jumtate din MO este hematoformatoare; se gsete la copii i
adolescenii tineri.
Galben, a crei culoare se datoreaz unui numr mare de lipocite; la aduli poate redeveni
mduv roie n condiii de cretere a necesitilor de celule sanguine.
Cenuie, n care predomin elementele fibrilare; se ntlnete la vrstnici; nu mai are
capacitatea de a redeveni MO roie.
MO roie este compus din :
Strom;
Cordoane hematopoietice;
Capilare sinusoide.
Stroma este reprezentat de o reea tridimensional de celule reticulare ancorate pe o reea
delicat de fibre reticulare. Celulele sunt:
De tip fibroblastic, de aspect stelat; prelungirile lor vin n contact prin intermediul jonciunilor
distanate; se situeaz n jurul celulelor n curs de dezvoltare din seria granulocitar;
De tip macrofagic, dispersate, situate n interiorul insulelor eritroblastice;
De tip adventiceal, reprezentate de celule de tip fibroblastic, situate n apropierea capilarelor
sinusoide;
De tip adipos sau lipocite, care au capacitatea de a stoca lipide, furniznd un substrat metabolic
i au funcia de a menine cavitile osului medular pe msura reducerii mduvei roii.
Matricea conine:
Colagen tip I i III;
Fibronectin;
Laminin;
Hemonectin;
Proteoglicani.
Sinusoidele sunt formate din:
endoteliu continuu;
membran bazal discontinu;
Cornelia Amlinei, Histologie special
strat discontinuu de celule adventiceale care variaz n funcie de afluxul elementelor
celulare spre sinusoid.
Eliberarea celulelor mature este controlat de factorii de eliberare:
C3;
Glucocorticoizi;
Androgeni;
unele toxine bacteriene.
Leucocitele trec prin motilitate prin peretele sinusoidal, eritrocitele intr n sinusoide printr-un
gradient existent la nivelul peretelui. Megacariocitele formeaz fine procese care traverseaz
peretele i se fragmenteaz la capete, elibernd plachetele.
Vascularizaia MO
Vasele MO sunt urmtoarele:
Artera nutritiv intr printr-un foramen nutritiv la nivelul diafizei.
Arterele metafizelor intr la nivelul capetelor osului i se unesc cu artera nutritiv.
Arterele longitudinale centrale sau arteriole iau natere din artera nutritiv, fiind situate la
nivelul MO hematogene.
Arterele radiale sau capilarele arteriale comune iau natere din arterele longitudinale, avnd
dou traiecte posibile:
Unul spre osul compact al diafizei pe care l prsesc prin mici vene periostale;
Altul d natere sinusurilor medulare.
Venele longitudinale centrale colecteaz sngele sinusoidelor.
Vena nutritiv colecteaz sngele din venele longitudinale centrale i iese prin foramenul
nutritiv.
Celulele unei linii sunt situate n insule sau cordoane hematopoietice. Fiecare insul n care se
dezvolt eritrocitele prezint central un macrofag i prezint o poziie nvecinat peretelui
sinusoidal. Megacariocitele sunt situate tot n vecintatea peretelui sinusoidal i i descarc
plachetele direct n sinus prin deschideri tranzitorii denumite aperturi sau pori transcelulari.
Granulocitele se dezvolt n insule situate la distan de peretele sinusului. Cnd sunt mature,
granulocitele migreaz spre sinusoid i intr n fluxul sanguin.
Eritropoieza
Maturarea eritrocitelor- eritropoieza semnific diferenierile care au loc spre un stadiu n care au
capacitatea de a-i exercita toate funciile specifice.
Procesul esenial n maturarea eritrocitelor l constituie sinteza de hemoglobin, cu formarea
unui corpuscul mic, anucleat, biconcav. n timpul acestui proces, au loc cteva modificri majore:
volumul scade, nucleolii diminu pn devin invizibili n MO, scade diametrul nuclear i cromatina
devine din ce n ce mai dens, pn cnd nucleul capt un aspect piknotic i este n final exclus din
celul. Apare o scdere gradat a numrului de poliribozomi din citoplasm, exprimat prin
diminuarea bazofiliei, urmat de o cretere simultan a proporiei de hemoglobin, exprimat prin
apariia i creterea acidofiliei citoplasmei i mitocondriile dispar treptat.
Au loc 3-5 diviziuni intermediare ntre proeritroblast i eritrocitul matur.
Dezvoltarea unei hematii de la prima celul recognoscibil a seriei pn la eliberarea
reticulocitelor n snge are loc n aproximativ 5-7 zile.
Un rol important n producerea hematiilor l au:
Eritropoietina care este o glicoprotein produs de celulele interstiiului renal care
stimuleaz ARNm pentru globin, proteina component a moleculei de hemoglobin;
Aminoacizi;
Fier;
Acid folic
Vitamina B12;
Factorul intrinsec Castle;
Hormonii androgeni.
Cornelia Amlinei, Histologie special
GEMM-CFU, sub influena Epo, a GM-CSF i a IL-4 se transform n EM-CFU. Celula EM-
CFU d natere, sub influena IL-3, celulei BFU-E (burst forming units erythroid- unitate
formatoare de explozii eritrocitare), din care rezult E-CFU care, sub influena Epo se transform n
Proeritroblast, capul de serie al liniei eritrocitare.
Diferenierea i maturarea eritrocitelor implic formarea, n ordine, a urmtoarelor celule:
1. Proeritroblastul: are o durat de via de 20 de ore, dimensiunile sale sunt de 12-20 m i
reprezint prima celul recognoscibil a seriei eritroide; nucleul su este mare, eucromatic,
cu 2-3 nucleoli evideni, cu citoplasma redus, bazofil, datorit abundenei poliribozomilor.
2. Eritroblastul bazofil are o durat de via de 20 de ore, dimensiuni de 16 m, prezint un
nucleu condensat, fr nucleoli evideni i o citoplasm puternic bazofil datorit RER i
poliribozomilor implicai n sinteza de hemoglobin care ncepe s fie prezent sub forma
unor mici particole.
3. Eritroblastul policromatofil (chroma-culoare; philein-a place, lb. greac) rezult n urma a
trei mitoze, urmate de maturare, are o durat de via de 25 de ore, dimensiuni de 10-16 m;
nucleul este condensat, fr nucleoli, poliribozomii se reduc i cteva arii citoplasmatice
devin ncrcate cu hemoglobin, cptnd culori variate; reprezint ultima celul a seriei
capabil de diviziune.
4. Eritroblastul ortocromatofil sau Normoblastul are o durat de via de 25-30 de ore,
dimensiuni de 8-9 m, nucleul apare i mai condensat, citoplasma pierde orice arie de
bazofilie, devenind uniform acidofil, granular datorit hemoglobinei, mitocondriilor i a
ribozomilor; datorit microfilamentelor coninute emit pseudopode prin care se insinueaz
prin porii celulelor endoteliale.
5. Reticulocitul sau Eritrocitul policromatofil are o durat de via de 3 zile i rezult n
urma excluderii nucleului, fiind nconjurat ntr-o capsul citoplasmatic redus, restul
citoplasmei ajungnd n sinusoid; conine un numr redus de poliribozomi, RER care agreg
n reea la tratarea cu un colorant supravital- Albastru strlucitor de crezil; este prezent n
proporie de 1-2 % din hematiile sanguine i se matureaz, cu dispariia RER n 2-3 zile.
6. Eritrocitul rezult n urma pierderii poliribozomilor.
Celulele seriei eritroide sunt situate n insule eritroblastice, n apropierea unui macrofag.
Acesta distruge eritrocitele mbtrnite i transfer fierul prin feritin/hemosiderin i
complexul proteic care conine fier ctre eritroblaste; globina este transformat n aminoacizi
care sunt reutilizai; de asemenea distruge nucleii exclui de eritroblaste i produce factori de
cretere care influeneaz hematopoieza.
Granulocitopoieza (maturarea granulocitelor) (Leucopoieza)
GEMM-CFU , sub influena GM-CSF, G-CSF i a IL-3 se transform n NM-CFU. NM-
CFU (pentru neutrofile i monocite) se transform sub influena IL-3 n N-CFU din care vor
deriva neutrofilele i n M-CFU din care se vor dezvolta monocitele. Eozinofilele provin dintr-o
celul precursor diferit, E-CFU care este stimulat de IL-5 i bazofilele din alt celul: B-CFU.
Granulocitopoieza dureaz 11 zile i nregistreaz urmtoarele etape:
1. Mieloblastul este cea mai tnr celul recognoscibil din seria mieloid, are
dimensiuni de 14-20 m, nucleul este mare, cu o cromatin fin, dispersat, cu 1-5
nucleoli evideni, citoplasma este palid bazofil, coninnd complex Golgi i
mitocondrii, sufer 2-4 mitoze transformndu-se n urmtorul stadiu.
2. Promielocitul prezint dimensiuni de 18-24 m; nucleul su este sferic sau reniform,
cromatina mai dens la periferie, cu o ancoare n dreptul zonei citoplasmatice mai clare
corespunztoare centrozomului; citoplasma este mai abundent, bazofil, cu ribozomi,
aparat Golgi, mitocondrii, RER i granule azurofile care conin enzime lizozomale i
mieloperoxidaz; sufer 1-2 mitoze i se transform n urmtorul tip de celul.
3. Mielocitul neutrofilic, bazofilic i eozinofilic sunt mai mici, cu granule specifice care
cresc treptat n cantitate, nucleul devine mai condensat, reniform;
Cornelia Amlinei, Histologie special
4. Metamielocitul prezint nucleul curbat situat la periferie, cromatina condensat i o
citoplasm acidofil, cu mai mult de 80% granulaii specifice care determin subtiparea
n: neutrofilic, eozinofilic i bazofilic.
5. Granulocitul neutrofilic prezint un stadiu intermediar al crui nucleu are aspect
bastoniform, curbat, fiind denumit celul n band. Dac acestea apar n proporie
important n snge, apare un viraj la stnga semnificativ clinic, indicnd de obicei o
infecie bacterian.
6. Granulocitul prezint o lobare evident a nucleului: multipl n cazul neutrofilului,
bilobare pentru eozinofil i lobare puin evident pentru bazofil.
Neutrofilele sufer n general 3 mitoze n cursul dezvoltrii liniei lor. Neutrofilelor li se
pot descrie o serie de compartimente funcionale i anatomice, dup cum urmeaz:
1. Compartimentul formator medular care conine celula stem, mielocitul i
granulocitul; acest compartiment se poate divide ntr-un compartiment mitotic de
aproximativ 3 zile i un compartiment de maturare de aproximativ 4 zile.
2. Compartimentul medular de stocaj acioneaz ca un sistem de tampon, capabil de
a elibera un numr mare de neutrofile mature, la cerere, n aproximativ 4 zile.
3. Compartimentul circulant const n neutrofile suspendate n plasm circulnd n
vasele sanguine.
4. Compartimentul de marginaie conine neutrofilele prezente n snge dar care nu
circul, fiind temporar excluse din circulaie prin vasoconstricie sau- n special n
plmni- pot adera la endotelii; reprezint cam aceeai proporie ca i
compartimentul circulant cu un schimb constant de celule ntre ele. Timpul de
njumtire n aceste compartimente este de 6-7 ore.
Primele 2 compartimente sunt de aproximativ 10 ori mai mari ca al II-lea i al IV-
lea.
Neutrofilele, ca i alte granulocite, intr n esutul conjunctiv prin traversarea
jonciunilor inter-endoteliale ale capilarelor i a venulelor postcapilare prin procesul
de diapedez.
5. Compartimentul situat n esutul conjunctiv are o durat de 1-4 zile, dup care
neutrofilele mor chiar dac nu i-au ndeplinit funcia de fagocitoz.
Limfocitopoieza
Limfocitele se disting mai ales pe baza mrimii, structurii cromatinei i a prezenei
nucleolilor. Pe msur ce limfocitele devin mature, cromatina devine mai compact,
nucleolii devin mai puin evideni i celulele scad n mrime. n plus, subseturi
adiioneaz receptori distinctivi de suprafa n timpul diferenierii, posibil a fi detectai
prin tehnici de imunocitochimie.
Toate celulele progenitor ale limfocitelor i au originea n MO, Ly-CFU
reprezentnd circa 30% din celulele nucleate medulare. Unele din limfocite relativ
nedifereniate migreaz n timus, unde capt atributele LT. Ulterior vor popula regiuni
specifice din organele limfoide periferice. Alte limfocite rmn n mduv, se
difereniaz n LB i migreaz spre organele limfoide periferice unde se multiplic,
ocupndu-i compartimentele specifice.
Stadiile parcurse n cursul limfopoiezei sunt:
Celule tranziionale:
1. Limfoblastul este o celul mare, de 15-20 m, cu nucleul central, cu 1-2 nucleoli
evideni, cu citoplasma bazofil; ncorporez TMT, se divide de 2-3 ori i se
transform n stadiul urmtor.
2. Prolimfocitul este mai mic, cromatina nuclear relativ mai condensat, fr antigene
de suprafa care marcheaz LT sau LB; n timus sau n MO, sintetizeaz receptori
caracteristici ai suprafeelor celulare dar nu se recunosc n coloraiile de rutin ci prin
tehnici de imunocitochimie. Prolimfocitele T migreaz n timus, pe cnd
prolimfocitele B rmn n MO.
Cornelia Amlinei, Histologie special
Limfocitele B dezvolt receptori de tip imunoglobulinic, prin sinteza lanurilor grele ,
i a lanurilor uoare , , prin rearanjamente genice.
Monocitopoieza
Din GM-CFU, sub influena M-CSF, GM-CSF i a IL-3 se formeaz M-CFU, care
se va transforma n Monoblast.
Monocitopoieza dureaz 8-10 zile, cu un interval de circa 55 de ore pn la stadiul de
Premonocite i nregistreaz urmtoarele stadii:
1. Monoblastul reprezint o celul angajat virtual identic cu mieloblastul ca
morfologie, cu dimensiune de aproximativ 20 m, cu cromatina nuclear dispersat,
nucleolul fiind vizibil i citoplasma abundent, moderat bazofil.
2. Promonocitul are dimensiuni de 15-18 m, cu un nucleu mare, uor indentat, cu
cromatina lax, nucleolii evideni i citoplasma mai puin bazofil, coninnd granule
azurofile numeroase, RER, complex Golgi i mitocondrii; prezint receptori de
suprafa pentru C; se divide de 2 ori i d natere urmtorului stadiu. Cam
prezint o replicare lent, reprezentnd populaia de rezerv i prezint o
diviziune rapid
3. Monocitul are dimensiuni de 15-16 m, un nucleu reniform eucrom, citoplasma
conine o cantitate ridicat de RER care i confer bazofilia, complex Golgi extins, n
care se formeaz granule de condensare care reprezint lizozomi primari, ca granule
fine azurofile; suprafaa prezint receptori pentru C, Fc , Ag HLA. Ele constituie
sectorul de rezerv sau intr n fluxul sanguin, circul de la 8 ore pn la maximum 3
zile i ajung n esutul conjunctiv, unde se matureaz n:
4. Macrofage care funcioneaz cteva luni (75-100 zile).
Trombocitopoieza
Din EM-CFU ia natere Mega-CFU care devine, sub influena Trombopoietinei
Megacarioblast.
1. Megacarioblastul este situat n apropierea sinusoidelor, are dimensiuni de 15-50 m
diametru, nucleul este mare ovoidal sau reniform, cu numeroi nucleoli; devine nalt
poliploid (x 30 ADN) nainte ca s aib loc diferenierea citoplasmatic; citoplasma
este redus, omogen, intens bazofil datorit coninutului de ribozomi, polizomi i a
aparatului Golgi, conine i granule azurofile; se divide prin endomitoze i n 10 zile
se transform n urmtorul stadiu.
2. Promegacariocitul prezint dimensiuni de circa 45 m, o citoplasm abundent i
un nucleu mare.
3. Megacariocitul este o celul gigant, de 35-150 m, de form rotund, cu cteva
procese scurte, cu un nucleu lobulat, neregulat, cu cromatina condensat, fr
nucleoli evideni, cu 32-64 n; citoplasma conine numeroase mitocondrii, centrioli
multipli, RER bine dezvoltat i un complex Golgi extins din care se produc granule
i vezicole cu enzime lizozomale- granule . Invaginri ale membranei plasmatice
se ramific n interior, sub forma unor membrane de demarcaie care definesc arii
care vor fi eliminate sub forma unor benzi, nucleii rmnnd n MO unde vor fi
fagocitai. Se pot descrie 3 stadii:
a. trombocitogen care conine ribozomi perinucleari, complex Golgi situat n zona
medie i la periferie filamente i microtubuli;
b. granular care concentreaz vezicole, lizozomi, mitocondrii, conferindu-i
intensitatea culorii i caracteristica fin granular;
c. vacuolat care prezint microvacuole golgiene i 5-8 invaginri ale membranei
spre care se orienteaz vezicolele de demarcaie, n care se descriu 1000-1500
de teritorii secundare care vor da natere proplachetelor i acestea plachetelor.
4. Plachetele: un numr de 4000-6000 plachete ia natere dintr-un megacariocit.


Cornelia Amlinei, Histologie special
TIMUSUL

Definiie
Timusul este un organ limfoepitelial care ajunge la dezvoltare maxim n relaie cu greutatea
corporal, imediat dup natere, pn n copilrie, suferind involuie dup pubertate.
Timusul prezint o greutate de 10-35 g la natere, ajunge la 50 g la pubertate i ulterior
involueaz, spre un esut fibro-adipos de 5-15 g. De asemenea involuia timic este asociat cu
stressul extrem i cu infecia cu HIV.
Localizare i aspect general
Timusul este localizat n mediastinul anterior. Prezint o form piramidal turtit, cu baza
sprijinit de pericard, cu vrful n sus.
Histogenez
Pe cnd organele limfoide non-timice i au originea exclusiv n mezenchim (mezoderm),
timusul are o origine dual. La 12-13 zile de la formarea mugurilor epiteliali (n sptmna a 6-a),
celulele stem limfoide multipotente CFU-Ls migrate din MO (origine din celulele mezenchimale)
invadeaz organul. Primordiul epitelial este dezvoltat din endodermul celei de-a treia i a patra
pungi faringiene, avnd origine comun cu paratiroidele.
Histoarhitectonie
Timusul prezint o capsul conjunctiv, n care se pot observa vase, nervi i lobuli de esut
adipos alb i brun. Capsula trimite septuri care penetreaz n parenchim, divizndu-l n 2 lobi i
acetia n pseudolobuli. Fiecare pseudolobul prezint cte o zon periferic, denumit cortical i
o zon central, medular. Corticalele sunt ntunecate, puternic bazofile i medularele sunt palid
bazofile sau chiar uor acidofile. Medularele nu sunt separate prin septuri (septuri incomplete),
comunicnd cu zone similare ale altor pseudolobuli, astfel nct aspectul observabil pe preparatele
microscopice, de compartimentare complet, este fals.
Cortexul (corticala) este compus dintr-o populaie numeroas de limfocite pre-T (timocite),
celule epiteliale reticulare dispersate i cteva macrofage.
Timocitele exprim pe suprafa integrine care determin localizarea lor sau homingul.
Timocitele imature au 10-12 m i, pe msur ce se matureaz, ajung la 8 m. Cele mai tinere sunt
mai mari, dispuse imediat sub capsul, cu o cantitate crescut de citoplasm, ceea ce le confer o
tent mai palid, unele conin figuri mitotice. Multe prezint aspecte de liz sau rex, deoarece
celulele cu mutaii sunt neviabile, 80-98% din populaia timocitar disprnd n cursul procesului de
maturare, prin fenomenul de apoptoz, fiind ulterior fagocitate de macrofage- motiv pentru care
timusul mai este denumit i cimitirul limfocitelor T. Dei majoritatea limfocitelor mor n cortex,
datorit procesului de apoptoz i sunt ndeprtate de macrofage, un numr mic migreaz ctre
medular. Apoptoza este ntlnit la celulele T care conin determinani capabili s reacioneze
mpotriva propriului MHC (self). Timocitele se divid, sufer rearanjamente genice, ncep s
exprime receptori antigen-specifici pentru celulele T i devin imunocompetente pe msur ce
migreaz ctre medular. Expansiunea clonal a celulelor T care au receptori pentru non-self este
denumit selecie pozitiv. Celulele T corticale exprim markeri CD (cluster of differentiation) de
suprafa timus induse: CD2, CD3, CD4, CD8 i CD28.
Celulele epiteliale reticulare din cortical sunt greu observabile n MO, fiind ascunse de abundena
de timocite, dar structura i tipurile au fost elucidate prin ME, astfel:
Tip 1 (epiteliu subcapsular sau perivascular), situate de-a lungul capsulei, septurilor i
spaiilor perivasculare, prezint cte un nucleu neregulat, cu nucleol evident, aparat Golgi bine
reprezentat, mitocondrii, cisterne de reticol endoplasmatic i granule electron-dense ocazionale;
stabilesc jonciuni occludens prin care ndeplinesc o funcie de barier;
Tipul 2 se afl n cortexul mediu i prezint form stelat, cte un nucleu mare, palid, cu nucleol
evident, citoplasm palid, cu mnunchiuri de tonofilamente, reticol endoplasmatic rugos,
complex Golgi, lizozomi; stabilesc ntre ele jonciuni prin desmozomi; exprim MHC de clas I
i II; ndeplinesc o funcie de compartimentalizare a corticalei timice;
Cornelia Amlinei, Histologie special
Tipul 3 se gsesc profund n cortex i la limita dintre cortical i medular, att citoplasma, ct i
nucleul exprimnd o gam larg de densiti electronice; n general nucleul prezint
heterocromatin periferic i citoplasma prezint procese citoplasmatice lungi, conine
numeroase tonofilamente, cisterne de RER i vacuole; exprim MHC de clas I i II; realizeaz
o barier funcional ntre cortex i medular. Tipurile 2 i 3 sunt considerate celule doic
timice, avnd n comun prezena unor depresiuni citoplasmatice, ca nite buzunare, n care se
matureaz timocitele, sunt joncionate prin desmozomi i emit prelungiri pe faa intern a
capsulei i septurilor, trimit manoane pericapilare, asemntor astrocitelor n SNC, realiznd un
micromediu izolat pentru timocite
Tipul 4 se afl n cortexul profund dar sunt mai numeroase n medular, se coloreaz mai intens,
prezint nuclei neregulai ca form, heterocromatici, procese citoplasmatice fine, bogate n
tonofilamente, RE dilatat, mitocondrii, complexe Golgi i vacuole; exprim Ag HLA clas II
Celulele reticuloepiteliale prezint receptori pentru IL-4 care direcioneaz fenotipurile diferite
pe care le pot avea. Tipul 1 de celule reticuloepiteliale secret un peptid chemotactic, timotaxina
pentru limfocitele pre-T. Acesta este o 2 microglobulin care particip la crearea homingului
celulelor T. Celulele reticuloepiteliale corticale (mai ales celulele doic) mai secret aa numiii
hormonii timici:
timozin 1, 4, 4;
factorul timic seric;
timopoietina;
timolina.
Hormonii timici sunt implicai n diferenierea timocitelor. La rndul lor, timocitele influeneaz
microarhitectonia celulelor reticuloepiteliale prin aa numitul fenomen de crosstalk.
Celulele corticale reticuloepiteliale (dendritice) mai produc:
IL-1, IL-2, IL-4;
prostaglandine cu funcii similare hormonilor timici;
CSF;
Interferon ;
oxitocin i vasopresin pe care le cupleaz cu proteinele carrier, de tipul neurofizinelor.
Macrofagele sunt dispersate, fiind mai numeroase la jonciunea cortical-medular,
mpiedicnd trecerea moleculelor ntre cortical i medular, fiind denumite macrofage santinel.
Macrofagele conin numeroi fagozomi mari care se pot evidenia prin coloraia PAS, conferind
acestora denumirea de celule PAS. Ele pot secreta IL-1, IL-2, IL-4, TNF care influeneaz
maturarea celulelor T i proliferarea clonal.
Medulara conine un numr mare de celule epiteliale reticulare, spre deosebire de
predominena limfocitelor n cortex, de unde i deosebirea de culoare dintre cele 2 zone.
Celulele reticuloepiteliale sunt de mai multe tipuri:
Tipul 4 stabilesc jonciuni occludens ntre ele i cu tipul 3; tipurile 3 i 4 realizeaz o barier
al jonciunea cortico-medular;
Tipul 5 se gsete n grupuri mici la jonciunea cortico-medular, dispersate n medular, cu
nucleu neregulat sau elongat, heterocromatic, cu nucleol evident, citoplasm redus i
numeroi poliribozomi;
Tipul 6 sunt mari, palide, cu nuclei eucromi, nucleoli evideni, cisterne lungi, paralele de
RER, structuri tubulare; unele sunt rotunde, altele sunt aplatizate i tind s se aglomereze,
fiind joncionate prin desmozomi, nvelindu-se una pe alta, devin din ce n ce mai aplatizate,
degenerate, acumuleaz picturi lipidice, granule de keratohialin i filamente de
citokeratin pe care le vor stoca n centrul unor formaiuni concentrice patognomonice
pentru timus, corpusculii Hassall, cu dimensiuni de 10-100 m. Se pare c aceti corpusculi
produc hormoni timici.
Celulele T care prezint capacitatea de a rspunde la Antigene n asociaie cu HCM prsesc
timusul direct prin pereii venulelor postcapilare cu endoteliu nalt (HEV) situate la jonciunea
cortico-medular sau migreaz spre structurile limfoide non-timice, acumulndu-se ca limfocite T,
Cornelia Amlinei, Histologie special
n situsuri specifice- arii timo-dependente: zonele paracorticale ale limfoganglionilor, tecile
limfatice periarteriolare (PALS- periarteriolar lymphatic sheath) din pulpa alb splenic, ariile
interfoliculare amigdaliene, ariile interfoliculare ale plcilor Peyer.
Alte tipuri celulare ntlnite n timus sunt: celule dendritice i rare neutrofile, eozinofile,
limfocite B, plasmocite i celule mioide dispersate.
Vascularizaia
Arterele aferente (ramuri din artera mamar intern i artera tiroidian inferioar) intr n timus
prin capsul, se ramific i penetreaz organul, urmrind septurile conjunctive. Arteriolele prsesc
septurile pentru a ptrunde n parenchim, de-a lungul limitei cortical-medular. La acest nivel se
realizeaz o reea arteriolar anastomozat. Arteriolele dau capilare care ptrund n cortex avnd
un traseu arcuat, ajungnd n final la medular unde dreneaz prin venule. Medulara este irigat de
capilare fenestrate provenind din arteriolele de la jonciunea cortico-medular i este drenat prin
venule postcapilare care primesc i capilarele de ntoarcere din zona cortical. Capilarele timice
corticale prezint un endoteliu nefenestrat i o MB groas. n jur se gsete un strat de celule
epitelioreticulare cu care celulele endoteliale, trimind procese fine prin MB, vin n contact.
Bariera snge-timus este realizat de: celulele endoteliale joncionate prin jonciuni aderente de
tip zonul, MB continu, groas, pericite, celulele reticuloepiteliale stromale de tip I, reea de
reticulin i macrofage. Aceast barier mpiedic penetrarea cortexului timic de ctre antigenele
circulante. La jonciunea cortico-medular, prin confluarea capilarelor se gsesc venulele
postcapilare cu endoteliu nalt (HEV). Acestea conin glicoproteine apicale recunoscute de
celulele T prin CD, urmnd diapedeza, cu scurtcircuitarea restului circulaiei, astfel nct limfocitele
T ajung direct n snge. Venele medulare ptrund n esutul conjunctiv al septurilor i prsesc
timusul prin capsula sa, avnd traiect invers arterelor. Nu exist barier n medular. Vasele sunt
prevzute cu un esut conjunctiv perivascular alctuit din fibre reticulare, fibroblaste, macrofage i
plasmocite. Macrofagele fagociteaz moleculele antigenice care pot scpa din lumenul capilar.
Timusul nu are vase limfatice aferente i nu constituie un filtru pentru limf, aa cum realizeaz
limfoganglionii. Puinele vase limfatice din timus sunt toate eferente, sunt localizate n pereii
vaselor sanguine i n esutul conjunctiv al capsulei i septurilor.
Inervaia
Inervaia timusului este bogat, tip adrenergic/colinergic. n strile de stress apare o expresie
intens a markerilor epiteliali cu dependen fa de corticoizi.
Reglarea
Timusul este inta unor hormoni:
Adrenocorticoizii (stimulai la rndul lor de ACTH produs de hipofiza anterioar)
reduc numrul i rata mitotic a timocitelor din corticala timusului; timocitele corticale
nu au steroid-dehidrogenaz, ceea ce le face foarte sensibile la administrarea de
corticoizi);
Hormonii sexuali feminini i masculini accelereaz involuia timic, castrarea avnd
efect opus;
Hormonul de cretere (somatotropina) stimuleaz nespecific dezvoltarea timusului.
Histofiziologie
Limfopoieza timic este antigeno-independent (antigenele nu au acces datorit capilarelor
barier) i policlonal (se realizeaz numeroase mutaii, corespunznd unor receptori numeroi fa
de antigene).
Pretimocitele din MO, care exprim CD34 i deoxinucleotidtransferaza terminal (Tdt) ajung
n corticala superficial, unde, sub influena hormonilor timici, inclusiv a IL-1, IL-2 devin limfocite
T care sufer un proces de maturare sau de educaie timic. Maturarea are loc cu un proces de
difereniere, cu apariia de markeri de suprafa, unii tranzitorii (CD5, 6, 7) i unii permaneni
(CD 1,2,3,4,8). n cursul acestui proces, se pot descrie mai multe stadii succesive, dup cum
urmeaz:
Stadiul dublu negativ, n care timocitele exprim CD2 i CD7;
Stadiul mediu, n care timocitele exprim CD1;
Cornelia Amlinei, Histologie special
Stadiul dublu pozitiv, n care timocitele exprim TcR (recunoate Ag n asociaie cu MHC:
90% de tip i 5% tip ), CD3, CD4 i CD8; unele rmn CD4,8
+
(75%) i altele CD4,8
-

, toate acestea fiind distruse;
Selecia pozitiv atimocitelor care recunosc MHC self;
Selecia negativ a timocitelor care recunosc Ag self;
Stadiul unic pozitiv, fie CD4
+
(helper), fie CD8
+
(citotoxice).
Patologie
Aplazia timic congenital (Sindromul Di George) se caracterizeaz prin absena imunitii
celulare, ceea ce conduce la infecii. Datorit originii comune embrionare, Sindromul se nsoete de
absena paratiroidelor care determin tetanie. Experimental, n cazuri de timectomie neonatal la
oareci (oareci nuzi) se poate obine tolerana grefelor.