U.M.S.A.

Universidad Mayor De San Andres

Docente:

Dra. EuIemia Briancon



Fecha
Miercoles 19 de Junio del 2013
U.M.S.A.
| Microbiologia |
CIV 358


1. Objetivos Generales.
Comprender la importancia que tiene la toma de muestras microbiologicas, ademas de los
requisitos que deben cumplir estas.
Poner en practica las tecnicas correctas para una buena extraccion de toma de muestra.

2. Objetivos Especficos.
Saber que tipo de muestra es necesaria y como se obtiene para el estudio microbiologico de sus
diIerentes parametros.
Conocer la correcta seleccion de recipientes segun sea el tipo de muestra.
Conocer los metodos de obtencion de las muestras segun el tipo de Iuente.
Conocer la extraccion, manejo y seleccion correcta de una muestra.
3. Introduccin.
Para que un analisis microbiologico de aguas de resultados precisos es necesario tomar muestras
representativas y ver que no se produzca una contaminacion accidental en el momento del muestreo y su
conservacion de las mismas hasta el momento de su procesamiento.

Las personas encargadas de recolectar las muestras, deben estar debidamente entrenadas, tener
conocimientos de saneamiento y mucha responsabilidad.

Cuando se toman muestras de agua desinIectada, en el momento de recogerlas debe determinarse la
concentracion del cloro residual y el pH en el punto de toma.

En un muestreo que implique tanto los analisis Iisicoquimicos como los microbiologicos, primero se
debe tomar la muestra para los analisis microbiologicos y luego para los otros parametros, esto con el Iin
de evitar el riesgo de contaminacion local que pudiera ocurrir. Por tanto, es primordial que la toma de
muestra se realice con todas las consideraciones mencionadas, esto para disminuir la probabilidad de
obtener un resultado, Ialso positivo o Ialso negativo.

La recoleccion de las muestras es relativamente sencilla y debe cumplir determinados requisitos por
Normas Internacionales que sealan:
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a) Numero de muestras
b) Frecuencia con la que deben tomarse las muestras
c) IdentiIicacion de las muestras
d) Clases de recipientes que deben utilizarse.
e) Transporte y conservacion

a) Nuero de muestras
Las normas internacionales han propuesto guias generales que sealan un numero determinado de
muestras y los intervalos en que deben ser tomadas para ser analizadas de acuerdo al numero de
habitantes, de la poblacion abastecida por un sistema de agua, en el caso de agua distribuida por red.
Pero, por otro lado en el caso de otros tipos de Iuente de agua el numero de muestras se debe adecuar a
cada situacion particular.

b) Frecuencia de muestreo
La Irecuencia de la toma de muestras de agua tratada que sale de las plantas de tratamiento dependera
de la calidad de la Iuente y del tipo de tratamiento. Las Irecuencias minimas son: una muestra cada dos
semanas en el caso de las plantas que utilizan aguas subterraneas, una muestra por semana cuando se usa
una Iuente de agua superIicial.

El muestreo debe ser mas Irecuente cuando se abastece a gran numero de personas expuestas. De
acuerdo a las guias de las OPS/OMS la Irecuencia minima de la toma de muestras de agua de consumo
humano en el sistema de distribucion es la siguiente:

POBLACION ABASTECIDA No de MUESTRAS MENSUALES
Menos de 5000 1 muestra
De 5000 a 100000 1 muestra al mes por c/5000 personas
Mas de 100000
1 muestra al mes por c/10000 personas
mas 10 muestras adicionales

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Seria necesario incrementar el programa de muestreo en:

Casos de epidemias
Inundaciones y operaciones de emergencia
Despues de la interrupcion del servicio
Despues de trabajos de reparacion en la red

c) Identificacin de las muestras
Las muestras deben ser perIectamente identiIicadas con la mayor inIormacion posible como ser:
Numero de muestra, lugar Iuente, Iecha, hora, sitio, cloro residual si se trata de aguas desinIectadas, el
nombre de la persona encargada de tomar la muestra y cualquier otro dato que pueda ser necesario; todo
esto debe ir en una etiqueta que se colocara en el Irasco de muestreo, para que los resultados puedan ser
interpretados correctamente.

Medidas que se deben cumplir para entregar una muestra al IIS

Fuente. Elaboracion Propia
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d) Clases de Recipientes
Para el muestreo es conveniente utilizar Irascos de vidrio, de una capacidad de 500 ml por lo menos,
de boca ancha, que Iacilite el muestreo, tapa rosca, limpia y esteril.

Tambien pueden usarse Irascos de polipropileno de cuello ancho que soporten temperaturas de la
autoclave.

Proteger la tapa del Irasco del muestreo de la contaminacion exterior cubriendolo adecuadamente con
el papel especial u hoja de aluminio.

Si las muestras a ser analizadas son tratadas, los Irascos deberan contener un agente declorador
pudiendo utilizarse 0.1 ml de una solucion al 1.8 de TiosulIato de sodio para cada 100 ml de muestra,
esta cantidad es suIiciente para neutralizar concentraciones de hasta 5 mg/l de cloro residual.

Para el muestreo de aguas poluidas, que se sospeche que contengan concentraciones superiores a 0.01
mg/l de metales pesados tales como el cobre, Zinc, etc., adicionar al Irasco de muestreo antes de su
esterilizacion, 0.3 ml de una solucion al 15 de EDTA, para cada 100 ml de muestra.

La solucion de EDTA se puede adicionar al Irasco de muestreo en Iorma separada o conjunta con el
TiosulIato de sodio.

La concentracion de TiosulIato y EDTA, no tiene eIecto signiIicativo sobre los microorganismos
indicadores durante el almacenamiento de las muestras de agua, ya sean estas cloradas o no.

e) Transporte y Conservacin
Una vez realizada la recoleccion de muestras debe ser enviada al laboratorio en el menor tiempo
posible. El tiempo maximo entre el muestreo y el analisis no debe exceder las 24 horas, las muestras no
deberan ser expuestas a la luz y se las tiene que mantener a una temperatura preIeriblemente entre 4 y 10
C pero no congeladas, si no es imposible cumplir estas condiciones no se analizara la muestra.

El conservador que se use para el transporte debe limpiarse y desinIectar despues de cada uso para
evitar cualquier contaminacion durante la recoleccion de muestras.
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4. Seleccin de los puntos de Muestreo.
Los puntos de muestreo deberan ser seleccionados de tal manera que sean representativos de las
diIerencias Iuentes. Estos puntos deberan estar distribuidos uniIormemente.

Los puntos de muestreo deberan estar ubicados en los tres tipos de distribucion (abiertos,
cerrados, mixtos).
Debera haber por lo menos un punto de muestreo inmediatamente despues de la salida de agua
limpia de cada planta de tratamiento.
Cuando se tomen muestras del sistema de distribucion, deben elegirse los griIos con un cuidado especial.

Deben provenir directamente de las tuberias de la red publica.
Descartar aquellos que tengan Iugas entre el tambor y el cuello y sean de uso inconstante.

5. Toma de Muestras.
Toma de Muestras en GriIos.
El Irasco para la toma de estas muestras debera tener un agente declorador
Se elegira el griIo de mayor uso y que no presente Iugas.
Se desinIecta la boca del griIo con la ayuda de un algodon embebido en alcohol
Se abre el griIo y se hace chorrear el agua durante dos a tres minutos.
Se reduce el chorro de agua al grosor de un lapiz, se Ilamea la boca del Irasco y se procede a
recolectar la muestra, teniendo cuidado de no tocar con los dedos la boca del Irasco, con objeto de
no contaminarlo.
Se toma la muestra dejando por lo menos un espacio de 12 mm por encima, esto con el objeto de
poder homogenizar la muestra antes de realizar el analisis.
Con la ayuda del termometro se toma la temperatura de la muestra, realizado previamente la
desinIeccion del termometro.
Se Ilamea la boca del Irasco, se tapa y se cubre con el papel madera a manera de capucha que se
sujeta con la ayuda de un cordel.
Se anota en una etiqueta la hora, la Iecha y el lugar de captacion de la muestra, Iuente,
condiciones de transporte, temperatura, nombre de la persona que tomo la muestra, ciudad y zona.
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Desinfeccion de la boca del grifo con alcohol embebido en alcohol

Fuente. Elaboracion Propia

Toma de Muestra de una Fuente.

Cuando se toman muestras directamente de un rio, arroyo, lago, reservorio, manantial,
vertiente o pozo poco proIundo, el objetivo debe ser obtener una muestra que sea representativa del
origen, en ese sentido no es conveniente tomar muestras demasiado proximas a la orilla, o muy
distantes del punto de extraccion, o del sedimento cerca del Iondo. Deberan evitarse los lugares donde
el agua este estancada.

Para tomar la muestra sumergir el Irasco en el agua, de preIerencia con el cuello hacia abajo,
hasta una proIundidad de 15-30 |cm|. Para evitar asi los desechos Ilotante. Despues debera
enderezarse el Irasco colocando el cuello hacia arriba, con la boca contra la corriente; cuando no haya
corriente, el Irasco se empujara horizontalmente a traves del agua.

Cuando se tomen muestras de un pozo, o de las proIundidades de un lago, resevorio o cisterna,
debera utilizarse un Irasco o jarra de muestreo esterilizado, especialmente lastrado para Iacilitar su
inmersion.

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Toma de Muestra de Pozo

Cuando se toma muestra de un pozo que cuenta con una bomba de mano o mecanica, es
necesario conectar la bomba antes de tomar la muestra para vaciar toda el agua que podria haberse
quedado retenida en las tuberias. De ser posible, la boca de la bomba debe Ilamearse o desinIectar,
debe bombearse y dejar corre una cantidad adicional de agua antes de tomar la muestra, la misma que
se hara dejando que el agua de la bomba Iluya directamente al interior del Irasco del muestreo.

6. Equipo y Material.

Algodon
Alcohol
FosIoro
Probeta
Reloj o cronometro
Frasco con tapa esmerilada, esteril
Papel madera y cordel
Marcador
Termometro
Conservador
Frascos que se utili:an para la recoleccion de muestras

Fuente. Elaboracion Propia
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7. Procedimiento y Resultados.
Puesto que la muestra tiene la siguiente etiqueta:

Grupo AlIa
Fecha No recuerdo**
Hora No recuerdo**
Temperatura 14 |C|
Lugar Laboratorio del Instituto de Sanitaria
Sitio GriIo del Laboratorio de Microbiologia
Fuente Milluni

** Eso me pasa por realizar los inIormes a ultima hora

Se procedio a realizar la toma de muestra de acuerdo a lo mencionado en el punto 5 en lo que reIiere a
toma de muestras de griIos.

8. Conclusiones.

La muestra obtenida es representativa puesto que se tomaron las debidas consideraciones de muestreo
para toma de muestras en griIos.

Con respecto al tipo de envase usado este es de caracter esteril, sin ningun tipo de contaminante, pero
con una solucion de TiosulIato ya que se trata de agua tratada o desinIectada.