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LABORATORIO DE INMUNOLOGIA

LABORATORIO DE INMUNOLOGIA

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08/16/2013

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LABORATORIO DE INMUNOLOGIA
Existen diferentes técnica de laboratorio que permiten a los medico obtener los resultados de los exámenes para poder dar un diagnostico y Tto. De la enfermedad inmunológica, reumatológica o las musculopatias en Gral.Estas se pueden dividir en 5 grandes grupos:
1.
técnicas de autoinmunidad por inmunofluorescencia
En Gral. la mayoría de las enfermedades reumatológicas son autoinmunes y el organismo produce anticuerposcontra el mismo cuerpo. La más conocida es la inmunofluorescencia, mediante esta técnica se realizan los exámenescomo:a.determinación de anticuerpos antinucleares (ANA)b.determinación de anti DNA (DNAn)
c.
determinación de anticuerpos antimitocondriales (AMA)
d.
determinación de anticuerpo antimúsculo liso
2.
técnicas nefelométrica
a.
equipamiento que mide la luz dispersas por las proteínas o antígeno anticuerpo, como por ejemplo
 b.
cuantificación de inmunoglobulinas
c.
medición del complemento C3 y C4
d.
factor reumatoide fr 
e.
medición de antiestreptolisina
3.
técnica de autoinmunidad por enzima inmuno análisis, EIA o ELISA
a.
determinación anticuerpo antipéptido citrulinado presente en la artritis reumatoideb.determinación de anticuerpos
o
esclerodermia scl70
o
sjoegre: SCAro
o
LES: Sm
o
Enfermedad mixta del tejido conectivo: RNT
o
Poliomielitis Jo1
4.
técnica de electroforesis de proteínas séricas5.técnicas de estudio del liquido articula
Se realiza una punción en la articulación y se toma una muestra del liquido articular, para realizar un estudiofísico químico, análisis de algunas proteínas, glucosa, citológico para ver la calidad de las células presentes yotros estudios con luz polarizada para ver los cristales.
1. TECINCAS DE AUTOINMUNIDAD
-
INMUNOFLUORECENCIA INDIRECTA
Permite detectar anticuerpos circulantes en las persona en una muestra sanguínea.Marcada con isocianato de fluoresceína. Se toma una muestra sanguínea y se analiza elsuero poniéndolo en contacto con un antígeno específico expuesto en una lámina deportaobjeto para verlo en el microscopio. El anticuerpo se pega a la lámina y se pone laglobulina humana que esta marcada con isocianato de fluorescencia que al mirarla almicroscopio se ve de color verde manzana. Si no se tiñe es negativo y si se tiñe espositivo. Se utiliza un microscopio de fluorescencia. Todos los exámenes que resultanpositivos deben ser titulados, es decir esa muestra positiva debe ser diluida a la mitad y seanaliza si vuelve a florecer se vuelve a diluir hasta que ya no fluórese mas que se conocecomo la ultima dilución.El microscopio emite una luz especial que hace fluorecer cuando existe una reacciónantígeno anticuerpo y la fuente es una lámpara de mercurio.
o
Determinación de anticuerpos antinucleares (ANA)
Este examen sirve para prácticamente todas las enfermedades inmunológicas, principalmente:
Lupus (LEC)
 
Enfermedad mixta del tejido conectivo
Lupus eritematoso inducido por drogas
Hepatitis crónica activa autoinmune
Esclerosis sistémica progresiva
Síndrome de Crest
Artritis reumatoide
Dermatomiositis.Pero, indica solo que algo inmunológico se encuentra alterado pero no indica que enfermedad específicaes, por lo que deben realizarse otros exámenes más para determinar cual es la enfermedad.El sustrato de adhesión de esto son las células Hep 2, antígeno a utilizar para que ocurra la reacciónantígeno anticuerpo y va pegado en la lámina porta objetos. Son células de cultivo que provienen decarcinoma de cartílago de laringe humana.
Anticuerpos antinucleares (ANA)
PATTERN HOMOGENEO PATTERN PERIFERICO PATTERN MOTEADO PATTERN NUCLEOLAR PATTERN ANTICENTROMERO
 
LUPUS [pattern homogéneo y pattern periférico]ENFERMEDAD MIXTA DEL TEJIDO CONECTIVO [pattern moteado]ESCLEROSIS SISTEMICAS PROGRESIVAS [pattern nucleolar]SINDROMES DE CREST [pattern anticentromero]
Anticuerpos anti DNA nativo (DNAn)
Se realiza en un DNA de doble hebra, es indicativo de Lupus Eritematoso Activo, se utiliza como criteriopara ver si el paciente responde al tratamiento, para ver la cantidad de anticuerpos presentes en elpaciente.El sustrato que se utiliza es
critidia lucilae
, es un protozoo que se encuentra en las glándulas salivalesde las moscas, que presenta un
quinetoplasto
rico en DNA activo de doble hebra.También debe titularse. 
Anticuerpos antimitocondriales (AMA)
Se utilizan en enfermedades del hígado, se utiliza en la Cirrosis Biliar Primaria [se utilizan títulos altospara la determinación], en hepatitis crónica activa [se utilizan títulos bajos para la determinación].El sustrato que se utiliza es
riñón de rata
, se utiliza la fluorescencia en el citoplasma de los túbulosrenales de rata. Y también se pueden utilizar células Hep2.
Anticuerpo antimúsculo liso
También ayuda a detectar las enfermedades del hígado, se utiliza para confirmar junto con los demásexamenes el diagnostico y es sustrato que se utiliza es
estomago de rata.
Anticuerpo anticitoplasma de los neutrófilos
Existen dos tipos:
P anca:
son periféricos, anticuerpos contra la mieloperoxidasa
C anca: de
patrón citoplasmático, anticuerpo contra la proteinaza 3 de los neutrófilosAsociados principalmente a Vasculitis
2. TECNICAS NEFELOMETRICAS
Equipo especial automatizado que permite cuantificar 
 
proteínas del suero yotros …. Mide pequeñas cantidades es muy sensible y precisos. Los
 
equipos se llaman Nefelometros y lo que hacen es medir la luz dispersa. Cruce de un has de luz por untubo que contiene proteínas y cuando se produce la reacción antígeno anticuerpo produce un desvío deluz que es medido, según cuanta luz.Si se transmite mucho quiere decir que hay muchas proteínas desviando el rayo de luz.Sirve para medir todas las inmunoglobulinas menos la
IgE,
por que la E circula en muy baja cantidad por lo que se utilizan otras técnicas especiales para medirlas. Las inmunoglobulinas se utilizan para ver comoesta respondiendo el sistema inmune humoral pudiendo estar aumentado o diminuido dependiendo de lapatología que se trate.También sirve para medir el complemento C3 y C4.El complemento esta disminuido en el Lupus Eritematoso Sistémico y en las glomerulonefritis. Y seencuentra aumentado en las patologías inflamatorias como en la Artritis Reumatoidea. Mientras masunido mas concentrado se encuentra el complemento.El factor reumatoideo son
antianticuerpos que están dirigidos contra la inmunoglobulina G
. sepueden detectar distinto factores reumatoideos
Ig, Igm o Iga
. Pero el mas frecuente es Ig M y de muy utilen el diagnostico de artritis reumatodidea y se informa por cantidades, el hecho que vaya bajandoimplica que hay una buena respuesta al tto.También se puede medir la antiestreptolisina O, que se utiliza como diagnostico de la Amigdalitis por estreptococos grupo A, este estreptococo produce exotoxinas y una de esta es la estreptolisina O quees medida en el laboratorio. Recordemos que la amigdalitis purulenta por estreptococo A podia producir fiebre reumática y una reacción cruzada donde produce un reumatismo en las válvulas del corazón o unaglomerulonefritis aguda. Es muy importante su medición en el laboratorio como diagnostico de estasenfermedades.
3. TECNICA DE AUTOINMUNIDAD POR ENZIMA DE INMUNO ANALISIS [EIA] o ELISA
Se utiliza para medir.
Anticuerpo antipeptido citrulinado, en la Artritis Reumatoide.
Csl70 para la esclerodermia
SCAro para Sjoegre
Sm para Lupus
Rnt para la enfermedad mixta del tejido conectivo
Jo1 para la poliomiositisConsiste en una reaccion antigeno anticuerpo que ocurre enunos microposillos que presentan unas placas que tienenpegados un anticuerpo, uno pone un antigeno se forma unareaccion antigeno anticuerpo que viene unido a una enzimaque cambia de color y se mide el cambio de color.Cambio de color positivo. Sin cambio es negativo.
4. TECNICA DE ELECTROFORESIS DE PROTEINAS PLASMATICAS
Consiste en poner el plasma del paciente en un campo eléctrico donde las proteínas migran desde elpolo negativo (cátodo) hasta el polo positivo (ánodo), todas las proteínas tienen carga y algunas son maspositivas que otras y van quedando en el camino según su carga y el peso molecular.Es muy importante en el diagnostico del mieloma múltiple para ver las hipogamaglobunilemias osíndrome necrótico.Se utiliza un gel de Agarosase marcan las muestras y sedeja pasar un par de horas ylas proteínas comienzan amigrar hacia el polo positivo.Y se utilizan tensiones paraver como migraron lasproteínas y se ven distinasintensidades de color.

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