ANALISIS RESPON IMUN HASIL VAKSINASI

Vaksin aktif
humoral dan seluler

Vaksin inaktif
Humoral, Seluler ????

Vaksin rekonmiban subunit

Humoral, seluler (???)

Vaksin rekombinan hidup

Humoral dan seluler

Vaksin DNA
Seluler dan humoral

Torloni MD 2001

Analisis kekbalan humoral

Uji Serologi
ELISA HA/HI FAT CFT dst

Torloni MD 2001

Analisis kekebalan mukosa (IgA)

Vaksin tertentu dapat dilakukan melalui mukosa untuk merangsang imunitas lokal (IgA)
Mata Hidung mulut

Respon imun mukosa dapat dilakukan dengan uji ELISA menggunakan anti-IgA sebagai antibodi sekunder
Torloni MD 2001

Sampel

Bilasan mukosa (lavage)

Mis. Lung lavage

= antigen

= antibodi dari bilasan mukosa

= Anti-IgA-enzim) = subsrat

Interpretasi hasil adalah OD, ELISA unit, ELISA rasio dll

Torloni MD 2001

Analisis kekebalan seluler

Yang dianalisis
Daya proliferasi limfosit Sitokin mRNA

Torloni MD 2001

Kekebalan seluler

Torloni MD 2001

Limfosit T

Mengenali antigen hanya yang disajikan dalam mmolekul MHC Menghasilkan Lymphokines (bukan antibodi) Kerjanya diperantarai oleh sel

Torloni MD 2001

Aktivasi sel T
Lymphokines dihasilkan oleh limfosit Cytokines dihasilkan oleh sel lainnya cells

Autocrine Stimulation

Paracrine Stimulation
Torloni MD 2001

Subpopulasi sel T

CD-4

T-Cell

CD-8

Membantu sel B (THelper)

Cytotoxic T Lymphocytes (CTL)

Torloni MD 2001

Aktivasi sel T
Tujuan:

Expansi klonal dari sel T CD4 atau CD8

Torloni MD 2001

IL1

B7

CD28

TCR

CD4

IL2

IL2

IL2

IL2

T-Cell
Clonal Expansion
Torloni MD 2001

IL1
CD4

1- sel CD4 distimulasi oleh antigen

Macrophage

CD4 Cell
MHC II
IL2

IL2 receptors

CD4

2-Sel T-menemukan sel dengan antigen yang dibawanya

IL2

B-Cell
IL5 IL2 IL4 IL6

2- Sel menyebabkan sel B memperbanyak diri

Proliferasi

Sel Plasma

Sel Memory
Torloni MD 2001

Pengenalan antigen secara khas

Class II MHC

CD4

antigen TCR

Torloni MD 2001

Merangsang sekresi IL1

IL1

B7

CD28

TCR

CD4

IL2

IL2

Torloni MD 2001

Subset sel T- Helper

Th-1 Reaksi hipersensitivitas menghasilkan IL2 dan Gamma IFN CTL (aktivitas virosidal) T Th-2 Aktivasi sel B Menghasilkan IL-4 dan IL-5 (no IL-2 or Gamma IFN) aktivitas antibodi

Torloni MD 2001

Stimulasi sel B
T-Cell B-Cell
2- Release

LFA3

LFA1

1- Binding Tidak ada kekhasan antigen

Torloni MD 2001

T-Cell

LFA3

B-Cell 2- Antigen specificity B-Cell

LFA1
Prolifereation

Plasma Cell

Memory Cell

1- Binding

3- B-Cell Proliferation
Torloni MD 2001

Aktivasi sel T sitotoksik

Semua sel berinti mengekpresikan MHC I Sel pembawa ag asing melalui MHC I akan dianggap benda asing oleh tubuh Mengenali antigen yang disajikan oleh molekul MHC-1

- sel terinfeksi virus - Sel Tumor

Torloni MD 2001

Peran Sitokin: Interleukin-1

Acute Effects: Macrophage
IL-2 production IL2 receptor production B-Cell Proliferation NK Cell Activity Acute phase reactants

LPS Toxins Foreign material

Fever

Monocyte

PMN demargination PMN degranulation

Prostaglandin release (fibroblasts & monocytes)

Chronic Effects:
Muscle wasting Depression Sleep disturbance Loss of appetite
Torloni MD 2001

Role of Cytokines : Interleukin-2

Detected 2 - 6 hrs after after antigen stimulation Short half life Amplifies Cellular Immune response locally Stimulates B-Cell proliferation Induces IgG2 production

activity of NK cells

*Kills cells resistant to NK cell - independent of MHC

Torloni MD 2001

A
Antigens from plasma bind to pre-formed IgE attached to mast cells

B
Antigen binding causes activation of histamine release mechanism from mast cells.

C
Histamine is released from mast cells and causes increase in vascular permeability

Torloni MD 2001

Role of Cytokines : Interleukin-4

promotes resting B-Cell expansion
Produced by T-Helper cells Activation / Proliferation of B cells previously stimulated by antigen Enhances expression of MHC II molecules Induces production of CD-23 on B Cells surface Induces IgG 1 synthesis Essential in IgE formation Role in converting other cytokines Similar to IL-13

IL-4

Torloni MD 2001

Role of Cytokines : Interleukin- 5

Th-Cell

IL-5
B-Cell

Prolifereation

IL-6
Memory Cell Plasma Cell

IL5 induces production of IGM and class switching to IGA

Torloni MD 2001

Interferons
Awalnya diduga hanya berperan dalam menghambat replikasi virus

Virus

Virus

I I I I I

Virus

X
Interferon
Torloni MD 2001

Normal Viral Replication

Assay in vitro

Lymphocyte proliferation assay

MTT assay Radioisotope assay

Cytokine assay
Il2 IL4 IFN gamma

Torloni MD 2001

Assay in vitro

PCR mRNA dari sitokin ----------cDNA Polymerase chain reaction

Torloni MD 2001

MTT assay

Mitrokondria sel yang hidup menghasilkan enzim yang mampu mengubah garam MTT (bening kekuningan) menjadi formazan (biru keunguan dan keruh) Makin banyak sel hidup, makin banyak enzim yang dikeluarkan danmaki pekat warna formazan yang terbentuk Tingkat kepekatan (Optical density/OD) berbanding lurus dengan jumlah sel hidup (daya prolifersasi)
Torloni MD 2001

Radiisotop assay

Jika limfosit asal sapi kebal terhadap antigen tertentu ditumbuhkan dalam media yang mengandung nukleotida beradioaktif, maka jumlah radiokatif yang diambil oleh sel berbanding lurus dengan jumlah sel hidup (daya proliferasi). Makin tinggi radiasi radioaktif makin banyak sel yang hidup, daya prolifersasi makin tinggi

Torloni MD 2001

Sitokin assay

ELISA kit untuk melacak sitokin tertentu (Sandwhich ELISA). Sitokin dependent-proliferasion assay
Ada benyak sel lines yang mampu tumbuh bila di mediumnya ada sitoin tertentu Mislanya Tc-Kan9 cell line merupakan sel line yang bergantung pada IL2

Torloni MD 2001