Informe de Laboratorio Nº _2_

BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

INFORME DE LABORATORIO Nº 2

BIOQUÍMICA 2

TEMA:

_________Extracción de ADN_____

INTEGRANTES:

CÓDIGO APELLIDOS Y NOMBRES CORREO ELECTRÓNICO

2008015460 Peña Moran María Isabel maritza_crazy168@hotmail.com

2008015683 Salome Ordoñes Vanessa vanessalome@hotmail.com

2008003532 Salvatierra Ccachulli Amys Celestina syma_0210@hotmail.com

2008235371 Serrano Yarleque Soraida Brigitte brigitte_1415@hotmail.com

2008013626 Zambrano Sayas Linda Lady adriana_2330@hotmail.com

DOCENTE:

Ing. Guillermo Chumbe Gutiérrez

Semestre 2009 – II

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

Página 1 de 11
 Informe de Laboratorio Nº _2_
BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

I. INTRODUCCIÓN

ADN es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico (en inglés, DNA). Constituye el

material genético de los organismos. Es el componente químico primario de los
cromosomas y el material del que los genes están formados.

La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar tienen
que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al
núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear
para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan
degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.

Por eso que en este informe de laboratorio mostramos, su definición y algunos conceptos y
conocimientos que debemos tener y están relacionados a este tema; y también contiene la
práctica de laboratorio que realizamos y los cálculos correspondientes.

II. MARCO TEÓRICO

ÁCIDOS NUCLEÍDOS
Son moléculas constituidas por C, H, O, N y P. Relacionados con la conservación,
constituye el material genético de los organismos. Es el componente químico
primario de los cromosomas y el material del que los genes están formados. Se
componen de un pequeño grupo de unidades monomericas denominadas
nucleótidos, unidos mediante enlaces covalentes fosfodiester.

Tenemos:

• ARN
• ADN

• El ADN:

Esta formado por dos cadenas de polinucleotidos complementarios y dispuestos en

doble hélices sus bases nitrogenadas son adenina, timina, citosina, guanina;
carecen de uracilo.

La complementación de bases se debe a la formación de enlaces tipo puente de

hidrogeno.

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

Página 2 de 11
 Informe de Laboratorio Nº _2_
BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

• La extracción de ADN de una muestra celular:

Se basa en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia las cargas
negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula.

Para esto tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para
poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la
membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de
enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en
alcohol.

III. MATERIALES Y MÉTODOS

MATERIALES Y REACTIVOS:

Para la siguiente determinación se utilizo lo siguiente:

3.1 Materiales
• Gradilla
• Colador o Centrífuga
• Rallador
• mortero

3.2 Muestra
• Cebolla
• Ajos
• Tomate
• Leche

3.3 Material de vidrio

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

Página 3 de 11
 Informe de Laboratorio Nº _2_
BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

• Tubos de ensayo
• Varillas de vidrio
• Vasos de precipitado de 150 – 250 ml (12 unidades)
• Pipetas

3. 4 Reactivos
• Agua (destilada o mineral)
• Sal de mesa
• Bicarbonato sódico
• Detergente líquido o champú
• Alcohol isoamílico a 0ºC.

3.5 Equipos
• Nevera
• Balanza analítica

METODOLOGìA:

La extracción de ADN requiere una serie de métodos básicos. En primer lugar

tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder
acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la
membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN
de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en
alcohol.

IV. DESCRIPCIÓN DE LA PRÁCTICA

• Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un

baño de hielo triturado: 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No
usar agua del grifo. 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura. 5 g de bicarbonato
sódico. 5 ml de detergente líquido o champú.

AGUA DESTILADA:

120ml

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

Página 4 de 11
 Informe de Laboratorio Nº _2_
BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

SAL DE MESA:

1,5g

BICARBONATO DE SODIO:

5g

CHAMPU:

5ml

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

Página 5 de 11
 Informe de Laboratorio Nº _2_
BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

La
solución
TAMPON

• Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber
(cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.

Tomate cebolla ajos leche

• Triturar la muestra con un mortero. Así se romperán muchas células y otras quedarán
expuestas a la acción del detergente.

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

Página 6 de 11
 Informe de Laboratorio Nº _2_
BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

• Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y
agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos
vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más
fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el
sobrenadante.

• Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de

alcohol isoamílico enfriado a 0ºC. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la
cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre
el tampón.

ALCOHOL ISOAMÍLICO:

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

Página 7 de 11
 Informe de Laboratorio Nº _2_
BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

Se añade 10ml de
alcohol isoamílico a
0ºC a cada caldo
molecular…
AJOS:

TOMATE:

LECHE:

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

Página 8 de 11
 Informe de Laboratorio Nº _2_
BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

CEBOLLA:

• Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación

entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a
poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto
retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido
a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.

Ajo Tomate

Leche Cebolla

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

Página 9 de 11
 Informe de Laboratorio Nº _2_
BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

V. RESULTADOS Y DISCUSIONES
Describir lo encontrado en la experiencia realizada

1. Tubo de ensayo ( Cebolla) : la coloración que presenta es blanquecina se

pequeñas muestras de ADN

2. Tubo de ensayo ( ajos): la coloración que presenta amarillento pálido donde

también podemos apreciar pequeñas muestras de ADN

3. Tubo de ensayo (Tomate): la coloración presenta rojiza, fragmentos de ADN

en la parte Central.

4. Tubo de ensayo (leche): la coloración de tipo cremosa, mayor conglomeración

de fragmentos de ADN.

Resultados finales de la Practica de la Extracción de

ADN

VI. C ONCLUS
IONES
• A modo de conclusión podemos decir que este informe ha dado a conocer
aspectos de la vida natural perceptible como imperceptible a muestras
sentidos, es decir, explica aquello que podemos ver a simple vista como lo
que no lo podemos ver tan fácilmente.

• El método utilizado para la extracción de DNA, permite purificar en un grado

relativamente alto (porque depende con la precisión de la toma de muestras y

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

Página 10 de 11
 Informe de Laboratorio Nº _2_
BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II

de procedimiento su éxito) y pudimos determinar que es factible utilizarlo en

posteriores ocasiones ya que es muy fácil de utilizar y se presta para varias
aplicaciones.

VII. BIBLIOGRAFÍA

• http://www.cienciahoy.org.ar/hoy08/adn.htm

• http://www.jpimentel.com/ciencias_experimentales/pagwebciencias/pagweb/la
_ciencia_a_tu_alcance_II/quimica/Experiencias_quimica_extraccion_de_adn.
htm

• Editorial Aduni tercera edición de biología y anatomía

• http://html.rincondelvago.com/experimentos.html
AUTOR
Julián Esteban Londoño

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

Página 11 de 11