CUESTIONARIO DE PREGUNTAS DEL LABORATORIO DE BIOQUIMICA Y MICROBIOLOGIA

Alumno: Natividad Alvarado, Henry Alex

1.- A que llamamos ADN recombinante en biotecnologa? El ADN recombinante es resultado del uso de diversas tcnicas que se utiliza para manipular las molculas de ADN. El proceso consiste en tomar una molcula de ADN de un organismo, sea un virus, planta o una bacteria y en el laboratorio manipularla y ponerla de nuevo dentro de otro organismo. Esto se puede hacer para estudiar la expresin de un gen, para producir protenas en el tratamiento de una enfermedad gentica, vacunas o con fines econmicos y cientficos. 2.- Que entiende usted por un plasmido? Un plasmido, es una pieza de ADN, pequea y circular que se encuentra frecuentemente en bacterias. Esta molcula, debido a los genes que porta, puede por ejemplo ayudar a la bacteria a sobrevivir en presencia de un antibitico. Los plsmidos son importantes porque se pueden (1) aislar en grandes cantidades, (2) cortar, dividir e insertarles cualquier pieza de ADN, (3) devolverlo nuevamente a la bacteria donde se replicarn junto con el ADN nativo y (4) ser aislados nuevamente, obtenindose billones de copias del ADN que se les insert. 3.- Cul es el uso de las endonucleasas en la biotecnologa? Las endonucleasas, llamados tambien enzimas de restriccin, son aquellos que cortan el ADN por unas secuencias especficas, generalmente, constituidas por 4 u 8 pares de bases. Estos puntos de corte se llaman secuencias de reconocimiento. Algunos de estos enzimas cortan cada cadena en lugares separados por algunos nucletidos y, como resultado, aparecen secuencias de ADN de una sola hebra en los extremos de corte. Estos extremos se denominan pegajosos, puesto que pueden unirse de nuevo, restablecindose espontneamente los puentes de hidrgeno entre las bases complementarias. Los endonucleasa permiten unir extremos pegajosos, procedentes de cualquier molcula de ADN (incluso de especies distintas), que hayan sido cortados por el mismo enzima. De esta forma, se pueden sintetizar molculas de ADN recombinante, como pueden ser plsmidos, que contengan genes humanos.

4.-Explique la accin de la ampicilina como un inductor de la replicacin de un plsmido La accin de la ampicilina es para saber que bacterias estn en un plsmido. Para esto se necesitan genes indicadores tales como los genes de resistencia antibitica (genes resistentes a la kanamicina o la ampicilina). As uno se asegura que el plsmido tenga un gen indicador. Si el plsmido est marcado con un gen de resistencia antibitica se puede agregar ahora el antibitico especfico al alimento suplementario de la bacteria. Todos aquellos que no posean el plsmido morirn y todos aquellos que lo posean se multiplicarn. Las bacterias seleccionadas se utilizarn posteriormente en un cultivo embrionario de la especie a modificar. La bacteria inyecta su material gentico dentro de las clulas embrionarias, dando lugar a un organismo, ahora transgnico que portar la resistencia transferida va laboratorio 5.- A que llamamos el ADN complementario (cDNA) y cul es su funcin? El ADN complementario ADNc (cDNA) es una molcula de ADN complementaria a una molcula de ARNm. Se obtienen mediante la enzima transcriptasa inversa a partir de las molculas de ARNm de la clula. La transcriptasa inversa procede de retrovirus y usa como molde una cadena sencilla de ARN para dar lugar a una cadena sencilla de ADNc. La transcriptasa inversa emplea ARNm maduro como molde y por tanto el ADNc no contiene los intrones que poseen los genes eucariotas. As las secuencias de ADNc corresponden nicamente secuencias codificadoras de protenas. Los usos del ADNc son mltiples: Creacin de genotecas de expresin. Libreras de ADNc correspondiente al conjunto de genes expresados en un estado determinado. Los fragmentos de ADNc se integran en un vector y se generan clonos expresando cada uno de los fragmentos. Clonacin de genes integrando el ADNc correspondiente al gen en un vector bacteriano. Este sistema permite obtener grandes cantidades de protena en las clulas transformadas. Deduccin de la secuencia de aminocidos de la protena correspondiente al ARNm del que procede el ADNc.