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EN PORTADA / PARMETROS SANGUNEOS

Hematologa y bioqumica en reptiles

En este trabajo vamos a referirnos no al mtodo de extraccin sino a la lectura de resultados, ya que la hematologa de reptiles tiene una serie de particularidades que la hacen especial en comparacin con la de aves y mucho ms claramente con la de mamferos.
Los anticoagulantes probados hasta la fecha en hematologa de reptiles son la heparina, EDTA y el citrato sdico. Los resultados observados son muy distintos en funcin del anticoagulante usado. Los anticoagulantes pueden interferir en algunos de los test hematolgicos por lo que deben realizarse siempre extracciones en las mismas condiciones y con las mismas concentraciones de anticoagulante, a fin de tener resultados comparables para distintas especies o distintos estados fisiolgicos. Si bien los eritrocitos pueden hemolizarse en soluciones quelantes de iones calcio como es el EDTA, este es un anticoagulante propuesto como idneo en iguanas segn trabajos recientes, siendo necesaria una mayor investigacin al respecto. Todas las tcnicas hematolgicas deben ser realizadas dentro de un margen de cuatro horas posteriores a la extraccin.

Descripcin esquemtica de cada tipo celular

Eritrocito
Tamao: 1 (referencia comparativa con el resto de clulas) Forma: oval Tincin (DQ): discretamente eosinfilo Ncleo: prominente. Basfilo uniforme. Ocasionalmente mitosis Citoplasma: uniforme N/C: 1/3 Grnulos: ausentes

Trombocito
Tamao: 0,33 (ncleo de eritrocito) Forma: - redondo compacto - ncleo con velo (tipo parsito) Tincin (DQ): muy basfilo Ncleo: marcadamente basfilo, oscuro Citoplasma: casi ausente. En tipo 2, casi transparente N/C: 1/0 a 1/2 Grnulos: ausentes Pluripotencial

Monocito
Tamao: 1 a 4 Forma: redondo. Apenas hay pseudpodos Tincin (DQ): ligeramente basfilo Ncleo: grande, arrionado, habichuela, en ocasiones circular. Cromatina muy compacta Citoplasma: pequeas vacuolas, color claro N/C: 1/1,5 Grnulos: ausentes

Basfilo
Tamao: 1 a 2 Forma: redondo y compacto Tincin (DQ): muy basfilo. En ocasiones aspecto de mancha oscura, sin apreciarse siquiera el ncleo Ncleo: centrado y basfilo, normalmente tapado por los grnulos Citoplasma: - Tipo 1: con grnulos abundantes y muy oscuros (aspecto normal) - Tipo 2: con grnulos abundantes pero vacos y casi transparentes (algunas tortugas) N/C: 1/3 Grnulos: muy abundantes. Redondos y grandes

Anticoagulantes
El EDTA produce un efecto variable en el hematocrito en funcin de la cantidad utilizada. Puede adems provocar roturas eritrocitarias en algunas especies, afectando negativamente a valores como el hematocrito, hemoglobina o recuentos totales de eritrocitos. El citrato se ha demostrado que provoca cristalizacin de la hemoglobina en la mayora de especies, provocando eritrolisis y alteraciones de forma que dificultan el anlisis citolgico. La heparina a razn de 1-3 mg/ml se considera el anticoagulante de eleccin en muchas especies de reptiles (principalmente en quelonios).

Recuentos celulares
Si se utiliza el sistema de Natt y Herrick, la sangre se diluye por este mtodo y el conteo celular se realiza segn los criterios establecidos para otras especies animales. Para el recuento de eritrocitos se
Tabla 2. Valores sanguneos en Tortuga Desrtica (Gopherus agassizii). Hematologa Rango
1,2-3,0 23-37 3-8 0-3 35-60 25-50 0-4 0-4 2-15

Eosinfilo
Tamao: 1 a 3 Forma: redondo Tincin (DQ): muy eosinfilo, ncleo poco basfilo Ncleo: muy excntrico, limitando con membrana celular casi siempre Citoplasma: repleto de grnulos. Clula frgil, suele verse rota por el mtodo de preparacin y con los grnulos dispersos a su alrededor N/C: 1/3 a 1/5 Grnulos: muy abundantes. Totalmente redondos y con una respuesta a la tincin color rosamagenta

Tabla 1. Algunos cambios en el recuento diferencial de leucocitos con las posibles repercusiones fisiolgicas y patolgicas. Tipo celular Aumento
Estivacin Inflamacin Enfermedad infecciosa Lesin tisular Estrs Neoplasia Leucemia mieloide Hivernacin Parasitacin interna Respuesta inmune (fagocitosis de inmunocomplejos en quelonios) Enfermedad autoinmune Parsitos sanguneos Enfermedad infecciosa Pirhemociton, iridovirus Enfermedad crnica Granulomas bacterianos Trematodos (spirorchidos) Enfermedad infecciosa Cambios antignicos Clamidiasis

Linfocito
Tamao: 0,5 a 2 Forma: redondo. Con pseudpodos en la periferia Tincin (DQ): basfilo, pero variable en funcin de la cantidad de ribosomas. Citoplasma ms claro Ncleo: ligeramente marginal, heterocromatina abundante Citoplasma: vacuolado, fagocitosis, no uniforme. En ocasiones marginal, casi inexistente N/C: 1/2 a 2/1 Grnulos: ausentes

Disminucin
Eritrocitos (x106/l) Hematocrito (%) Hivernacin Leucocitos (x103/l) Neutrfilos (%) Heterfilos (%) Linfocitos (%) Estivacin Monocitos (%) Eosinfilos (%) Basfilos (%)

Heterfilos

Eosinfilos

Heterfilo
Tamao: 1 a 3 Forma: redondo, en ocasiones amorfo Tincin (DQ): periferia eosinfila, el centro tiende a la transparencia, ncleo poco basfilo Ncleo: - Tipo 1: lobulado (iguanas, varanos, lagartos, pocas tortugas). Hasta seis lbulos es normal - Tipo 2: no lobulado (la mayora de tortugas, serpientes, cocodrilos). Central ligeramente excntrico Citoplasma: con grnulos variables. En ocasiones vaco, degranulado, casi transparente N/C: 1/3 a 1/5 Grnulos: abundantes. Tienden a ser ovalados, aunque se ven de distintas formas y respuesta a la tincin en una misma clula. Grnulos opacos y refringentes en una misma clula

Basfilos

Bioqumica
Calcio (mg/dl) cido rico (mg/dl) Glucosa (mg/dl)

Rango
9,0-17,0 2,2-9,2 30-150 2,2-5,0 25-250 0,1-0,4 10-100 1-30 130-157 2,2-4,5

Azurfilo
(principalmente en saurios y ofidios) Tamao: 1 a 3 Forma: redondo y uniforme Tincin (DQ): tono basfilo claro, ms claro a veces en el centro celular. Ncleo poco basfilo Ncleo: redondo, central, heterocromatina dispersa Citoplasma: con algunas vacuolas, algn contenido que sugiere grnulos (lisosomas?). Poco teido N/C: 1/3 a 1/4 Grnulos: nunca abundantes. Tienden a ser de distintas formas y respuesta a la tincin en una misma clula

Monocitos

Protenas totales (g/dl) LDH (UI/l) Creatinina (mg/dl) AST (UI/l) Bilirrubina (mg/dl) Sodio (mEq/l) Potasio (mEq/l)

Linfocitos (existen diferencias entre sexos)

Hivernacin Estivacin Malnutricin Inflamacin Disminucin Virus capacidad inmunitaParsitos (espironria (rinitis crnica) gidiasis, anasakiasis, Ambiente adverso hematozoa) Iatrognico Neoplasias (glucocorticoides, linforeticulares frmacos inmunosupresores)

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EN PORTADA / PARMETROS SANGUNEOS

Tabla 3. Valores sanguneos en Boa (Constrictor constrictor) y Pitn Real (Python regius). Hematologa
Eritrocitos (x106/l) Hematocrito (%) Leucocitos (x103/l) Neutrfilos (%) Heterfilos (%) Linfocitos (%) Monocitos (%) Eosinfilos (%) Basfilos (%)

Tabla 5. Valores sanguneos en Iguana Verde Comn (Iguana iguana). Parmetros bioqumicos
Protenas totales (g/l)

Constrictor constrictor
1,0-2,5 24-40 4-10 0-15 20-50 10-60 0-3 0-3 0-20

Python regius
6-12

Rango

Media

SD (desviacin estndar)
9,09 1,75 8,06 25,4 85,6 17,5 13,2 1 1,96 2,06 1,8 0,32 0,47

Parmetros hematolgicos
RTE (x102/l) RTL (x109/l) Hematocrito (l/l) Hemoglobina (g/dl) VCM (fl) HCM (pg) CHCM (g/dl) Heterfilos (x109/l) Azurfilos (x109/l) Linfocitos (x109/l) Eosinfilos (x109/l) Monocitos (x109/l) Basfilos (x109/l)

Rango

Media

SD (desviacin estndar)
0,25 2,8 0,04 1,4 46 13,6 5,2 1,66 0,49 1,77 0,075 0,018 0,425

50-78 21-28 25-43 70-140 50-290 5-68 5-52 0-3 2,7-8,6 0,6-7,8 9,4-16 2,2-3,5 1,5-3,0

59,1 25,4 33,6 89 142 16 17 0,9 5,24 2,41 11,85 2,89 2,41

1,0-1,9 3-10 0,25-0,38 6,0-10,0 165-305 48-78 20-38 0,35-5,2 0,0-1,7 0,5-5,5 0,0-0,3 0,0-0,1 0,0-0,5

1,41 6,1 0,31 8,1 228 59,4 26,3 1,84 0,63 3,27 0,04 0,009 0,306

25-40 Albmina (g/l) 6-12 Globulinas (g/l) 0-20 cido rico (mmol/l) 20-60 10-60 0-3 0-3 0-10 Fosfatasa alcalina (U/l) Alanina aminotransferasa (U/l) Aspartato aminotransferasa (U/l) Gamma-glutamil transferasa (U/l) Colesterol (mmol/l)

Bioqumica
Calcio (mg/dl) cido rico

Constrictor constrictor
10-22

Python regius
Triglicridos (mmol/l) 10-22 Glucosa (mmol/l)

(mg/dl) Protenas totales (g/dl) LDH (UI/l) AST (UI/l) Bilirrubina (mg/dl)
Sodio (mEq/l) Potasio (mEq/l) Glucosa (mg/dl) Creatinina (mg/dl)

1,2-5,8 4,6-8,0 30-300 5-35

<1-10 130-152 3,0-5,7 1,2-5,8 <0,1-0,3

1,2-5,6
Calcio (mmol/l)

5,0-8,0
Fsforo (mmol/l)

40-300 5-30
<1-10 130-152 3,0-5,7 1,2-5,6 <0,1-0,3

utilizan los cuadros extremos y el central del retculo medio de una cmara de Neubauer modificada. La dilucin en pipeta y el clculo es el mismo que el utilizado en aves. El conteo de leucocitos se determina mediante el nmero de clulas teidas en los nueve cuadros de la cmara. El nmero total de leucocitos se calcula aplicando la misma ecuacin que en aves. En la tabla 1 se muestran algunos de los cambios en el recuento diferencial de leucocitos con las posibles repercusiones fisiolgicas y patolgicas.

tinciones usadas en cada pie de foto. La imagen celular de cada especie vara enormemente. En las fotografas se incluyen las clulas de una misma especie de saurio (Gallotia spp.) en el que se diferencian bien las estructuras bsicas. Los heterfilos de iguanas son muy parecidos a los mostrados en este estudio. Sin embargo en tortugas, cocodrilos y serpientes son muy distintos. La presencia de parsitos intraeritrocitarios es comn en saurios y serpientes y, al parecer, raras veces est relacionado con enfermedades.

Tabla 6. Valores sanguneos en Tortuga Radiada (Geochelone radiata). Hematologa

Eritrocitos (x106/l) Hb (g/dl) Hematocrito (%) Leucocitos (x103/l) Heterfilos (x103/l) Linfocitos (x103/l)

Rango (media)
0,35-0,67 (51) 4,5-8,6 (6,7) 19,0-45,0 (31) 2,5-5,9 (4,3) 0,68-3,4 (2,0) 0,4-3,4 (1,6)

La presencia de parsitos intraeritrocitarios es comn en saurios y serpientes y, al parecer, raras veces est relacionado con enfermedades.
Heterfilo y eritrocitos (Diff Quick).

Tabla 4. Valores sanguneos en cocodrilianos. Hematologa

Eritrocitos (x106/l) Hematocrito (%) Leucocitos (x103/l) Hemoglobina (g/dl)

Caiman latirostris
0,6-1,48 26 (18-32) 6,4-10,2 3,5-11,3

Alligator mississipiensis
0,6-1,48 20 (18-28)

Tanto los conteos de eritrocitos como los de leucocitos pueden realizarse en la misma muestra de sangre. El recuento diferencial se realiza comnmente usando la tcnica de tincin de Diff Quick, rpida y fcil de realizar, aunque no es la que mejor contraste celular proporciona. En las imgenes que se incluyen en este artculo se indican las

El conteo de trombocitos puede verse incrementado como respuesta a hemorragias o a infecciones bacterianas (realizan fagocitosis de bacterias y restos eritrocitarios). Un descenso o trombocitopenia se observa en anemias graves (como consecuencia de la transformacin en clulas capaces de transportar hemoglobina) o en enfermedades mieloproliferativas.

Monocitos (x103/l) 0,025-0,47 (0,15) Eosinfilos (x103/l) 0,025-0,53 (0,18) Basfilos (x103/l) 0,10-0,94 (0,34)

Bioqumica
Calcio (mg/dl) Fsforo (mg/dl)

Rango (media)
10,8-14,4 (12,2) 2,6-4,3 (3,19) 0,0-0,6 (0,28) 46,2-92,8 (59,8) 3,2-5,0 (3,97) 0,8-1,3 (1,1)

6,4-10,2 cido rico (mg/dl) 3,5-11,3

Bioqumica
Calcio (mmol/l) Protenas totales (g/l) Sodio (mmol/l) Potasio (mmol/l) Cloro (mmol/l) Magnesio (mmol/l) Glucosa (mg/dl) cido rico (mg/dl) Urea (mmol/l) Colesterol (mg/dl)

Caiman latirostris
2,6-7,9 51-65 140 3,8 108 1,9-2,9 2,8-5,5 3,0-4,47 0 -

Alligator mississipiensis
2,6 51-65 141 3,8 112 2,6-3,3 4,07 1,0-4,1 0
ARGOS

Glucosa (mg/dl) Protenas totales (g/dl) Albmina (g/dl)

Colesterol (mg/dl) 60,2-153,5 (105,2) LDH (UI/l) AST (UI/l) Fosfatasa alcalina (UI/l) Sodio (mEq/l) Potasio (mEq/l) Cloro (mEq/l) Dixido de carbono (mEq/l) 213,4-591,5 (104,8) 42,0-134,0 (72,7) 72,0-120,0 (92,7) 121,0-132,0 (126,8) 5,1-5,8 (5,5) 92,0-99,0 (96,5) 24,0-29,0 (26,2)

50 (22-88)

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Tabla 8. Valores sanguneos en Tortuga de Orejas Rojas (Trachemys scripta elegans). Hematologa
Eritrocitos (x106/l) Hematocrito (%) Hemoglobina (g/dl) Leucocitos (x103/l) Heterfilos (%) Linfocitos (%) Monocitos (%) Basfilos (%)
ARGOS

Rango
0,37-0,78 12-26 5,9-8,9 9,7 34 39,5 1 1,5

Bioqumica
Calcio (mg/dl) cido rico (mg/dl) Glucosa (mg/dl)

Rango
1 70 3,6 213-591 83-53 143 3,2

A. Martnez Silvestre
CRARC (Centro de Recuperacin de Anfibios y Reptiles de Catalua) E-mail: Crarc_comam@hotmail.com Fotografas: A. Martnez Silvestre, R. Cuenca, S. Lavin, I. Marco (Unidad de Patologa Medica, Facultad de Veterinaria de la Universidad Autnoma de Barcelona)

Protenas totales (g/dl) LDH (UI/l) AST (UI/l) Sodio (mEq/l) Potasio (mEq/l)

Tabla 7. Valores sanguneos en Scinco gigante (Corucia zebrata) Hematologa

Eritrocitos (x106/l) Hb (g/dl) Hematocrito (%) Leucocitos (x103/l) Heterfilos (x103/l) Azurfilos (x103/l) Linfocitos (x103/l) Monocitos (x103/l) Eosinfilos (x103/l) Basfilos (x103/l)

Rango (media)
0,84-1,43 (1,45) 7,4-11,6 (9,58) 24-60 (35,45) 3,93-22,4 (12,36) 1,02-6,4 (4,39) 0,4-4,8 (2,76) 0,3-4,7 (2,67) 0,0-1,0 (0,07) 0-3,0 (0,56) 0,1-4,3 (1,92)

Tabla 9. Valores sanguneos en Anaconda (Eunectes murinus). Hematologa

Hematocrito (%) Leucocitos (x103/l) Heterfilos (%) Linfocitos (%) Monocitos (%) Basfilos (%) Azurfilos (%)

Rango (media)
14-31 (24,1) 5,04-26,8 (13,2) 5-52 (23,5) 17-93 (40,3) 1-4 (1,7) 1 (1) 0-65 (35,3)

ingenasa

Bioqumica
Calcio (mg/dl) Fsforo (mg/dl) cido rico (mg/dl) Protenas totales (g/dl) LDH (UI/l) AST (UI/l) ALT (UI/l) Colesterol (mg/dl) Sodio (mEq/l) Potasio (mEq/l) Glucosa (mg/dl) Creatinina (mg/dl) Albmina (g/dl) Globulina (g/dl)

Rango (media)
7,7-16,7 (13,3) 3,2-14,9 (5,6) 5,2-13,5 (8,7) 4,7-7,1 (5,7) 38,5-114,3 (59,7) 15,2-45,5 (28,4) 10,4-26 (17,3) 122-289,5 (203,1) 146,6-159,2 (153,9) 3,7-6,2 (4,7) 41-98,7 (54,2) 0,3-0,7 (0,5) 1,8-3,5 (2,3) 2,9-4,3 (3,4)

Bioqumica
Calcio (mg/dl) Fsforo (mg/dl) cido rico (mg/dl) Glucosa (mg/dl) Slidos totales (g/dl) Colesterol (mg/dl) AST (UI/l) Fosfatasa alcalina (UI/l) Sodio (mEq/l) Potasio (mEq/l) Cloro (mEq/l) Fibringeno (mg/dl)

Rango (media)
11,0-21,2 (13,2) 2,8-6,7 (3,7) <0,3-3,1 (1,6) 70,0-122 (99,9) 5,0-8,0 (6,5) 11-252 (143,9) <4-76 (18,9) 27-940 (210,4) 145-167 (158,2) 1,4-5,0 (3,57) 123-129 (124,2) 0-500 (75,0)