Sistema de Revisiones en Investigacin Veterinaria de San Marcos

Glicosilacin de las Protenas Sanguneas

REVISIN BIBLIOGRFICA - 2009

Autores: MV EfrainMato Felix Universidad Nacional Mayor de San Marcos Facultad de Medicina Veterinaria Curso:Investigacin II Maestra en Salud Animal

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GLICOSILACINDELASPROTENASSANGUNEAS

I.Presentacin

II.HemoglobinaGlicosilada A finales de la dcada de los 60 se comprob que fracciones menores de la hemoglobina,identificadasmedianteelectroforesis enagargelocromatografadeintercambioinico, seencontrabanelevadasendiabticos.Estocondujo alacaracterizacindeestasfraccionesmenores comocombinacionesdeglucosayhemoglobina formadaspormodificacionesposttraslacionales,a lasquesedenominhemoglobinaglicosilada(Bunn etal., 1975Bunn,1981).

Eldiagnsticoclsicodediabetesmellituse insulinomaenperrossebasaenlossignosclnicosy enlaevaluacindelasconcentracionesdeglucosa sangunea.A pesar queel diagnstico de estas enfermedadesesrelativamentesencillo,existenotros procesosquepuedencursarconsignosclnicos similares.Adems,hayquetenerencuentaquela glucemiaencondicionesnormalessufregrandes variacionesalolargodelda,debidoalejercicio, estrs, alimentacin o tratamiento con algunos frmacos.Porlotanto,unnicoanlisisdeglucosa reflejalaconcentracindeglucemiaquetieneel animalenelmomentoenqueseharecogidola muestra, pudiendo no ser suficiente para el diagnstico y sobre todo para el control del tratamiento.

Sehadeterminadoqueenlassemanasque siguen a un control ptimo de la diabetes esta hemoglobina glicosilada tiende a disminuir lentamente,mientrasqueaumentaalempeorarel controldelaenfermedad.Enbaseaestehecho,la determinacindelahemoglobinaglicosiladaha llegadoaconvertirseenelestndardeoropara Desde hace algn tiempo se sabe que lavaloracindelcontrolmetablicodurantelas diversasprotenassanguneassoncapacesdeunirse semanas precedentes (Gabbay et al., 1977 alaglucosadandolugaralaformacindeunos Shamoon etal., 1986). compuestosglicados(fructosaminayhemoglobina glicosilada),cuyaevaluacinnospermiteconocer Lahemoglobinaglicosilada(HbA1c)esel losnivelesdeglucosaamslargoplazo(Armbruster, productodeunareaccinlenta,noenzimticae 1987). Se ha comprobado que hiperglucemias irreversibleyestdirectamenterelacionadaconlas agudas y transitorias no producen cambios concentracionesdeglucosasanguneaylavidamedia significativosenlasconcentracionesdefructosamina deloseritrocitos(120das).Lafraccinglicosilada yhemoglobinaglicosiladaenperrossanos(Marca msimportantedelahemoglobinaeslahemoglobina MC etal, 2000). A1c(Yue etal., 1982).Encondicionesnormales, lahemoglobinaglicosiladareflejalaglucemiamedia quehatenidoelanimaldurantelos2a3meses anterioresalanlisis(Dennis,1989).

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Laformacindehemoglobinaglicosilada tienelugarmedianteunprocesodeglicosilacinno enzimtica(Brownlee etal.,1984).Laglicosilacin noenzimticadelasprotenasocurreenlosgrupos aminoterminalesyenlosgrupospsilonaminode los aminocidos intracatenarios (por ejemplo, lisina).Seformaporlaadicindeglucosaala protenamedianteunareaccincontinuaylentaque esfuncindeltiempodecontactoentrelosreactantes ydelaconcentracindeglucosaintegradadurante dichoperiododecontacto(Calle,1992). Lahemoglobinaglicosiladamsabundante eslaHbAlc,queseformaporlaadicindeglucosa alosgruposvalinaterminalesdelascadenasbeta delahemoglobina.Enestacondensacin,elgrupo aldehdodelaglucosaformaunauninreversible baseSchiff,oaldimina,conelNterminaldela cadenabeta.Acontinuacin,estasbasesdeSchiff sufrenunareestructuracindeldobleenlacedeltipo Amadori(enhonordelqumicoquedescribien primerlugarestetipodereajuste),formndoseuna cetoaminaestable.Losnivelesdeequilibriodelos productostipoAmadoriybaseSchiffsealcanzan ensemanasyhoras,respectivamente(Brownlee et al.,1984).Estareaccin,comohemosdicho,no es enzimtica y es dependiente del tiempo de contactoydelaconcentracindeglucosaalaque estaexpuestoeleritrocito).Comolavidamediadel glbulorojoesde120das,laconcentracindela cetoaminareflejarlaglucemiaalaquehaestado expuestoduranteestetiempoyaque,sinserun productototalmenteestable,lareversibilidadse produceaunavelocidadtalquenoesapreciable durantelacortavidamediadelhemate(Bunn, 1981).

incluimostambinalaaldiminalbil,lapreAlc. Otrashemoglobinasglicosiladasdemenorentidad incluyenalaHbAlaylaHbAlb,formadasporla adicindefosfatosdeazcaralavalinaterminalde lascadenasbetadelahemoglobinaAoporuna modificacinulteriordelaHbAlc.Enconjunto, estoscomponentesseconocencomoHbA1(que puedeserestableototal,dependiendodesiseha eliminadoonolafraccinlbil).Adems,existen lashemoglobinasglicosiladasnoI7IbA1,formadas mediantelaadicindeglucosaalaminocidoN terminaldelacadenaalfaoalosgrupospsilonde losresiduosdelisina.Estoscomponentespueden interferir en ensayos qumicos, pero no en la cromatografadeintercambiocatinicooenla electroforesis(Calle,1992). Determinacin Cromatografa Losmtodoscromatogrficossonlosms comnmente utilizados. Incluyen grandes macrocolumnas para determinar HbAlc y microcolumnasque,habitualmentemidenHbAl,as como cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC)quedeterminaHbAlc.Contodosestos mtodossenecesitaeliminarpreviamentelabase Schifflbilyaque,encasocontrario,seestar midiendo una cantidad de preAlc que ser proporcionalalaconcentracindeglucosaenel momentodetomarlamuestradesangre(Calle, 1992).

Hayquetenerencuentaqueestaspruebas pueden estar interferidas por una serie de circunstancias:enlauremia(seformahemoglobina LaHbAlcestableserefieretansloala carbamilada) y alcoholismo (se forma HbAA. cetoamina,mientrasquecuandohablamosdetotal producida por la adicin de acetaldehdo a la
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hemoglobina)seproducecoelucinconlaHbAla+b, mientrasqueenelembarazo,talasemiayotras hemoglobinopatasseformahemoglobinafetal,que coeluye con la HbAlc. Esto puede producir determinaciones de hemoglobina glicosilada falsamenteelevadas.Porelcontrario,encasosde hemoglobinasqueemigranlentamente(comoenla anemiadeclulasfalciformesHbSyHbC),aunque se glucosiden no son medidas por tcnicas cromatogrficas,dandovaloresfalsamentebajos. Tambinlaaspirinayplasmaslechosospueden interferirenlatcnica(Calle,1992). Electrofor sis Estemtodoincluyeenfoqueisoelctricoen gelesdepoliacrilamida(daampliaseparacinde loscomponentesdelahemoglobina)yelectroforesis engelagar(midesloHbAlyrequierepersonal especializadoyundensitmetroexacto).Tambin requierenseparacinpreviadelafraccinlbily,a pesardesuprecisin,noseempleanmuchoporlo complicadosqueson.

no se ven afectadas por otras variantes de la hemoglobinay,sisevencenlasdificultades,sonmuy precisas(Calle,1992). Radioinmunoensavo Sehadesarrolladounradioinmunoensayo especficoparaladeterminacindelaHbAlc,pero hatenidounusolimitado. UtilidadClnica Lahemoglobinaglicosiladahaprobadoser unbuenmarcadordelcontrolglucmicomedio durantelavidadeleritrocito,aunquelosvaloresms recientestienen,proporcionalmente,unmayorpeso (Beach,1979).Estoesespecialmenteciertopara lahiperglucemia,comparadoconlahipoglucemia, dandolugaralaforismodequelahemoglobina glicosiladaesmssensiblealpecadoqueala penitencia, posiblemente debido a la irreversibilidadrelativadelreajustedeAmadoripara formarlacetoamina.Anas,suusoseconsidera hoydecapitalimportanciaenlaprcticaclnicaala horadeevaluarelcontrolmetablico,especialmente delasltimas48semanas(Koenigetal,1976 Bunn,1981). Cuando el control del azcar es muy inestablesereducelacorrelacinconlaglucemia media(Beach,1979Boden etal.,1980Pecoraro etal, 1982).Lahemoglobinaglicosiladatambin secorrelacionaconotraseriedeparmetrosde controlglucmico,comoglucosaplasmticabasal ypostprandial,desviacinestndardelaglucemia, suma de las concentraciones de glucosa pre y postprandiales,glucosuriasde24horas,etc.Sin embargo, estos productos precoces de la glicosilacin de las protenas no continan

Qumicos Estosmtodoscomprendenlastcnicas colorimtricas,fluoromtricasydecromatografade afinidad.Todassonespecficasparalacetoamina estable,noprecisandosepararanteslafraccinlbil. Midenlahemoglobinaglicosiladatotal,incluyendo losresiduosglicoenlosgrupospsilonaminoyen losaminoterminalesdelascadenasalfaybeta. Nosontcnicascaras,perosdifcilesde estandarizar,relativamentelargasyquepuedendar valoresespreamenteelevadosporformacinde novo deHbAlcduranteelensayo.Porelcontrario,
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acumulndoseenelcolgenoyotrasprotenas tisularesestablesalolargodelosaosdeevolucin deladiabetes,demodoquesuconcentracinno guardacorrelacinconlapresencianilaseveridad delascomplicacionesdeladiabetes(Vishwanath etal.,1986).Anas,estetemaescontrovertidoy sehanpublicadodatoscontradictorios(Ezcurraet al.,1990).Pareceserquelosresponsablesnoseran estosproductosdeglicosilacinprecocesperse sinootrosqueseformanmslentamente.Enefecto, losproductosdelosquesehahabladoalcanzanun equilibriotrasvariassemanasynoseproducems acumulacinposteriormente.Perohayreacciones deAmadorisubsiguientesquedanlugarlentamente aproductosfinalesdeglucosilacinavanzados,que no estn en equilibrio y que se acumulan indefinidamenteenmolculasdevidamslarga, producindosedeestemodounnexodeuninentre lahiperglucemiacrnica(y,portanto,lascifrasde hemoglobinaglicosiladaelevadas)ylosprocesos patofisiolgicosqueconducirnalascomplicaciones tardas de la diabetes (Brownlee et al., 1984 SteffesyMauer,1991). En general, podramos decir que la determinacin de hemoglobina glicosilada es especialmentetilenpacientesenlosquesebusque uncontrolmetablicooptimizado,comoduranteel embarazo,aunquetambinesuninstrumentomuy tilencualquierotrotipodediabticos.Enaquellos pacientes que rechacen o que no sepan hacer autocontrolesandemayorutilidad,ascomoen losquesilohagan,comocontroldecalidaddel mismo.Deigualmodo,losquerealicenautocontrol contansloglucosuriaspuedenbeneficiarsedela medicindeesteparmetro(Calle,1992).

sostenanlocontrario,perostosadolecandeuna seleccindesujetosinadecuada(obesos,sometidos aestrscrnicooconunadietaconuncontenido enhidratosdecarbonoincorrecto).Larsen etal. (1990)comprobaronqueelhechodeconocerel valordelahemoglobinaglicosiladasetraducaen uncontrolmetablicosignificativamentemejor,con unmenornmerodehospitalizacionesporhipoo hiperglucemia, cuando se comparaba con los resultadosobtenidosengruposenlosquenose dabaaconocerestedato. Sinembargo,lahemoglobinaglicosiladano estilparaeldiagnsticodeladiabetes,porsu menor sensibilidad y por la ausencia de estandarizacin.Asimismo,enpacientesdiabticos tipo2muyestableslautilidaddisminuye,porexistir endichospacientesbuenacorrelacinentrecontrol metablico global y glucemias basales. (Calle, 1992).

FrecuenciadelaDeterminacin Como ya se ha dicho, la hemoglobina glicosiladadocumentaelcontroldurantelavidadel eritrocito(120das),peroespecialmentedurante lasltimas4a8semanas.Duranteperiodosde estabilizacindebieramedirsecada1a2meses. Unavezconseguidadichaestabilizacin,podra bastarhacerlocada2a4meses(Beach,1979).

Por supuest o, esto se refiere a la determinacindelafraccinestable.Cuandose mideadiariolahemoglobinaglicosiladaenpacientes diabticosseobservaqueprcticamentenohay variacionesdaadaenlaparteestable,mientas Laedadnoinfluyeenlaglucosilacindelas queenlalbilseproducenoscilacionesimportantes protenas(Kabadi,1988),aunqueestudiosprevios (Compagnucci etal.,1981).Estecomponentelbil
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secorrelacionaconlaglucemiaenayunasenese alternativoalclculodelaprotenaglicosilada.La momento, lo que no sucede con el estable denominacinensesequvoca,yaqueparece (Compagnucci etal.,1981). implicar incorrectamente que el monosacrido fructosadesempeaunpapelesencialenlareaccin Si se trata de la HbAlc total (lbil ms (Calle,1992). estable)puedenproducirsecambiosdel12%tras aumentosodisminucionesagudasdelascifrasde A pesar que la fructosamina refleja la glucemia(Compagnucci etal.,1981Johnson et glucosilacintotaldelasprotenassricas,el90% al.,1983). desuvalorcorrespondealaalbminaglicosilada (Baker etal., 1985).Lafructosaminamidetambin III.Fructosamina unsustratonoidentificado,apartedelasprotenas sricas glicosiladas (Schleicher et al. , 1988). Lafructosaminaesunaprotenaglicosilada Aunquesehapropuestoajustarlosresultadosdela queseproducecontinuamenteenelcuerpoproducto fructosaminaalcontenidodealbminaoprotenas deunareaccinnoenzimticaeirreversibleentrela totalesensuero(McCance etal.,1987),estono glucosa y el grupo amino de las protenas parecesernecesarioenpacientesquenopadezcan plasmticas. La concentracin plasmtica de enfermedad aguda o nefropata severa, ya que fructosaminadependeprincipalmentedelosniveles aumentaloscostosenreactivos,equipoytcnica deglucosaydelavidamediadelasprotenas. sinaportarunbeneficioclnicamenteapreciable (ReuschyHaberer,2001).Lavidamediadeesta (Howey etal.,1989BrownyGrunberger,1991). protenaglicosiladaenperrosygatosesdeunaa dossemanas(Kaneko etal.,1992Jensen,1995 Sehadichoquelaalbminaolasprotenas ReuschyHaberer,2001).SegnLosteyMarca glicosiladascorrelacionanmejorquelafructosamina (2001),lafructosamina,alserunreflejodelos conlaHbAlc,loqueseexplicaporque,comohemos nivelesplasmticosdeglucosaeneltiempo,esde dicho, la fructosamina mide, adems de la utilidadalmomentodediagnosticarycontrolaral glucosilacindelasprotenassricas,unsustrato pacientediabtico. noidentificado,introduciendounfactordeerror potencial(Schleicher eta.,1988Winocar etal., Johnson, el ao 1982, ide un mtodo 1989).Perootrosestudiosnoencuentranestos simple,rpido,baratoyprecisoparalamedicin inconvenientesalafructosamina,contandostacon deprotenasplasmticasglicosiladas(Johnson et la ventaja adicional de consistir en un ensayo al.,1983)que,ligeramentemodificadoporBaker automatizado,conunautilidadclnicasimilaralade (Baker et al, 1985), se sigue utilizando en la la hemoglobina o la albmina glicosiladas y actualidad.Estemtodoseconocecomoeldela considerablementemseconmicoyrpidoquelos fructosaminaysebasaenlacapacidaddelresiduo anteriores(Winocour etal., 1989SobelyAbbassi, cetoamina,enpHalcalino,parareducirlassalesde 1991). tetrazlium(nitroazultetrazliumoNBT).La pruebadelafructosaminanomidenadanuevosino Adems,apesardedetectarcambiosenel que apenas representa un enfoque analtico control glucmico a ms corto plazo que la
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hemoglobina glicosilada, no se afecta por las UtilidadClnica modificacionesagudasdelaglucosa,midiendoslo elcomponentecetoaminaysiendoindependiente Aunquealgunosautoresdisientan(Dominiczak delaglucemiaenelmomentodelaprueba(Sobely etal.,1988),lamayoraencuentrabuenacorrelacin Abbassi,1991). entrelafructosaminayotrosparmetrosdecontrol metablicocomolahemoglobinaglicosilada,laglucemia Pasamosahoraacomentaralgunosdatos mediaolaglucemiabasal(Winocour etal.,1989).Se respectoalasinterferenciasyutilidadclnicadeestas ha visto que la correlacin es mejor en aquellos pruebas. pacientesquetodavaconservanreservapancretica deinsulina(Brichard etal.,1989). Interferencias La fructosamina, dada la vida media Encuantoalasinterferenciasdeltestdela notablemente ms corta del sustrato que mide, fructosaminahayqueconstatar,enprimerlugar,que comparado con la hemoglobina glicosilada (2.5 no existe una modificacin importante de la semanas versus 4 semanas), refleja el control concentracinodelavelocidadderenovacinde glucmicodeunperiodotambinsensiblementems las protenas sricas. En situaciones de cortoquelahemoglobinaglicosilada,delordende1a hipoproteinemia(hipercatabolismo,prdidasporla 4semanas(Flckiger etal., 1987AlgraveyCockrill, orina,dficitdesntesis,hemodilucin)seobtienen 1988AshbyyFier,1988Maugendre etal.,1990). valores falsamente bajos. Esta influencia es Evidentemente,estosuponequelafructosaminaesms despreciablesielniveldeprotenassuperalos6.5 sensiblealoscambiosproducidosenuncortoperiodo g/dloeldealbminalos3.03.5g/dl(VanDieijen detiempo.Estavariabilidadhasidoempleadacomo Visser etal.,1986Leutenegger,1991)Tambinel armaporlosdetractoresdelatcnica,aduciendoque aumentodelturnoverdelasprotenas,como alestarsometidaatantasoscilacionesesmenosfiable ocurreencasosdehipertiroidismooenteropata quelahemoglobinaglicosilada,lacualseramsfiable perdedoradeprotenas,davaloresdefructosamina porsumenorheterogeneidadymayorestabilidad, espreamentedisminuidos(LloydyMarpies,1986). generandomayorconfianzaalahoradeinterpretar A la inversa, si existe hiperalbuminemia o resultados(Howey etal.,1989). hipotiroidismo, la fructosamina puede estar falsamenteelevada. Estaposturanodejadeseralgomaniquea. Tambinhayquetenerencuentaquela Enefecto,lafructosaminanovieneasustituirsinoa reduccin del NBT no es privativa de la completaralahemoglobinaglicosilada,yaquela fructosamina.Paraminimizarinterferenciashayque informacinqueofreceescomplementaria(Ashbyy ajustar el tiempo de reaccin y el pH a las Frier,1988Winocar etal.,1989).Ensituacionesen recomendaciones actuales. An as, ciertos lasquesedebenregistrarcambiosrpidosenelcontrol componentesdelasangrepuedenreducirelNBT, deladiabetes,lafructosaminapuedeserdemayor comolostriglicridosolabilirrubina.Tambinla valorquelahemoglobinaglicosilada.Entreestas heparinapuedeinterferir(Maugendre etal.,1990). situacionespodemoscitarqueesdebidoaque:

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Diabetesinestable. Nodependedelpaciente,delahoradeldao Evaluacin de cambios en los regmenes de delascomidas. tratamiento. Sirve como control de calidad de las Enelembarazo,dondeelcontrolmetablicoes determinacionesdeglucemia,detectandodatos especialmenteestrictoyserealizanajustescon fraudulentos o errneos e indicando la periodicidadmuypequea.Hayqueteneren necesidadderevisarelprogramadetratamiento cuentalainfluenciadelahemodilucinquecon y educacin del propietario de la mascota frecuenciasepresentaenlasgestantes(humanos). diabtica En trastornos hematolgicos como hemoglobinopatasoanemias. Desventajas Enlainsuficienciarenallafructosaminasufre muchos menos cambios que la hemoglobina Documentansielcontrolmetablicoesbueno glicosilada. omalo,peronodicenquhayquehacerpara Encasosdeetilismo(humanos). mejorarlo. Cifras buenas pueden ocultar oscilaciones Entrelosdefectosdelafructosaminahayquedecir inaceptablesy,especialmente,hipoglucemias queadolecedeestandarizacin(Maugendre etal., asintomticas. 1990).Comosehavenidodiciendodelahemoglobina Tienenpocosignificadoparalospacientes. glicosilada,tambinenlafructosamina,comodeotras Losdasinmediatosalatomadelamuestra protenassricasglicosiladas,tienenmspesolos influyenmsenelvalortotalquelapartealcuota ltimos das, especialmente si se ha producido quelescorrespondera(sobretodoporloque hiperglucemia(AlgraveyCockrill,1988Winocour respectaalahiperglucemia). etal.,1989).Elusoconjuntodelafructosaminayde Requierenunatecnologaavanzadaycostosa lahemoglobinaglicosiladapermitedetectaraalgunos ypersonalespecializado.Esteinconvenientese pacientes manipuladores, que intentan mejorar minimizaenelcasodelafructosamina. notablementesucontroljustoantesdeacudirarevisin (en este caso, veriamos una fructosamina Comoyahemoscomentado,elusotanto desproporcionadamente buena con respecto a la delahemoglobinaglicosiladacomodelasprotenas hemoglobinaglicosilada). sricas glicosiladas o de la fruct osamina (especialmente de esta ltima, por razones de IV.Ventajasydesventajasdeladeterminacin viabilidadeconmica,sencillez,precisinyrapidez, delasprotenasglicosiladas an a costa de cierta menor sensibilidad) se enriqueceporreportarinformacionesdistintasy Ventajas complementarias.Leutenegger(1991)haideadouna frmulaquerelacionalafructosaminaylaHbAlc: Conunsolotestabarcamosunperiodode variassemanas. R=[fructosamina(micromol/l)x2.2]/HbAlc(%) Esobjetivo.

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Lonormalesqueestecocienteseaiguala V.LiteraturaCitada 100. Por encima revelara una descompensacin recientedelaenfermedad,mientrasquepordebajo 1. AlgraveJ, CockrillBL.1988. Fructosamine indicaraqueseestproduciendounamejora.Hay orglycatedhaemoglobinasameasureofdiabetic quesealarquecifrassuperioresa150oinferioresa control?ArchDisChid63:41822. 60 hacen pensar en interferencias y no son 2. ArmbrusterDA.1987. Fructosamine:structure, interpretables.(Leutenegger.1991.) analysisandclinicalusefulness.ClinChem33:2153
2163.

Sihubieraqueelegirentreambosmtodosese escogeralahemoglobinaglicosilada,sinembargo,la adicindeladeterminacindelafructosaminaslo ocasionaunincrementodel10al15%delcostodela hemoglobinaglicosilada(AlgraveyCockrill,1988), porloqueseraunahorronojustificadoentrminos de costo/beneficio. El binomio hemoglobina glicosiladafructosaminacomplementara,asuvez,la informacinsuministradaporelautocontroldela glucemia.Todoello,enconjunto,contribuyeyesparte indispensableenelempeodelograrunaoptimizacin delcontrolmetablicoenladiabetes.(Calle,1992). Diversosautoreshanestudiadolosnivelesde fructosaminayhemoglobinaglicosiladaenperros diabticos.Todoselloscoincidenenlaimportanciade la determinacin de ambos compuestos para el diagnsticoycontroldeltratamientoenanimalescon diabetesmellitus. Como conclusin, podemos decir que el anlisisdefructosaminayhemoglobinaglicosiladaen perros es de gran utilidad en el diagnstico y seguimientodeltratamientoenperroscondiabetes mellitusoinsulinomasibienesimportanteconocerel historialclnico,ascomoelperfilhematolgicoy bioqumicodelanimal.Laeleccindeanalizarla fructosaminaolahemoglobinaglicosiladaestaren funcindelascaractersticasyposibilidades analticas dellaboratorio,ascomodelnmerodemuestrasa analizar.

3. Ash by I P, F r ier BM . 1988. Is serum fructosamineaclinicallyusefultest?DiabeticMec 5:11821. 4. Baker IR, M et calf PA, J ohnson RN, NcwmanD,RietzP.1985. Useofproteinbasal standardsinautomatedcolorimetriedeterminations offructosamineinserum.ClinChem.31:1550 4. 5. BeachKW.1979.Atheoreticalmodeltopredict thebehaviorofglycosylatedhemoglobinlevels.J TheorBiol81:54761. 6. BodenG,MasterRW,GordonSS,Shuman CR,OwenOE.1980.Monitoringmetabolic controlindiabeticoutpatientswithglycosylated hemoglobin.AnnIntemMec92:35760. 7. Br icha r d SM , Van d en Ab bcele E, K et elsleger s J M , La mben AE. 1989. Autocontrleglycmique,hmoglobineglycosyle etfructosamine:interrelationschezlespatients diabtiques avec et sans scrtion rsiduelle dinsuline.DiabteMetab15:38893. 8. BrownEM,GrunbergerG.1991. Usefulness of albuminbased and total proteinbased ructosamine correction formulas in diabetes practice.DiabetesCare14:3534. 9. BrownleeM,VlassaraH.CeramiA.1984. Nonenzymaticglycosylationandthepathogenesis ofdiabeticcomplications.AnnIntcrnMcd101: 52737. 10. BunnHF,HaneyDN,GabbayKH,Gallop PM.1975. Furtheridentificationofthenatureand
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linkageofthecarbohydrateinhemoglobinAlc. BiochemBiophysResCommun67:1039. 11. BunnHF. 1981.Evaluation of glycosylated hemoglobinindiabeticpatients.Diabetes30:613 7. 12. CalleF.1992.Reservapancreticaycontrol metablicoenladiabetesmellitus.TesisDoctoral. Madrid:FacultaddeMedicinadelaUniversidad ComplutensedeMadrid.272p 13. Compagnucci P.CartechiniM,BolliG,De FeoP,SanteusanioF,BrunettiP.1981. The importanceofdeterminingirreversiblyglycosylated hemoglobinindiabetics.Diabetes30:60712. 14. DennisJS.1989. Glycosylatedhemoglobinsin dogs.CompendContinEducPractVet.11:717 726. 15. DominiczakMR,SmithLA,McNaught.1, Pater son KR. 1988. Assessment of past glycacmic control. Measure fructosamine. haemoglobinAl,orboth?DiabetesCare11:359 60. 16. EzcurraFerrerES,LiceaPuigM,DazDaz O.1990. Lahemoglobinaglucosiladacomondice predictor de la aparicin de complicaciones vascularesenpacientesdiabticos.ReyClinEsp 187:1214. 17. Flckiger R, Woodtli 1, Berger W. 1987. Evaluation of the fructosamine test for the measurement of plasma protein glycation. Diabetologia30:64852. 18. GabbayK,HastyK,BreslowJ,EllisonR, Bu nn H, Gallop P. 1977. Glycosylated hemoglobinandlongtermbloodglucosecontrol indiabetesmellitus.JClinEndocrinolMetab44: 85964. 19. HoweyJEA,BennettWM,BrowningMCK, JungRT,FraserCG.1989. Clinicalutilityof assaysofglycosylatedhaemoglobinandserum

fructosaminecompared:useofdataonbiological variation.DiabetieMec6:7936. 20. JensenA. 1995.Glycated blood proteins in caninediabetesmellitus.VetRec.137:16:401 404. 21. JohnsonRN,MetcalfPA.BakerJR.1983. Fructosamine:anewapproachtotheestimation ofserumglycosylprotein:anmdcxofdiabetic control.ClinChimActa127:8795. 22. KabadiUM.1988. Glycosylationofproteins. Lackofinfluenceofaging.DiabetesCare11:429 32. 23. Kanekoj.,m.Kawamoto,A.Heusner,E. Feldman,I.Koizumi.1992. Evaluationofserum fructosamineconcentrationasanindex ofblood glucosecontrolincatswithdiabetesmellitus.Am. J.VetRes.53:10:17971801. 24. KoenigR,PetersonC,ionesR,SaudekC, LehrmanM,CeramiA.1976. Correlationof glucoseregulationandhemoglobinAlcindiabetes mellitus.NEngJMcd295:41720. 25. LarsenML.HorderNl,MogensenEF.1990. Effectoflongtermmonitoringofglycosylated hemoglobinleveisininsulin dependentdiabetes mellitus.NEngJMec323:10215. 26. LeuteneggerM.1991. Lhmoglobineglyque esrelletoujoursunbonmarqueurducontrle glycmiqueaulongcours chezlespatients diabtiques?DiabteMetab17:4246. 27. LosteA.,M.Marca2001. Fructosamineand glycated hemoglobin in the assessment of glycaemiccontrolindogs.VetResParis.32:1: 5562. 28. L loyd D, M a r p es S. 1986. Serum fructosamineandthyroidfunction.ClinChem 32:1985. 29. Marca MC, LosteA, Ramos J J . 2000. Effectofacutehyperglycaemiaontheserum fructosamineandbloodglycatedhaemoglobin

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concentrations in canine samples. Vet Res Comm24:1116. 30. Mau gendre D, Dezier IP, Le Treut A, AllanicH.1990. Ledosagedelafructosamine doitilfairepartiedeslmentsdelasurveillance desdiabtiques?DiabteMetab16:558. 31. M cC a n ce DR , C ou lt er D, Sm ye M , KennedyL.1987.Effectoffluctuationsin albuminonserumfructosamineassay.Diabetic Med4:4346. 32. PecoraroRE,ChenMS,PorteDJ r.1982. Glycosylatedhemoglobinandfastingplasma glucoseintheassessmentofoutpatientglycemic controlinNIDDM.DiabetesCare:5929. 33. ReuschCE,HabererB.2001. Evaluationof fructosamine indog andcats withhypo or hyperproteinaemia,azotaemia,hyperlipidaemia andhyperbilirubinaemia.VetRec.148:370 376. 34. Schleicher ED, Mayer R, Wagner EM, GorbitzKD. 1988. Is serum fructosamine assayspecificfordeterminationofglycated serumprotein?ClinChem34:3203. 35. Shamoon H, Mazze R, Pasmant ier R, LucidoD,MurphyJ .1986. Assessmentof longtermglycemiaintype1diabetesusing multiple blood glucose values storecd in a memorycontainingreflectometer.AmJMcd 80:108692. 36. Sob el DO , Ab b a ssi V. 1991. Use of fructosaminetestindiabeticchildren.Diabetes Care14:57883.

37.SteffesMW,MauerSM.1991.Towarda basicunderstandingofdiabeticcomplications. NEngl1Med325:8834. 38.Van Dieij enVisser M P, Seynaeve C, BrombacherPS.1986. Influenceofvariations inalbuminortotalproteinconcentrationon serumfnxctosamineconcentration.ClinChem 32:1610. 39.Vishwanath V, Fr ank KB, Elmets CA, DauchortPl,MonnierVM.1986. Glycation ofskincollagenintype1diabetesmellitus: correlation with longterm complications. Diabetes35:91621. 40.WinocarPH.BhatnagerD.KalsiP,Hillier VF, Ander son DC. 1989. An analysis of glycosylatedbloodproteinsandbloodglucose profilesoveroneyearinpatientswithtype1 diabetes.DiabeticMcd6:70916. 41.WinocourPH,BhatnagarD,KalsiP,Hillier VE,AndersonDC.1989.Relativeclinical usefulnessofglycosylatedserumalbuminand fructosamine during shortterm changes in glycemiccontrolinIDDM.DiabetesCare12: 66572. 42.YueDK,McLennanS,ChurchDB,Turtle J R.1982. Themeasurementofglycosylated hemoglobininmanandanimalsbyaminophenyl boronic acid affinity chromatography. Diabetes31:701705.

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