Parte III La respuesta inmunitaria

Prof.: Mercedes Costell Rossell

Tema 12. La respuesta inmune humoral

La respuesta inmune humoral

La respuesta inmune humoral est mediada por anticuerpos secretados por clulas plasmticas. Su principal misin es la eliminacin de patgenos extracelulares. Los anticuerpos producidos protegen al huesped de tres formas: neutralizacin, opsonizacin y activacin del complemento.

Tema 12. La respuesta inmune humoral

La respuesta inmune humoral

Los anticuerpos tambin ayudan a desencadenar inflamaciones activando la desgranulacin.

Tema 12. La respuesta inmune humoral

Respuesta primaria y secundaria

Respuesta humoral primaria: consiste en la activacin de linfocitos B vrgenes.Hay una expansin clonal de linfocitos especficos y genera clulas plasmticas (clulas B efectoras) y clulas memoria. Respuesta humoral secundaria: consiste en la activacin de clulas memoria

Tema 12. La respuesta inmune humoral

Activacin de linfocitos B
La activacin de linfocitos B puede tener lugar por dos rutas distintas 1. Ciertos antgenos solos (secuencias muy repetitivas; lipopolisacaridos) que agrupan varios receptores (timo-independiente). Respuesta ms dbil y no suele generar clulas memoria. Solo producen IgM Dependiente de clulas TH 2 efectoras (timo-dependiente)

2.

activacin

expansin diferenciacin Respuesta primaria yclonal secundaria

Tema 12. La respuesta inmune humoral

Activacin de linfocitos B

La agrupacin, por unin del ligando, de los receptores de linfocitos B genera la fosforilacin completa de los ITAMs de las cadenas y generando sitios de unin para Syk y su activacin.

primaria y secundaria

Tema 12. La respuesta inmune humoral

Activacin de linfocitos B timo-dependiente

Los linfocitos B y los TH 2 deben reconocer eptopos del mismo complejo molecular para interactuar. La primera interaccin del antgeno con la clula B conduce a una activacin parcial de sta (expresin de receptores de citoquinas, molculas accesorias y endocitosis del complejo Ag-Ig) Las TH estimulan el linfocito B interaccionando con el receptor CD40, formando otras interacciones receptor-ligando de la familia de TNF y por la liberacin dirigida de citoquinas. Las clulas B activadas tambin estimulan los linfocitos T con molculas de la familia B7.

IL-4

Tema 12. La respuesta inmune humoral

Lugar de activacin de linfocitos B

Los linfocitos B vrgenes han madurado en la mdula sea y presentan en su membrana IgM y D especficas. Van recirculando por los tejidos linfoides secundarios buscando su antgeno especfico. En los tejidos linfoides secundarios se produce la interaccin inicial. En la zona de clulas T (paracorteza) son atrapadas clulas B y T especficas de un antgeno a consecuencia de su unin a ese antgeno. Tras la interaccin inicial se produce la migracin de las clulas T y B especficas del antgeno a la frontera entre la zona T y la mdula (donde hay ms proliferacin) y luego migran a los centros germinales. Una vez activados, por interaccin con clulas T, proliferan un poco en la zona mdular del rgano linfoide secundario, para acabar migrando a la zona B o folculos primarios formando un centro germinal. All sufren hipermutacin somtica, seleccionandose las ms afines por el Ag que proliferan y formarn clulas plasmticas que migran a la mdula sea.

Tema 12. La respuesta inmune humoral

Encuentro entre clulas B y T antgeno-especficas

primaria y secundaria

Tema 12. La respuesta inmune humoral

Diferenciacin de linfocitos B
En los centros germinales las clulas B sufren importantes modificaciones: 1. 2. 3. Hipermutacin somtica de regin variable Maduracin de afinidad Cambio de isotipo

Las clulas B seleccionadas se diferenciarn, bien en clulas memoria, o bien en clulas plasmticas secretoras de anticuerpos (ltima parte de la respuesta primaria).

Respuesta primaria y secundaria

Tema 12. La respuesta inmune humoral

Respuestas timo-dependientes: cambio de isotipo

Todas las clulas B vrgenes expresan IgM y IgD de superficie. Despues de activarse predominan IgG e IgA y algo menos IgE. El cambio de isotipo IgM a IgE implica una recombinacin somtica entre genes de la regin constante con prdida de DNA. De IgE ya no es posible cambiar a IgG, pero si al revs. Las reorganizaciones estn dirigidas por citoquinas producidas por las TH1 y 2 y por la interaccin de CD40 con su ligando.

Respuesta primaria y secundaria

S: sitios de recombinacin especfica de las regiones constantes

Tema 12. La respuesta inmune humoral

Cambio de isotipo
El isotipo determinar la funcin efectora de la Ig.

Para que se d un cambio de isotipo ha de existir una interaccin entre la clula B y Th2 va CD40. Pero el tipo de cambio est condicionado por las citoquinas liberadas tanto por Th2 como por Th1 en funcin del patgeno.

Tema 13. La respuesta inmune mediada por clulas

La respuesta inmune mediada por clulas

Las ramas celular y humoral del sistema inmune asumen diferentes papeles para proteger al huesped, pero no son independientes. La rama humoral neutraliza antgenos en la superficie celular y el espacio extracelular. La rama celular detecta y elimina clulas que contienen patgenos intracelulares o que han sufrido modificaciones genticas (clulas tumorales). Las clulas especficas de la rama celular son: Linfocitos TC (citolticos o CTL) CD8+. Linfocitos Th (cooperadores) CD4+ que secretan citoquinas Linfocitos NK (natural killer ) Clulas linfoides como macrfagos, neutrfilos y eosinfilos.

Las clulas no especficas de la rama celular son:

La respuesta inmune mediada por clulas est constituida por dos grupos de clulas en funcin de la poblacin efectora movilizada: Clulas efectoras con actividad citotxica: CTL, NK y macrfagos Un grupo de Th que mediatizan la hipersensibilidad retardada.

Tema 13. La respuesta inmune mediada por clulas

Mecanismos de lisis celular mediada por linfocitos T citotxicos (CTL)

Induccin de apoptosis a travs de CD95

Secrecin direccional de citolisinas (perforinas y fragmentinas)

Tema 13. La respuesta inmune mediada por clulas

Linfocitos NK(natural killers)

Lisan de manera innata clulas infectadas, clulas tumorales o transplantadas. Sus clulas diana son las que han perdido las molculas MHC de clase I, complementando la tarea de los linfocitos Tc. Ambos tipos de linfocitos respetan las clulas no infectadas: porque no las reconocen (Tc) o por inhibicin (NK).

KIR= receptor de las NK tipo inmunoglobulina. Reconoce la expresin de molculas MHC y enva seales inhibidoras.

Tema 13. La respuesta inmune mediada por clulas

Mecanismos de activacin de las NK

1. Independientes de anticuerpo: son el resultado de la activacin de receptores activadores e inhibidores. Los activadores estimulados promueven: La liberacin de citoquinas, como INF Funcin reguladora Funcin citotxica La liberacin de grnulos citotxicos (granzima y perforina)

Los receptores inhibidores emiten seales dominantes sobre las activadoras 2. Dependientes de anticuerpo (ADCC)

RI=receptor inhibidor; RA=receptor activador

Tema 13. La respuesta inmune mediada por clulas

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC)

Esta respuesta est mediatizada por clulas NK que expresan receptores de membrana para la regin Fc de anticuerpos IgG

* En la respuesta ADCC tambien intervienen otras clulas, como macrfagos, monocitos, neutrfilos y eosinfilos.

Tema 13. La respuesta inmune mediada por clulas

Hipersensibilidad retardada (DTH)

Es una respuesta mediada por linfocitos Th1 activados frente a determinados antgenos. Los linfocitos secretan citoquinas que atraen y activan macrfagos y linfocitos CTL, induciendo una reaccin inflamatoria localizada. Requiere una fase previa de sensibilizacin. Ej.: dermatitis de contacto y rechazo de injertos.

Tema 14. Citoquinas

Citoquinas: mensajeros del sistema inmune

Los linfocitos T constituyen el eje central de la respuesta inmune especfica y los macrfagos y mastocitos el de la innata. Para coordinar a los restantes tipos celulares es necesaria la comunicacin de las clulas mediante diferentes citoquinas (

Tema 14. Citoquinas

Propiedades generales de las citoquinas

Las clulas activadas producen citoquinas que se unirn a receptores especficos en las clulas diana. En la clula diana se genera una seal intracelular en la que intervienen un gran nmero de protenas, entre ellas quinasas de la familia JAK que reclutan y activan factores de transcripcin de la familia STAT que implicarn cambios de la expresin gnica. La mayora de citoquinas presentan una accin autocrina y/o paracrina. Algunas pocas tienen accin endocrina (efecto sobre clulas distantes). Regulan la intensidad y duracin de la respuesta inmune, estimulando la activacin, proliferacin y diferenciacin de las clulas, as como la secrecin de anticuerpos y otras citoquinas.

Tema 14. Citoquinas

Propiedades generales de las citoquinas

Pueden ser pleiotrpicas, redundantes, sinrgicas o antagnicas. Inducen cascadas de expresin.

Tema 14. Citoquinas

Estructura y funcin de las principales citoquinas

Generalmente tienen masas moleculares inferiores a 30 kDa. Por su estructura se pueden clasificar en 4 familias: Hemopoietinas: interleuquinas Interfern Quimioquinas TNF (tumor necrosis factor)

La interaccin de antgenos con macrfagos, y subsiguiente activacin de una clula TH, conduce a la liberacin de numerosas citoquinas, generando una compleja red de clulas interactivas.

Tema 14. Citoquinas

Receptores de las citoquinas

Para ejercer su funcin las citoquinas necesitan unirse a receptores de membrana en las clulas diana. Los receptores son glicoprotenas, generalmente compuestos por varias subunidades que pueden ser compartidas por ms de un receptor. Su funcin es transmitir seales de activacin al interior celular. Segn su estructura se han agrupado en 6 familias: 1. Receptores de hemopoyetinas: Unen interleuquinas. Se caracterizan por compartir cadenas y una extructura extracelular tipo fibronectina. Las distintas combinaciones generan distintas especificidades. 2. Receptor de interfern: Posee una regin extracelular con residuos de cistena caractersticos. Se asocia a protein quinasas, como JAK. 3. Receptor de TGF (factor de crecimiento transformante): Tiene un dominio serina/treonina quinasa en la regin citoplsmica.

Tema 14. Citoquinas

Receptores de las citoquinas

4. Receptor de TNF: Con dominios repetidos ricos en cistena en la regin extracelular. 5. Receptores de la superfamilia de las inmunoglobulinas: Sus dominios extracelulares tienen la extructura de las Ig. 6. Receptores de quimioquinas: Atraviesa 7 veces la membrana plasmtica. Estn acoplados a protenas G.

Antagonistas de las citoquinas

Se encuentran en la sangre y lquido extracelular y se generan por rupturas por proteasas de los dominios extracelulares de los receptores de citoquinas. Tienen dos formas de actuacin: 1. 2. Uniendose al receptor, que no podr ser activado. Uniendose a la citoquina, impidiendo su actividad

Tema 14. Citoquinas

Quimioquinas
Son citoquinas de pequeo tamao con propiedades quimiotcticas. En la inmunidad innata son liberadas por distintas clulas en los sitios de infeccin y guan neutrfilos y monocitos al lugar. En la inmunidad adquirida estn implicadas en el desarrollo y migracin de linfocitos.

Efecto quimioatrayente de la IL-8 (CXCL8). La quimioquina se sintetiza en los alrededores de la infeccin y actua atrayendo, mediante gradiente quimiotctico, leucocitos con receptores para esa quimioquina.

Tema 14. Citoquinas

Funcin de las principales citoquinas

Tema 15. El sistema del complemento

El sistema del complemento

Es el principal efector de la rama humoral inespecfica de la respuesta inmune. Tiene un carcter multifuncional: interacciona con las dems ramas de la respuesta inmunitaria (especficas o inespecficas y humorales o celulares). Constituido por un complejo grupo de protenas, presentes en el suero normal en forma inactiva.

Cuando se activa el primer componente del sistema (C1) interaccionar con otros componentes generando una cascada de activacin altamente regulada que llevar a cabo funciones bsicas.

Tema 15. El sistema del complemento

Multiples actividades del sistema del complemento

Las protenas del suero que constituyen el complemento y sus receptores participan en una serie de actividades inmunes: Lisis de clulas extraas por rutas dependientes o no de anticuerpos Opsonizacin de antgenos por fagocitos Activacin de respuestas inflamatorias Eliminacin de complejos inmunes circulantes por las clulas del hgado y del bazo

Tema 15. El sistema del complemento

Componentes del sistema del complemento

Las protenas inactivas se designan por nmeros: C1- C9 Se activan por protelisis y los fragmentos resultantes se designan con letras minsculas: ej. C2a Los fragmentos interaccionan entre si, formando complejos funcionales. Cuando poseen actividad enzimtica se designan con una barra: ej. C4b2a

C1 es la primera protena de la va clsica de activacin del complemento. Tiene tres

componentes:C1q constituido por 6 subunidades idnticas, con cabezas globulares y colas tipo colgeno. Cada cola se combina con una C1r y una C1s. Las cabezas se pueden unir a la parte Fc de inmunoglobulinas o directamente a patgenos. Esto producir un cambio conformacional en C1r que rompe y activa C1s.

bacteria

Y
Ig-Ag

Tema 15. El sistema del complemento

Activacin del complemento

Los primeros pasos de activacin del complemento conducen a la liberacin de C5b y pueden tener lugar por 3 vas: La va clsica La va alternativa La va de las lectinas
b b

Tema 15. El sistema del complemento

Va clsica de activacin del complemento

Se inicia con la formacin de complejos antgeno-anticuerpo. A ellos se une C1 inactivo, activndose C1s como proteasa. C1s tiene dos sustratos: C4 y C2 El complejo C4b2b se llama convertasa de C3 (hidroliza C3). C3a difunde y genera respuestas inflamatorias. El complejo C4b2b3b tiene actividad C5 convertasa. Se genera C5b que se une a C6 y se inicia la formacin del complejo de ataque a la membrana.

Tema 15. El sistema del complemento

Va alternativa de activacin del complemento

Es independiente de la formacin de complejos antgeno-anticuerpo. Se inicia por antgenos de superficie extraos (pared bacteriana).

La vida media de C3bBb (otra convertasa de C3) es muy corta. Se alarga por la unin de properdin.

Tema 15. El sistema del complemento

Va de las lectinas de activacin del complemento

Las lectinas son protenas que reconocen y se unen a carbohidratos especficos. El complemento se puede activar por lectinas que reconocen residuos de manosa (denominadas MBL) de glicoprotenas de la pared de microorganismos. Esta va tampoco depende de anticuerpos pero se parece ms a la clsica. MBL forma un complejo con las proteasas MASP-1 y MASP-2 muy semejante a C1. Cuando MBL se une a la superficie bacteriana las proteasas se activan y pueden romper y activar C4 y C2.

Tema 15. El sistema del complemento

Complejo de ataque a la membrana

En la fase final de activacin del complemento C5b inicia el ensamblaje secuencial de C6, C7, C8 y C9. Numerosas molculas de C9 polimerizan formando un poro en la bicapa lipdica de la membrana celular. Por este poro difundiran iones y pequeas molculas causando la muerte de la clula.

Tema 15. El sistema del complemento

Controla que solo se ataquen clulas invasoras pero no las del huesped.

Regulacin del sistema del complemento

Muchos componentes son muy labiles a no ser que se estabilicen por interaccin con otras molculas a) Antes del ensamblaje de la actividad C3 convertasa

Tema 15. El sistema del complemento

Regulacin del sistema del complemento

b) Despues del ensamblaje de la convertasa

c) Regulacin del ensamblaje del complejo de ataque de la membrana

Tema 15. El sistema del complemento

Activacin de la fagocitosis por componentes del complemento

La anafilatoxina C5a estimula la fagocitosis de bacterias. La activacin del complemento lleva a la deposicin de C3b en la superficie de la bacteria. C3b se une a su receptor CR1 en la superficie de los fagocitos.Los fagocitos tambien expresan receptores de C5a. La unin de C5a a su receptor estimular la clula para que fagocite la bacteria unida por CR1.

C3b CR1

Tema 15. El sistema del complemento

Respuesta inflamatoria inducida por componentes del complemento

La inflamacin consiste en una serie de acontecimientos coordinados: 1. 2. 3. 4. Incremento del dimetro vascular Incremento de la permeabilidad vascular Induccin en el endotelio de la expresin de molculas de adhesin Induccin en el endotelio de la expresin de molculas que provocan la coagulacin local de la sangre Quimiotaxis Las anafilatoxinas C5a, C3a y C4a causan respuestas inflamatorias locales actuando directamente en los vasos sanguneos, aumentando la permeabilidad vascular. El flujo sanguneo incrementa, as como la unin de fagocitos a las clulas endoteliales. C5a tambin activa a los mastocitos que liberan histamina y TNF que contribuyen a la respuesta inflamatoria. La acumulacin de fluido aumenta el drenaje linftico.

5.

Tema 15. El sistema del complemento

Respuesta de fase aguda

Est provocada por la accin de TNF-, IL-1 e IL-6 que liberan los macrfagos en respuesta a la infeccin. Su objetivo es coordinar una respuesta global. Estas molculas producirn diversos efectos: 1. 2. 3. Incremento en el catabolismo de grasas y protenas , induciendo un aumento de fiebre Descenso del apetito Estimulan la sntesis y secrecin de las protenas de fase aguda por los hepatocitos (Protena C Reactiva, MBL, transferrina, etc). Activan el complemento e inducen un estado que dificulta el crecimiento del patgeno.

Tema 16. Regulacin de la respuesta inmune

Regulacin por el antgeno

Intervienen distintos factores: 1. Naturaleza del antgeno 2. Dosis 3. Va de administracin 4. Competencia entre antgenos

Retroregulacin por anticuerpos

Es una supresin mediada por las IgG: Pecado original antignico

En la respuesta humoral secundaria est inhibida la activacin de nuevos linfocitos B vrgenes. Durante la respuesta primaria, los linfocitos B vrgenes se activan cuando reconocen el antgeno (receptor BCR). En la respuesta secundaria, el receptor FcRII reconocer la parte constante de las IgG del medio, formandose un entrecruzamientos que inhibe la diferenciacin de los linfocitos B vrgenes. Sobre las clulas B memoria tiene el efecto opuesto.

Tema 16. Regulacin de la respuesta inmune

Redes idiotpicas
Las inmunoglobulinas son auto- antgenos para los idiotipos. Estos residen en la parte variable de Fab que no generan tolerancia en las primeras etapas de la vida debido a su baja concentracin. Ag Anticuerpo1 Anticuerpo anti-idiotipo Anticuerpo anti-anti-idiotipo

Tolerancia inmunolgica
Es la ausencia especfica de respuesta inmune frente a un antgeno. Es un estado activo, dotado de especificidad y memoria. Producida por antgenos denominados tolergenos. La tolerancia natural permite que un animal no responda frente a sus propias molculas. Si falla se produce la autoinmunidad. Se puede inducir la tolerancia experimentalmente. Burnet (1954) postul que la tolerancia natural no es algo innato sino que debe ser aprendido durante el desarrollo embrionario. La tolerancia se induce mejor en linfocitos inmaduros y depende de que stos no reciban una seal co-estimulatoria. El mantenimiento de la tolerancia depende de la persistencia del antgeno

Tema 16. Regulacin de la respuesta inmune

Resumen de las etapas de la respuesta inmune

Frente a un patgeno nuevo: 1 Respuesta innata (1-4h): Va alternativa del complemento Macrfagos y mastocitos 2 Respuesta inducida (4h-4d): Respuesta de fase aguda Inflamacin Secrecin de interfern Linfocitos NK 3 Respuesta adquirida (5d-): Linfocitos B y T especficos Generacin de memoria Patgenos intracelulares: Tc y Th1 Patgenos extracelulares: Th2, B