TEKNIK PEMBUATAN ANTIGEN Brucella abortus

DAN KIT ELISA RABIES

LAPORAN PRAKTIK KERJA LAPANGAN

DI LABORATORIUM ANTISERA DIAGNOSTIKA DAN BAHAN BIOLOGIS LAINNYA

PUSAT VETERINARIA FARMA SURABAYA

OLEH
NADA PUTRI DJIHAD
NIM 408342413179

UNIVERSITAS NEGERI MALANG

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

JURUSAN BIOLOGI
OKTOBER 2011
TEKNIK PEMBUATAN ANTIGEN Brucella abortus
DAN KIT ELISA RABIES

LAPORAN PRAKTIK KERJA LAPANGAN

DI LABORATORIUM ANTISERA DIAGNOSTIKA DAN BAHAN BIOLOGIS LAINNYA

PUSAT VETERINARIA FARMA SURABAYA

Untuk memenuhi tugas matakuliah

Praktik Kerja Lapangan (BIM 447)
Program Studi Biologi

Oleh
Nada Putri Djihad
NIM 408342413179

UNIVERSITAS NEGERI MALANG

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

ii

JURUSAN BIOLOGI
Oktober 2011
Laporan Praktik Kerja Lapangan oleh Nada Putri Djihad
ini telah diperiksa dan disetujui

Surabaya, Desember 2011

Pembimbing Lapangan,

drh. Nur Sjolichah

NIP 19641026199303 2 001

Malang, Desember 2011

Pembimbing Kampus,

Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc

NIP 19660921199103 2 001

Mengetahui,
Ketua Jurusan Biologi

Mengesahkan,
Dekan FMIPA
Universitas Negeri Malang

iii

Dr. Abdul Ghofur, M. Si

NIP 19540707198503 1 005

Dr. H. Istamar Syamsuri, M.Pd

NIP 19490823 197903 1 001
RINGKASAN

Penyakit hewan menular didefinisikan sebagai penyakit hewan yang

membahayakan karena secara cepat dapat menjalar dari hewan pada hewan atau
pada manusia dan disebabkan oleh virus, bakteri, cacing, protozoa dan parasit,
salah satunya rabies. Pusvetma merupakan Unit Pelaksana Teknis (UPT) di
lingkungan Direktorat Jenderal Peternakan yang ditugaskan memproduksi vaksin
dan bahan biologis lain bagi pemerintah dalam usaha pengendalian penyakit
hewan menular di Indonesia, antara lain vaksin, antigen, dan Kit ELISA.
Pencegahan lebih dini yang dilakukan agar penyakit tidak menular adalah dengan
melakukan diagnosis awal terhadap hewan ternak menggunakan antigen dan
ELISA.
Antigen adalah substansi yang bila dimasukkan ke dalam tubuh suatu
organisme dapat memunculkan respon imun. Antigen dapat berupa protein,
polisakarida, endotoxin, dan lipid. Antigen dapat digunakan untuk uji diagnosis
awal dalam uji aglutinasi cepat. Antigen yang diproduksi Pusvetma salah satunya
adalah antigen Brucella abortus. Bahan biologis lainnya yang diproduksi untuk
diagnosis adalah Kit ELISA. Metode Enzyme-linked Immunosorbent Assay
(ELISA) merupakan metode diagnosis yang sering digunakan pada saat ini, salah
satu Kit ELISA yang diproduksi adalah Kit ELISA Rabies.
Tujuan kegiatan PKL antara lain mempelajari dan mengaplikasikan teori
yang telah didapat dalam perkuliahan khususnya bioteknologi, mengetahui teknik
pembuatan antigen Brucella abortus, serta mengetahui teknik pembuatan Kit
ELISA Rabies di Laboratorium Antisera Diagnostika dan Bahan Biologis
Lainnya. PKL yang telah dilakukan di Pusvetma sejak tanggal 20 Juni 5
Agustus 2011 ini tidak terbatas pada produksi antigen Brucella abortus dan KIT
ELISA Rabies, tetapi juga mempelajari pembuatan vaksin, kultur sel, pengenalan
produk vaksin, pengujian vaksin, kuliah, dan praktik uji hemaglutinasi (HA).
Hasil yang diperoleh dari PKL, yaitu wawasan dan pengetahuan baru mengenai
teknik pembuatan antigen Brucella abortus dan Kit ELISA Rabies.

iv

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah

memberikan rahmat dan hidayah serta karunia-Nya, sehingga penulis dapat
menyelesaikan laporan kegiatan Praktik Kerja Lapangan (PKL) berjudul
TEKNIK PEMBUATAN ANTIGEN Brucella abortus DAN KIT ELISA
RABIES yang dilakukan di Laboratorium Antisera Diagnostika dan Bahan
Biologis Lainnya, Pusat Veterinaria Farma (Pusvetma) Surabaya.
Laporan ini disusun untuk memenuhi Sistem Kredit Semester (SKS)
matakuliah PKL dalam bidang ilmu Biologi. Terlaksananya PKL dan tersusunnya
laporan ini tidak lepas dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis
mengucapkan terima kasih kepada:
1. drh. Endhang Pujiastuti selaku Kepala Pusat Veterinaria Farma
(Pusvetma) Surabaya yang telah memberikan izin PKL
2. drh. Nur Sjolichah selaku Pembimbing Lapangan yang telah mendampingi
dan memberikan bimbingan yang intensif serta motivasi selama kegiatan
PKL, selaku Kepala Bidang Laboratorium Antisera Diagnostika dan
Bahan Biologis Lainnya yang telah memberikan izin pada penulis untuk
melaksanakan PKL di laboratorium tersebut
3. drh. Asri Wahjuni selaku Pembimbing Lapangan yang mendampingi dan
memberikan bimbingan yang intensif serta motivasi selama kegiatan PKL
berlangsung
4. Dra. Dwi Listyorini M.Si, D.Sc selaku Dosen Pembimbing Kampus yang
telah banyak memberikan bimbingan, saran, dan masukan kepada penulis
selama pelaksanaan PKL ini
5. seluruh staf dan karyawan Pusvetma yang turut membantu kelancaran
kegiatan PKL

6. rekan

mahasiswa

PKL:

Anggraeni

Widyaningsih,

Lulut

Dwi

Nurmamulyosari, Nia Ariani, dan Juliyatin Putri Utami atas kerjasama

yang kompak selama kegiatan PKL berlangsung
7. seluruh pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu yang telah
mendukung penulis, baik secara materi maupun non materi.
Penulis menyadari bahwa laporan PKL ini masih jauh dari kata sempurna,
baik dari segi isi, pengetikan, dan segi lainnya. Semoga tulisan ini dapat
bermanfaat bagi seluruh pihak yang terkait.

Malang, Oktober 2011

Penulis

vi

DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL................................................................................... ii
LEMBAR PENGESAHAN......... iii
RINGKASAN......... iv
KATA PENGANTAR.... v-vi
DAFTAR ISI................... vii
DAFTAR TABEL........... viii
DAFTAR GAMBAR...... ix
BAB I

PENDAHULUAN
A. Latar Belakang................. 1-4
B. Alasan Pemilihan Objek PKL. 5
C. Tujuan PKL......................................... 5

BAB II

PELAKSAAN PRAKTIK KERJA LAPANGAN

A. Profil Tempat Pelaksanaan PKL 6-14
B. Waktu Pelaksanaan..... 14
C. Deskripsi & Sekuensi Aktivitas selama Pelaksanaan PKL 14-16

BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil.................... 17
B. Pembahasan.................... 17-29
BAB IV PENUTUP
A. Kesimpulan............. 30
B. Saran..... 30-31
DAFTAR RUJUKAN...................
LAMPIRAN

vii

DAFTAR TABEL
Tabel

Halaman

2.1

Daftar Produk Pusvetma .

2.2

Deskripsi dan Sekuensi Aktivitas 14-16

viii

DAFTAR GAMBAR
Gambar

Halaman

2.1

Struktur Organisasi Pusvetma

11

2.2

Struktur Organisasi Sub bidang Antisera Diagnostika dan Bahan

Biologis Lainnya ...

13

3.1

Reaksi Antigen-Antibodi ..

23

3.2

Proses Penanaman Bakteri

25

3.3

Produk Antigen Brucella abortus .

26

ix

DAFTAR RUJUKAN
Alton et. al. 1988. Techniques for the Brucellosis Laboratory. Paris: INRA
Chadwick, B. J., Desport, M., Brownlie, J., Wilcox, G. E., Dharma, D. M. N.
1998. Detection of Jembrana Disease Virus in Spleen, Lymph Nodes,
Bone Marrow and Other Tissues by In situ Hybridization of
Parafn-embedded Sections, Journal of General Virology (1998), 79:101106
Crowther, John R. 2009. The ELISA Guide Book Second Edition. Austria:
Humana Press
Herbert, W. J. 1997. Veterenary Immunology. Oxford: Blackwell Scientific Pub
Imbang, Rahayu. (tanpa tahun). Reaksi Antigen-Antibodi (Online),
(imbang@umm.ac.id, http://imbang.staff.umm.ac.id/?p=345, diakses
tanggal 17 Agustus 2011)
Natalia, Lily dan Priadi, Adin. (tanpa tahun). Penyakit Septicaemia Epizootica:
Penelitian Penyakit dan Usaha Pengendaliannya pada Sapi dan Kerbau di
Indonesia. Bogor: Balai Penelitian Veteriner
National Academy of Science. 1971. Methods for Examining Poultry Biologics
and for Identifying and Quantifying Avian Pathogens. Washington D.C.:
National Research Council
Office International des Epizooties. 2008. Manual of Standards For Diagnostic
Test and Vaccines General Information & Multiple Species. OIE
Tim Pusvetma. 2011. Pusat Veterinaria Farma Surabaya, (Online),
(http://www.ditjennak.go.id/b-pusvetma.asp, diakses tanggal 17 Agustus
2011).

Lampiran 1. Dokumentasi Kegiatan PKL

xi

Lampiran 2. Surat Tugas Dosen Pembimbing Kampus

xii

Lampiran 3. Surat Permohonan Ijin PKL Kepada Dekan

xiii

Lampiran 4. Surat Permohonan Ijin PKL Dari Dekan Ke Instansi

xiv

Lampiran 5. Surat Persetujuan Instansi

xv

Lampiran 6. Surat Penugasan PKL

xvi

Lampiran 7. Jadwal Kegiatan PKL

JADWAL KEGIATAN PKL
Nama instansi

: Pusat Veterinaria Farma (Pusvetma)

Alamat

: Jl. Jend. A. Yani No. 68-70 Surabaya

Nama mahasiswa

: Nada Putri Djihad

NIM

: 408342413179

NO.
1.

2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.

WAKTU
Senin,
20 Juni 2011
Selasa,
21 Juni 2011
Rabu,
22 Juni 2011
Kamis,
23 Juni 2011
Jumat,
24 Juni 2011
Senin,
27 Juni 2011
Selasa,
28 Juni 2011
Rabu,
29 Juni 2011
Kamis,
30 Juni 2011
Jumat,
1 Juli 2011

POKOK KEGIATAN
Penjelasan tahap-tahap pembuatan
vaksin
Mengikuti kegiatan kultur sel chicken
kidney

KETERANGAN

Kunjungan ke Laboratorium Mamalia

Kunjungan ke Laboratorium Antigen
Penjelasan tahapan ELISA Jembrana
Kerja bakti Jumat
Kunjungan ke Laboratorium PMP
Kunjungan ke Laboratorium unggas

Praktik uji HA

Studi literatur
Hari libur nasional
Pengecatan gram bakteri
Persiapan inokulasi kuman

Pembuatan
medium & tutup
botol kultur

xvii

11.

Senin,
4 Juli 2011

Persiapan inokulasi kuman

12

Selasa,
5 Juli 2011

Pembuatan tutup botol kultur

Sterilisasi botol kemasan antigen
Inokulasi kuman

13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29
29.
30.
31.
32.

Rabu,
6 Juli 2011
Kamis,
7 Juli 2011
Jumat,
8 Juli 2011
Senin,
11 Juli 2011
Selasa,
12 Juli 2011
Rabu,
13 Juli 2011
Kamis,
14 Juli 2011
Jumat,
15 Juli 2011
Senin,
18 Juli 2011
Selasa,
19 Juli 2011
Rabu,
20 Juli 2011
Kamis,
21 Juli 2011
Jumat,
22 Juli 2011
Senin,
25 Juli 2011
Selasa,
26 Juli 2011
Rabu,
27 Juli 2011
Kamis,
28 Juli 2011
Jumat,
29 Juli 2011
Senin,
3 Agustus 2011
Selasa,
4 Agustus 2011
Rabu,
5 Agustus 2011

Pembuatan
medium & tutup
botol kultur

Sterilisasi botol kemasan antigen

Inokulasi kuman
Inokulasi kuman
Panen kuman
Bottling antigen
Bottling larutan kit ELISA
Packing kit ELISA Rabies
Pencucian botol kemasan kit ELISA
Mengambil stok bahan untuk produksi
Coating antigen pada mikroplat
ELISA
Blocking mikroplat dan pembuatan
larutan untuk kit ELISA
Coating mikroplat kit ELISA Rabies
Sentrifugasi antigen
Coating antigen Rabies kit ELISA
Sentrifugasi
Studi literatur
Studi literatur
Studi literatur
Sentrifugasi antigen
Sterilisasi alat dan inkubasi kuman
Sentrifugasi dan sterilisasi alat
Sentrifugasi antigen
Sentrifugasi antigen dan sterilisasi alat

xviii

Surabaya, 5 Agustus 2011

Mengetahui,
Pembimbing Lapangan,

Praktikan,

drh. Nur Sjolichah

NIP 19641026199303 2 001

Nada Putri Djihad

NIM 408342413179

Lampiran 8. Agenda Harian Kegiatan PKL

xix

Lampiran 9. Agenda Mingguan Kegiatan PKL

AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL

Minggu ke

:I

Tanggal

: 20-24 Juni 2011

Lama Pelaksanaan

: 5 hari

URAIAN KEGIATAN :

Pada minggu pertama ini, kegiatan yang dilakukan adalah pengenalan

dengan seluruh laboratorium yang ada di Pusvetma. Seluruh laboratorium
yang terdapat di Pusvetma, yakni Laboratorium PMPP, laboratorium produksi
yang terdiri atas Laboratorium Mamalia, Laboratorium Unggas, Laboratorium
Antisera Diagnostika dan Bahan Biologis Lainnya yang bertugas untuk
produksi antigen, serta Laboratorium Pengujian Mutu Produksi.
Hari pertama kegiatan PKL diisi dengan penjelasan mengenai proses
pembuatan vaksin di Pusvetma yang dilakukan di Laboratorium PMPP, serta
pengamatan terhadap berbagai kultur sel di laboratorium Kultur Jaringan
Hewan yang terdapat di sana. Esok harinya, kunjungan dilanjutkan ke
Laboratorium Mamalia dengan dijelaskan mengenai proses produksi vaksin
mamalia yang berlangsung di laboratorium tersebut sembari pengenalan
berbagai alat produksi vaksin mamalia. Sayangnya, ketika itu di laboratorium
tersebut sedang tidak berlangsung kegiatan produksi sehingga tidak dapat
melihat langsung proses produksinya. Di Laboratorium Antigen, saya
mengikuti proses pembuatan medium dan dijelaskan mengenai antigen beserta
proses produksinya, sedangkan hari terakhir di Laboratorium PMP dijelaskan
mengenai alur pengujian mutu setiap hasil produksi di Pusvetma.
xx

Surabaya, 24 Juni 2011

Mengetahui,
Pembimbing Kampus

Pembimbing Lapangan,

Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc

drh. Nur Sjolichah
NIP 19660921199103 2 001
NIP 19641026199303 2 001
AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL

Minggu ke

: II

Tanggal

: 27 Juni - 1 Juli 2011

Lama Pelaksanaan

: 5 hari

URAIAN KEGIATAN :

Hari pertama pengenalan dilanjutkan ke Laboratorium Unggas. Di

Laboratorium Unggas dikenalkan dengan Uji Hemaglutinasi (HA) dan diminta
untuk melakukan praktik langsung Uji HA. Hal ini merupakan hal yang baru
yang belum pernah dilakukan sebelumnya. Uji ini berfungsi untuk mendiagnosa
keberadaan antigen pada tubuh hewan.
Selanjutnya, saya menetap di Laboratoium Antigen. Untuk kegiatan awal,
dijelaskan mengenai proses pembuatan medium serta persiapan untuk
melakukan inokulasi dan pengembiakkan kuman keesokan harinya. Selain itu,
pada tahap sebelum inokulasi kuman, dilakukan pengecatan gram bakteri untuk
memastikan kemurnian bahan kuman yang akan diinokulasi, saya
berkesempatan untuk praktik langsung melakukan pengecatan gram bakteri
Brucella abortus.
Akhir minggu, pemanena kuman dilakukan dan saya pun berkesempatan
ikut membantu dalam proses tersebut.

Surabaya, 1 Juli 2011

xxi

Mengetahui,
Pembimbing Kampus

Pembimbing Lapangan,

Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc

NIP 19660921199103 2 001

drh. Nur Sjolichah

NIP 19641026199303 2 001

AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL

Minggu ke

: III

Tanggal

: 4-8 Juli 2011

Lama Pelaksanaan

: 5 hari

URAIAN KEGIATAN :

Di awal minggu, kegiatan produksi dimulai kembali dengan tahap

persiapan. Persiapan dilakukan dengan pembuatan tutup botol kultur,
pembuatan saringan kuman, serta penyiapan bahan medium, yakni kentang.
Selanjutnya, dilakukan pembuatan medium terlebih dahulu dan selagi panas
dituangkan pada botol-botol kultur yang kemudian disimpan di ruang inkubasi.
Keesokan harinya, proses inokulasi bakteri Brucella abortus strain 19 ke
media PA dengan menggunakan spet. Benar-benar kegiatan yang sangat
membutuhkan kecermatan serta kehatia-hatian dank arena kegiatan ini
dilakukan dalam skala produksi maka kegiatan ini harus dilakukan seefisien
mungkin.

xxii

Surabaya, 8 Juli 2011

Mengetahui,
Pembimbing Kampus

Pembimbing Lapangan,

Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc

NIP 19660921199103 2 001

drh. Nur Sjolichah

NIP 19641026199303 2 001

AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL

Minggu ke

: IV

Tanggal

: 11-15 Juli 2011

Lama Pelaksanaan

: 5 hari

URAIAN KEGIATAN :

Awal minggu kegiatan dilanjutkan dengan pemanenan bakteri dan bakteri

hasil pemanenan diinkubasi, yang nantinya disimpan di dalam lemari pendingin
dengan suhu minus. Keesokan harinya barulah dilakukan pengemasan dan
ditempeli dengan etiket.
Selain produksi antigen, minggu ini kegiatan lain yang dilakukan adalah
produksi kit ELISA Rabies, meliputi pencucian botol kemasan, bottling bahan
kit ELISA, dan packing.

xxiii

Surabaya, 15 Juli 2011

Mengetahui,
Pembimbing Kampus

Pembimbing Lapangan,

Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc

NIP 19660921199103 2 001

drh. Nur Sjolichah

NIP 19641026199303 2 001

AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL

Minggu ke

:V

Tanggal

: 18-22 Juli 2011

Lama Pelaksanaan

: 5 hari

URAIAN KEGIATAN :

Minggu ini kegiatan diawali dengan pegambilan stok bahan di gudang

penyimpanan bahan yang letaknya tidak jauh dari Laboratorium Antigen.
Pengambilan stok ini dilakukan dalam jumlah besar sehingga diperlukan troli
pengangkut untuk membawa ke dalam laboratorium. Bahan-bahan bersama troli
pun diangkut menggunakan lift barang.
Kegiatan produksi kit ELISA dilanjutkan dengan produksi untuk tending
berikutnya, yakni coating, blocking, washing, pembuatan PBS, dan stopper.
Selain itu, kegiatan produksi antigen dilanjutkan ke tahap sentrifugasi.

xxiv

Surabaya, 22 Juli 2011

Mengetahui,
Pembimbing Kampus

Pembimbing Lapangan,

Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc

NIP 19660921199103 2 001

drh. Nur Sjolichah

NIP 19641026199303 2 001

AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL

Minggu ke

: VI

Tanggal

: 25-29 Juli 2011

Lama Pelaksanaan

: 5 hari

URAIAN KEGIATAN :

Pada awal minggu karena ada kegiatan pegawai di Pusvetma, maka tidak
dilakukan produksi sehingga kami mengisi kegiatan dengan studi literatur di
perpustakaan Pusvetma. Kegiatan produksi kembali berlangsung pada akhir
minggu dengan melanjutkan tahap sentrifugasi antigen, serta persiapan untuk
produksi kembali.

xxv

Surabaya, 29 Juli 2011

Mengetahui,
Pembimbing Kampus

Pembimbing Lapangan,

Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc

NIP 19660921199103 2 001

drh. Nur Sjolichah

NIP 19641026199303 2 001

AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL

Minggu ke

: VII

Tanggal

: 1-5 Agustus 2011

Lama Pelaksanaan

: 5 hari

URAIAN KEGIATAN :

Minggu ini adalah minggu terakhir kegiatan PKL, kegiatan yang dilakukan
adalah melanjutkan sentrifugasi antigen, serta sterilisasi untuk persiapan
produksi selanjutnya.

xxvi

Surabaya, 5 Agustus 2011

Mengetahui,
Pembimbing Kampus

Pembimbing Lapangan,

Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc

NIP 19660921199103 2 001

drh. Nur Sjolichah

NIP 19641026199303 2 001

Lampiran 10. Daftar Hadir Kegiatan PKL

xxvii

Lampiran 11. Surat Keterangan Pernyataan Telah Melakukan PKL

xxviii

Lampiran 12. Lembar Evaluasi Kegiatan PKL

xxix

Lampiran 13. Rekaman Pelaksanaan PKL

xxx

Lampiran 14. Surat Ucapan Terima Kasih

xxxi

Lampiran 15. Surat Ucapan Terima Kasih Dari Fakultas

xxxii

Lampiran 16. Surat Tugas Monitoring Dosen Pembimbing Kampus

xxxiii

Lampiran 17. Nilai Akhir PKL Mahasiswa

xxxiv

xxxv