Professional Documents
Culture Documents
Analisis secara
enzymatis
Oleh : Hendri Wasito, S. Farm., Apt.
Tinjauan umum
Pemanfaatan reaksi enzimatis dapat digunakan untuk anaisis obat pada sampel biologis dengan mengamati jumlah produk yang dihasilkan atau jumlah koenzim yang digunakan. Dengan reaksi enzymatis tidak dibutuhkan tekik yang rumit dan proses pre-treatment yang panjang. Contoh : analisis antibiotik aminoglikosida (gentamisisn da kanamisin) dengan enzym asetil/adenil transferase yang dilabel.
Enzim tidak ikut bereaksi, struktur enzim tidak berubah baik sebelum dan sesudah reaksi tetap
S+E
(ES)
Catalysis
(EP)
SPEKTRO
Adanya obat bebas akan menyebabkan terjadinya kompetisi antara obat yang sudah terikat dengan obat bebas untuk berikatan dengan antibodi. Obat bebas akan berikatan dengan antibodi akan menyebabkan enzim terlepas dari komples sehingga sisi aktif enzim bebas dan substrat tidak dapat masuk.
Kemudian akan terjadi reaksi enzimatis dan akan menghasilkan suatu produk.
Contoh EMIT
Substar : Glukosa-6-Phosphat Enzim : Dehidrogenase G6P Koenzim : NAD (Nicotinamid Adenin Diphosphat) Reaksi :
substrat + enzim keilangan atom H NAD + H NADH
Kelebihan
Radioisotop yang biasa digunakan : H-3, C13, S-35, P-32, I-125, Co-60. (sebaiknya dipilih yang t1/2 panjang dan partikel yang dihasilkan lebih aman)
FLUORESENSI