Laboratorio de Microbiologa Informe N 3

Tincin Diferencial cido-resistente: Tincin de Endosporas

Mesa N Integrantes:
!!"! #$ %&'(e) *are+a, I(onne !###!# Ec&a) Magallanes, Mara del *ilar !!$# -$ M'rmol .'l(e), Da(id /os01 !!$!!$$ 2os %airo, .abriel /es3s

!#4-I

#5 Introd0ccin5 La tincin especfica de ciertas estr0ct0ras microbiolgicas se reali)a con m1todos de tincin especiales5 6e emplean di(ersas t1cnicas de tincin para diferenciar c'ps0las, flagelos o endosporas debido a 70e estas estr0ct0ras p0eden ser sensibles a t1cnicas de tincin simple o tincin de .ram, a 70e son estr0ct0ras m0c&o m's pe70e8as 70e el tama8o cel0lar o a 70e los colorantes 0tili)ados en t1cnicas m's com0nes no logran atra(esar las paredes cel0lares de estas estr0ct0ras5 Las endosporas se forman c0ando e9isten condiciones ad(ersas en el medio, como la escase) de n0trientes: son estr0ct0ras des&idratadas de gran resistencia ante factores ambientales e9tremos ; son caractersticas de 0n pe70e8o gr0po de bacterias gram positi(as tales como los g1neros Bacillus o Clostridium. <acterias de estos g1neros pro(ocan di(ersas enfermedades, adem's son ca0santes de into9icacin alimentaria5 6olamente tomando los casos por into9icacin alimentaria, a pesar de 70e rig0rosas medidas de seg0ridad son aplicadas en la elaboracin de alimentos las endosporas de estas bacterias p0eden permanecer latentes en casi c0al70ier medio, por ello p0eden in(adir ; permanecer con m0c&a facilidad en alimentos conser(ados o procesados, a s0 (e) t1cnicas de tincin con(encionales como la tincin de .ram no permite (is0ali)ar endosporas ;a 70e no ti8en estas estr0ct0ras5 Es por ello 70e las t1cnicas de tincin diferencial de endosporas es de s0ma importancia5 *ara la deteccin de presencia de endosporas se p0eden reali)ar la t1cnica de tincin de D=rner o la t1cnica de 6c&aeffer > ?0lton5 El ob+eti(o de la sig0iente pr'ctica es disting0ir por medio de la pr'ctica de estas dos t1cnicas de tincin diferencial la presencia de endosporas ; diferenciarlas de las estr0ct0ras (egetati(as normales5 Estas dos t1cnicas tratan las m0estras +0nto con 0n colorante inicial a altas temperat0ras, 70e permite el ingreso del colorante inicial aplicado a la pared cel0lar, ; l0ego se aplican colorantes de contraste 70e permiten identificar la endospora5 Estas dos t1cnicas, a0n70e de diferentes pasos, permiten obtener res0ltados ptimos5

%0estionario5 #5 %0'l de los m1todos 0tili)ados le permiti (is0ali)ar me+or las endosporas bacterianas@ AB 701 le atrib0;e la diferencia@ La t1cnica de D=rner permiti (is0ali)ar m0c&o me+or la m0estra con Bacillus sp5 Lo 70e no permiti 70e la m0estra en la 70e se aplic la t1cnica de 6c&aeffer > ?0lton p0do &aberse debido a 70e el tratamiento con calor es constante, est' pro(ista de 0na f0ente constante de safranina ; se posee ma;or control sobre la m0estra en la primera t1cnica Cla sol0cin es colocada en 0n recipiente 70e permanece est'tico ; en ba8o maraD, mientras 70e en la seg0nda t1cnica es necesario sostener la l'mina porta-ob+etos ; aportar contin0amente colorante safranina para 70e la m0estra no pierda el colorante por e(aporacin5 Esto genera dific0ltades en aportar 0na f0entes contante de calor, debido a 70e se debe aplicar colorante safranina ; asimismo la m0estra no permanece est'tica5 El contraste 70e pro(ee la nigrosina es m0c&o me+or 70e el contraste 70e ofrece el (erde mala70ita, 70e es ten0e ; no se fi+a perfectamente, lo 70e, s0mado a 0na mediana fi+acin de safranina, genera 0na coloracin de menor contraste5 5 35 45 E5 AEn c0'l de las dos t1cnicas se obser(a el car'cter resistente de la endospora@ Debido a las condiciones de calor a las 70e se somete la m0estra con endosporas, ma;or a la 70e la misma c1l0la bacteriana podra resistir, en la t1cnica de D=rner se obser(a el caFacter resistente de la endospora5