INMUNIDAD ADQUIRIDA

Adalucy Alvarez Aldana. Bacteriloga, MSc, PhD(c)

INMUNIDAD CELULAR
Los LT se originan en la
medula sea y maduran en el
timo donde adquieren el TCR
(T-Cell Receptor), un
receptor especifico para la
unin del Ag.

All se diferencian en
subpoblaciones CD4 o CD8
positivas y entran en un
proceso de seleccin positiva
y negativa para eliminar
clones autorreactivos.
LINFOCITOS T
Al salir del timo, los LT maduros y vrgenes (sin activar)
migran constantemente por los rganos linfoides
secundarios en espera de la presentacin de un Ag que
induzca su activacin.

LINFOCITOS T
LINFOCITOS T
Tras el primer encuentro con
un Ag, la inmunidad celular
tarda 7 a 14 das para
desarrollarse. Para esto, el LT
sin activar, debe pasar por las
siguientes etapas:
Bsqueda y reconocimiento
del Ag; Activacin; Expansin
clonal; Diferenciacin en
subpoblaciones con funciones
especializadas; Migracin de
los LT hacia el sitio de
inflamacin o infeccin.

LINFOCITOS T
BSQUEDA Y RECONOCIMIENTO DEL
Ag
La migracin constante de los LT
inactivos hacia los rganos
linfoides secundarios es necesaria
para el encuentro con el Ag.

Dentro de estos rganos, los LT
establecen contacto pasajero con
un gran numero de clulas
dendrticas, pero solo se detienen
y estrechan la unin con las que
presenten los Ag compatibles con
sus receptores (TCR).

La molcula antignica
presentada a los LT est
constituida por pptidos
unidos a molculas del HLA.
El Ag y el HLA son reconocidos
por el LT gracias al TCR.

Los LT que participan en la
inmunidad innata, como los LT
y las NKT, tambin poseen
TCR, pero no reconocen
pptidos sino glucolpidos
presentados por una molcula
similar al HLA-I, conocida
como CD1.

BSQUEDA Y RECONOCIMIENTO DEL
Ag
ACTIVACIN DE LOS LT
La activacin efectiva e un LT
requiere al menos dos seales:

SEAL 1:

Reconocimiento del Ag mediante
el TCR. Moleculas coreceptoras.


TCR:
La especificidad de la respuesta de
los LT esta determinada por un
numero preexistente de TCR que
adquieren durante el proceso de
maduracin.

El TCR es un receptor de membrana
sin segmentos intracitoplasmticos
que no reconoce microorganismos o
macromolculas en su estado
natural; reconoce pptidos o algunos
glucolpidos o lpidos que han sido
procesados y presentados en el
contexto HLA-I, HLA-II o CD1.
ACTIVACIN DE LOS LT
TCR: TCR est compuesto por
dos cadenas, o . Estas
cadenas son muy polimrficas y
poseen un dominio variable (V) y
varios constantes (C). Entre ellos
se interpone un dominio de
unin J (joint). La cadena tiene,
adems, un segmento adicional
de diversidad (D).

TM: dominio transmembranal
CYT: dominio citoplsmico
ACTIVACIN DE LOS LT
El dominio V tiene tres sectores hipervariables en donde la secuencia
de aminocidos cambia generando una gran cantidad de receptores
diferentes, especficos para cada Ag.

TCR: Los genes que
codifican para las
cadenas del TCR
estn distribuidos en
cuatro loci, los TCRA
y TCRD en el
cromosoma 14 y los
TCRB y TCRG en el
cromosoma 7.

ACTIVACIN DE LOS LT
En el genoma
humano existen mas
de 250 segmentos
gnicos para las
cadenas V, J y D, los
cuales sufren
recombinacin
somtica durante el
desarrollo de los LT
para producir genes
VDJ o VJ, razn por
la cual se incrementa
la diversidad de
receptores.
ACTIVACIN DE LOS LT
TCR: Los mecanismos de
diversificacin del TCR incluyen
recombinacin somtica de los
diferentes fragmentos gnicos
por efecto de nucleasas y ligasas,
adicin de nuevos nucletidos
por la enzima
deoxirribonucleotidiltransferasa y
eliminacin de nucletidos por
medio de exonucleasas.



ACTIVACIN DE LOS LT
La unin del TCR con la molcula
presentadora del Ag requiere
molculas correceptoras.

El CD4 acta como correceptor
de la molcula HLA-II y el CD8,
de la HLA-I. Sus extremos
citoplasmticos estn asociados
a la quinasa Lck, necesaria para
iniciar la sealizacin
intracelular que conduce a la
activacin del LT.

ACTIVACIN DE LOS LT
La participacin del CD4 o del CD8 es indispensable para iniciar una
activacin eficiente de los LT.

Para transmitir las seales de activacin el
TCR se asocia a una molcula llamada CD3,
integrada por tres cadenas: g, y ,
agrupadas como heterodmeros , .
CD3 (marcador de LT maduros).

El TCR tambin est asociado a un
heterodmero de cadenas , CD247, cuya
porcin intracitoplasmtica es responsable
de transmitir al interior del LT el mensaje
de que al TCR se ha unido un Ag.

ACTIVACIN DE LOS LT

Las cadenas del CD3 y las asociadas al
TCR poseen en sus segmentos
intracitoplsmticos, 10 motivos de
activacin dependientes de tirosina
(ITAM), 6 en la cadena y uno en cada
cadena de los heterodmeros y ), que
al ser fosforilados inician la activacin de
los LT.
ACTIVACIN DE LOS LT
SEAL 2: Coestimulacin

El reconocimiento del Ag por
el TCR es indispensable pero
no suficiente y requiere la
interaccin de una serie de
molculas coestimuladoras
con sus ligandos. Algunas de
estas molculas se expresan
constitutivamente en tanto
que otras lo hacen a
diferentes intervalos de
tiempo despus del
reconocimiento del Ag.
ACTIVACIN DE LOS LT
CD40 y CD40L: El CD40L se
expresa rpidamente en los
LT despus de la activacin
por el Ag e interacta con el
CD40 de las DC, Macrfagos y
LB. Su interaccin regula
positivamente la activacin
sostenida del factor de
transcripcin nuclear NF-B.


ACTIVACIN DE LOS LT
Concentraciones altas de Ag modulan positivamente la expresin de
CD40L en los LT activados. Adems la interaccin entre el CD40 del
LB y el CD40L del LT CD4+ tiene un papel importante en la
proliferacin y diferenciacin de clulas B.


CD28: Es una glicoprotena de
membrana que se expresa en los
LT y que interacta con las B7
(B7-1 o CD80 y B7-2 o CD86), las
cuales se expresan en las APC.

La interaccin CD28-CD80/86
potencia la produccin autocrina
de IL-2 (citoquina que induce la
proliferacin de LT) y prolonga la
vida del LT. Adems, inicia la
expresin de molculas de
adherencia y la produccin de
factores de crecimiento y de
citoquinas.

ACTIVACIN DE LOS LT
Transduccin de seales
intracelulares: El reconocimiento
del Ag induce la agrupacin y
reordenamiento de receptores en
la membrana celular de los LT y
APC.

La interaccin entre estas zonas de
la membrana del LT y la APC se
conoce como sinapsis
inmunolgica y consiste en un
complejo molecular organizado y
dinmico, que permite el flujo
bidireccional de informacin.
ACTIVACIN DE LOS LT
Transduccin de seales
intracelulares:
Est dividido en dos zonas
concntricas:
La regin central compuesta por TCR-
Ag-MHC, coreceptores y
coestimuladores, que dan las seales
de activacin.
La zona perifrica conformada
principalmente por las molculas de
adherencia LFA-1-ICAM-1, CD2-LFA-3,
que por su afinidad, mantienen y
estabilizan la unin entre las clulas.
ACTIVACIN DE LOS LT
ACTIVACIN DE LOS LT
CASCADA DE ACTIVACIN:
1.Reconocimiento del Ag por el
TCR.
2.La fosfatasa CD45 activa las
quinasas de tirosina Fyn y Lck,.

ACTIVACIN DE LOS LT
CASCADA DE ACTIVACIN:
3.Una vez activadas, estas
quinasas se autofosforilan y
fosforilan los ITAM de las
cadenas y del CD3.

La anterior fosforilacin atrae
la molcula ZAP-70, que activa
dos vias.

ACTIVACIN DE LOS LT
CASCADA DE ACTIVACIN:
4. Unin de ZAP-70 a la
fosfolipasa C1 (PLC1) que
convierte el fosfatidilinositol
bifosfato (PIP2) en inositol
trifosfato (IP3) y diacilglicerol
(DAG). El IP3 se difunde al
citoplasma y se une a sus
receptores en el RE, donde induce
la liberacin de los depsitos de
Ca2+ hacia el citosol. El aumento
intracelular de Ca2+ estimula la
enzima calmodulina, que es una
sern/treonn-quinasa.

ACTIVACIN DE LOS LT
CASCADA DE ACTIVACIN:
4. La calmodulina activa la
calcineurina, una fosfatasa que
cataliza la desfosforilacin del
factor de transcripcin nuclear
NFAT para permitir su ingreso al
ncleo y activar la expresin de
varios genes, entre ellos el de la
IL-2.

CASCADA DE
ACTIVACIN:
4. El DAG activa la
protena quinasa C (PKC).
La PKC fosforila el
inhibidor del factor de
transcripcin nuclear NF-
B (iB) y libera el NF-B
para permitir su ingreso
al ncleo.

ACTIVACIN DE LOS LT
ACTIVACIN DE LOS LT
CASCADA DE ACTIVACIN:
4. ZAP-70 fosforila una protena
adaptadora conocida como LAT,
que recluta varias protenas que
permiten transferencia de GDP a
GTP para la activacin de unas
protenas llamadas Ras, que a su
vez activan las MAP quinasas,
que activan el factor de
transcripcin AP-1 compuesto por
las protenas c-fos y c-jun que se
unen en el ncleo e inician la
transcripcin de genes.

EXPANSIN CLONAL
En el proceso de
activacin del LT, las
cascadas de sealizacin
activan la transcripcin
de mltiples genes entre
ellos el de la IL-2; por
esto, los LT activados
aumentan de tamao y
empiezan a proliferar.
La IL-2 es la principal
citoquina que induce
linfoproliferacin y
acta de manera
autocrina y paracrina
sobre los LT.

EXPANSIN CLONAL

Adems, activa la blastognesis
o expansin clonal que da
origen a un gran numero de LT,
con un receptor idntico al
original, capaces de reconocer
nicamente el Ag que inici su
activacin.

La fase de activacin y expansin
clonal de los LT es seguida por una
fase de muerte durante la cual un
90% de las clulas efectoras se
elimina por apoptosis.

Si el LT expresa la
molcula CD4, se
convierte en un LT
ayudador, LT-h (helper),
los cuales producen
citoquinas y estimulan a
los LB para generar Ac.

GENERACIN DE SUBPOBLACIONES DE LT
CD4+
Hasta hace poco se haban
identificado 4 fenotipos
distintos conocidos como
Th1, Th2, Th17 y LT
reguladores (LT reg), cada
uno de los cuales secreta un
perfil diferente de
citoquinas.

En los ltimos aos se han
identificado nuevas
subpoblaciones con
funciones efectoras
especficas: Th9, Th22 y LT
foliculares (Tfh).

GENERACIN DE SUBPOBLACIONES DE LT
CD4+
1. Citoquinas que participan en el proceso de diferenciacin de cada
fenotipo.
2. Factores de transcripcin necesarios para la diferenciacin y expresin
de citoquinas.
3. Principales citoquinas producidas por cada subpoblacin de LT CD4+.
Th1: Patgenos intracelulares
Th2: Patgenos extracelulares y
alergenos. Inducen la inmunidad
humoral.
Th9: Alergenos y helmintos (Mas,
Eo).
Th17: Ambiente inflamatorio (AR,
LES, asma bronquial).
Th22: Cicatrizacin de heridas y en
los mecanismos de defensa
naturales.
TFH: Centros germinales,
transformacin de LB en clulas
plasmticas y B de memoria.
GENERACIN DE SUBPOBLACIONES DE LT
CD4+
Expresan el fenotipo CD4+CD25+ y
representan del 5% al 10% de los LT
CD4 en adultos sanos. Expresan
marcadores de activacin como el
CTLA-4, el receptor de la IL-2 (CD25),
OX-40 y L-selectina.

Son consideradas anrgicas por no
secretar la IL-2, lo que las hace
dependientes de la secretada por
otras clulas.

CLULAS T REGULADORAS (LTreg)
Por su mecanismo de
accin y origen,
representan una
poblacin heterognea
de clulas, que se divide
en dos:
-LTreg naturales de
origen tmico.
-LTreg inducidos o
diferenciados en la
periferia.
CLULAS T REGULADORAS (LTreg)
Modulan la funcin de las DC a travs del receptor inhibidor CTLA-
4, lo cual induce en la DC la produccin de una enzima llamada IDO
(deoxigenasa de indolamina), que degrada el triptfano,
transformndolo en metabolitos proapoptticos llamados
kinureninas, inhibiendo la activacin de los LT.
CLULAS T REGULADORAS (LTreg)
Liberacin de molculas
reguladoras como IL-10, TGF-
, IL-35 y adenosina, inhiben
la secrecin de citoquinas
propias de los fenotipos Th1,
Th2 y Th17.

Contacto directo. Unin que
permite el traspaso de cAMP
por uniones intercelulares o la
liberacin de granzimas y
perforinas que inducen la
apoptosis de la clula
efectora.


CLULAS T REGULADORAS (LTreg)
Competencia por la IL-2. Los LTreg no producen IL-2, por eso
compiten con los otros LT durante la expansin clonal
privndolos de seales de proliferacin.

Los LTreg previenen la autoinmunidad, bloquean los LT
autorreactivos que escapan a la seleccin negativa en el
timo, inhiben la proliferacin y expansin de los LT
vrgenes.
Evitan el rechazo de trasplantes, previenen la induccin
de una respuesta antitumoral y regulan la respuesta
inmune a enfermedades infecciosas.



CLULAS T REGULADORAS (LTreg)
Muchas clulas malignas producen la quimioquina CCL-22 que
atrae a los LTreg para desactivar la respuesta inmune antitumoral
que adelantan otras subpoblaciones de LT e incluso LB.

Por su capacidad de regular la respuesta dependiente de clulas T,
se estudia la posibilidad de su uso con fines teraputicos en
enfermedades autoinmunes y en trasplantes.

Su carencia gentica es responsable de un proceso de
inmunodeficiencia ligada al cromosoma X que tiene
manifestaciones pluriglandulares e intestinales y que se conoce
como IPEX.
CLULAS T REGULADORAS (LTreg)
Las citoquinas producidas por las
clulas Th1 y Th2 actan como
reguladores o inhibidores de las
subpoblaciones opuestas, es decir, la IL-
4 favorece el fenotipo Th2 y limita la
respuesta Th1 al disminuir la expresin
de la cadena del receptor para la IL-
12. Por el contrario, el IFN favorece el
fenotipo Th1 y limita la respuesta Th2.
Por lo tanto, usualmente se observa el
predominio de uno de ellos.
La subpoblacin Th17 es inhibida por la
accin del IFN que actan
disminuyendo la expresin del receptor
para la IL-23.


COEXISTENCIA, PREDOMINIO Y
EXCLUSIN DE FENOTIPOS
LT CD8+ o CITOTXICOS, LTctx
Cuando un LT CD8+ desarrolla
sus funciones efectoras se
convierte en un LTctx capaz de
atacar directamente y destruir
clulas malignas o infectadas
por virus.

Para ejercer su funcin, el LTctx
induce apoptosis en sus clulas
blanco mediante la liberacin
de grnulos citolticos.

Contacto de un
LTctx con una
clula tumoral
Los grnulos citolticos contienen las protenas: Perforinas; Granzimas;
Granulolisinas (degradacin de lpidos de membrana); Calreticulina
y Catepsina G. Inhibidores de perforinas. Protegen el LTctx de la
autolisis.

Defensa contra

LT CD8+ o CITOTXICOS, LTctx
Infecciones virales y clulas tumorales.
LT CD8+ o CITOTXICOS, LTctx
CIRCULACIN DE LOS LT
Un aspecto esencial para el
desarrollo de la inmunidad
celular es la circulacin
constante de los LT. Su paso
desde la mdula sea hacia
el timo, su trafico continuo
por los rganos linfoides
secundarios y su posterior
movilizacin hacia los tejidos
hacen de ellos clulas de
gran movilidad.

Solo las clulas endoteliales especializadas del epitelio cuboide de las
venas poscapilares permiten el paso constante de los LT desde la
sangre hacia los ganglios o hacia las placas de Peyer ya que expresan
constitutivamente adresinas, PNAd (peripheral node addressin) o
MAdCAM-1 (mucosal addressin cell adhesin molecule 1)
respectivamente, que interactan con la L-selectina de los linfocitos.

Las clulas endoteliales del resto de la vasculatura restringen o
impiden la unin de linfocitos a menos que sus receptores sean
inducidos por mediadores de la inflamacin.

CIRCULACIN DE LOS LT
Una vez llegan al ganglio
linftico, los LT son activados por
tres seales: el Ag, molculas
coestimuladoras y citoquinas
que inducen su proliferacin.

Posteriormente el LT efector
pierde la selectina-L y en su
reemplazo expresa PSGL-1,
ligando de las selectinas P y E,
para migrar hacia los tejidos
donde se gener la invasin o
agresin microbiana.

CIRCULACIN DE LOS LT
Adems, el LT activado expresa integrinas 4, entre ellas VLA-4 y
47, que interactan con el VCAM-1 presente en las clulas
endoteliales para salir hacia los tejidos .


CIRCULACIN DE LOS LT

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
LIBROS:

Abbas, A K, et al. Celular and Molecular Immunology. 7 ElSeiver Saunders, 545 pages.

Rojas, W et al. Inmunologa, 16. edicin, Ed. Corporacin para Investigaciones Biolgicas, 2012,

Kindt TJ. et al. Inmunologa de Kuby. 6 Ed. Interamericana- McGraw Hill. Espaa.2008. 665 Pags.


ARTICULO:




Rev.Colomb.Reumatol. vol.18 no.3. 2011. Linfocitos T reguladores: subpoblaciones, mecanismo
de accin e importancia en el control de la autoinmunidad. Heber Siachoque1, Natalia
Satisteban2, Antonio Iglesias-Gamarra3