Universidad Nacional Autónoma de México

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Microbiología General I

Ortiz García Isha.

Reyes Martínez Adela.
Salazar Orozco G. Veronica.
Tadeo Rangel Miguel. A.
Grupo: 1602. Equipo 1, Semestre 2009-1.
•En farmacología, un antibiótico proviene
del griego αντί - anti, "en contra" + βιοτικός -
biotikos, "dado a la vida" .

•Que por su efecto, se indica en medicina

humana y animal para tratar una infección
por bacterias.
•Normalmente un antibiótico es un agente
inofensivo para el hospedero.
 Quimioterápicos:
compuestos obtenidos por
síntesis químicas y tienen
acción antimicrobiana.
 Antimicrobianos: Incluye
compuestos obtenidos a
partir de m.o. y por
síntesis químicas.
 Claseespecial de agentes
quimioterapéuticos, son sustancias químicas
producidas por microorganismos que tiene
acción antibacteriana.
1. Poseer especificidad: actuar sobre un lugar especifico de la
bacteria.
2. Elevada potencia biológica. Activo en pequeñas
concentraciones.
2.1) CONCENTRACIÓN MINIMA INHIBITORIA (CIM).
2.2) CONCENTRACIÓN MÍNIMA BACTERICIDA (CMB).
3. Capacidad para obtener una concentración adecuada en
tejidos y órganos (buena absorción, conjugación y
eliminación lenta).
4. Presentar mínima toxicidad para el huésped.
5. Estabilidad, para su comercialización.
 Término propuesto por Waksman: “sustancias
dotadas de actividad antimicrobiana y extraídas de
estructuras orgánicas vivientes” (Bergoglio).
 en Alemania se desarrollo un antibiótico de corto
espectro Salvarsan por Paul Ehrlich en 1909.
 En 1928, Alexander Fleming , placas con colonias
estafilococicas que sufrían lisis por presencia de un
hongo, identificado como Penicillium notatum

 En 1939, Florey y Chan desarrollaron una técnica

por la cual se podría extraer el m.o. Penicillium
notatum en cantidades suficientes para su empleo.
Seguimos con la historia…
 En la segunda guerra mundial se
investigo mas sobre la penicilina.
 En 1943, Waksman descubrió la
eritromicina.
 En el mismo año, Dubos descubrió la
gramicidina y la tirocida.

No obstante de estos nuevos

antibióticos, no tardaron en surgir
cepas resistentes
 Bacillus sp,
Streptomyces sp,
Pseudomonas sp
Natural o Bacterias
biológico:
cefalosporinas,
penilicina,
gentamicina
Penillicium sp,
Hongos Cephalospo rium sp,
Micronospora sp

Origen de los
antimicrobianos
Sintéticos Sulfamidas,quinolinas.

Aminobencilpenicili
nas (ampicilina,
amoxilinica) y los
Semisintéticos beta- lactámicos
(ultimas
generaciones)
1. Por su efecto antimicrobiano
2. Por su espectro
3. Por su estructura
4. Por mecanismo de acción
 Bacteriostáticos
Impiden el desarrollo y multiplicación
de las bacterias sin destruirlas, cuando
se retira el antibacteriano el m.o.
puede multiplicarse de nuevo.

-Cloranfenicol
Bactericidas
Su acción es letal, produciendo la lisis
bacteriana.
Bactericidas que actúan sobre la pared
celular (b- lactámicos).
Sobre la membrana citoplasmática de
la bacteria (polimixina).
1. De amplio espectro
2. De espectro intermedio
3. De espectro reducido
Puede inhibir una gran variedad de
bacterias gram (+) y gram (-) .

Tetraciclinas
Tienen acción sobre un número limitado
de especies.

Macrólidos como
la eritromicina
Son activos sobre un pequeño número
de bacterias.

Glucopéptidos como
la Vancomicina
1. Beta lactámicos: penicilina,
cefalosporina,
monobactalamicos,
carbapenemos
2. Aminociclotoides: aminoglucidos
3. Anfenicoles
4. Glucopéptidos
5. Lincosamidas
6. Nitrofuranos.
7. Nitroimidazoles.
8. Polipeptidicos.
9. Rifampicinas
10. Quinolonas.
11. Sulfonamidas .
12. Tetraciclinas
13. Sinergistinas.
14. Macrolidos.
 Impidiendo síntesis de la pared celular.
 Alterando permeabilidad de la membrana
(citoplasmática).
 Interfiriendo en vías metabólicas.
 Inhibiendo síntesis proteica.
 Bloqueando síntesis de los ácidos
nucleícos.
 Pared celular de las bacterias
La concentración de iones y metabolitos dentro de
las bacterias es mucho mayor que en el medio
que lo rodea produciendo una presión osmótica
muy alta en su interior, la función de la pared es
soportar esta presión y evitar que se rompa la
membrana celular. Estos antibióticos son útiles
cuando la bacteria se esta reproduciendo.
Ejemplos: Penicilina; Cefalosporina; Cicloserina;
Bacitracina;Vancomicina; Ristocitina
30-200 CAPAS PEPTIDOGLUCANOS 1 -3 CAPAS DE PEPTIDOGLUCANOS
(grosor total 25-30 nm) (grosor total 10-15 nm)
La capa de peptidoglucanos presente en
mayor o menor proporción en las
bacterias gram positivas y gram
negativas, contiene glicanos y enlaces
peptídicos, que pueden sufrir una
ruptura enzimática en los en los enlaces
entre glicanos, por la acción de la
transglicolasa y en los enlaces peptídicos
por la transpeptidasa.
Los antibióticos que afectan la
pared celular, inhiben
enzimas o secuestran
sustratos involucrados en la
unión de los peptidoglicanos
(PG), causando la muerte de
las bacterias al provocar la
acumulación de precursores
de dicho PG,
desencadenando la
activación de autolisinas de
la bacteria, las cuales
degradan a los PG y que
finalmente provocan la lisis
celular (en medios
hipotónicos).
1. Fosfomicina: Inhibe de forma irreversible a la enzima
bacteriana enolpiruvato-transferasa, reacción en la
cual se obtiene el Ac. N-acetilmuramico a partir del Ac.
N-acetilglucosamina.
2. Cicloserina: Se comporta como análogo estructural de
la D-alanina por lo que inhibe la reacción de la unión
de dos D-ala. También actúa sobre la D-alanina
sintetasa que convierte la L-ala a D-ala.
3. Vancomicina y ristocetina: Inhiben a las cadenas
laterales D-alanil-D-alanina del peptidoglucano lo que
provoca que no se formen las cadenas de
peptidoglucanos (el entrecruzamiento).
4. Bacitracina: La molécula lipídica que sirve como
vehículo es fosforilada en esta reacción e impide la
regeneración del transportador de membrana.
5. Beta- lactámicos: son antibióticos bactericidas que
bloquean las transpeptidación.
La transpeptidación se facilita por las transpeptidasas
conocidas como "penicillin binding proteins" (PBPs,
proteínas de anclaje de penicilinas).
Los beta-lactámicos se unen irreversiblemente a los
receptores PBPs de la bacteria inhibiendo así la
transpeptidación y por lo tanto la síntesis de la pared
celular, las bacterias en desarrollo se vuelven
incapaces de mantener la presión osmótica y
explotan.
Es posible, además que se activen enzimas autolíticos
de la pared celular bacteriana.
 Los antibióticos betalactámicos están
indicados para la profilaxis y el tratamiento de
las infecciones causadas por los
microorganismos susceptibles.
Tradicionalmente, los antibióticos
betalactámicos han sido activos solamente
contra las bacterias Gram positivas, pero el
desarrollo de antibióticos de amplio espectro,
activos contra varios microorganismos Gram
negativos, ha aumentado la utilidad de los
antibióticos β-lactámicos.
Estos antibióticos poseen un extremo liposoluble y
otro hidrosoluble (detergentes catiónicos) cuando
esta molécula llega a la membrana se inserta entre
la capa lipídica y las proteínas, produciendo una
abertura en la membrana provocando la salida de
sustancias de la bacteria, también pueden conducir a
una desorganización, conduciendo a la ruptura de la
membrana.
Las bacterias gram
negativas, son mas
susceptibles a este
tipo de antibióticos.
Ej: polimixina y
polienos
Otros antibióticos de acción en membrana
celular desacoplan la fosforilación oxidativa
que se da en la membrana (por ejemplo,
bloqueando la generación de ATP)
Ejemplo: torocidina, gramicidina S
 El mecanismo de acción de las polimixinas
consiste en la interacción con las moléculas
lipopolisacáridas (LPS) en las bacterias gram
negativas.

 Las polimixinas reaccionan con los fosfolípidos

produciendo una desorganización, con lo que
se produce una permeabilidad hacia la
membrana celular.
 Los antibióticos pueden alterar la
permeabilidad de la bacteria actuando
como detergentes catiónicos y
provocando la salida de sustancias del
interior de la célula.
 Colistina

 Anfotericina

 Nistatina
 Desventajas
Existen pocos compuestos antimicrobianos
que actúen en la membrana celular,
porque las similitudes estructurales y
químicas entre las membranas celulares
bacterianas y humanas hacen que sea
difícil que exista suficiente selectividad
tóxica.
Estos son utilizados junto con otros antibióticos
en el tratamiento de enfermedades causadas
por micobacterias, actuando sobre las enzimas
del metabolismo intermedio.

Inhibidores del acido fólico (coenzima).

La selectividad se basa en que las bacterias
patógenas sintetizan acido fólico, en cambio
los mamíferos no pueden sintetizarlo sino
que tiene que ser consumido.
 Sulfonamidas
Las sulfonamidas compiten con el PABA como sustrato para
ocupar como cofactor la enzima responsable de la
incorporación de PABA al ácido dihidropteroico, precursor
del ácido fólico .

Trimetroprima
Tiene acción inhibitoria contra la dehidrofolato reductasa,
involucrada en la producción de acido fólico

VIA DE SÍNTESIS DEL TETRAHIDROFOLATO

Sulfonamidas
Acido p-aminobenzoico (PABA) Dihidropteroato Acido fólico
Dihidropteroato
sintetasa Trimetoprim deshidrofolato
reductasa

. Tetrahidrofolato
A partir del DNA
cromosómico se
transcriben las diferentes
moléculas de rRNA que,
combinadas con proteínas
específicas, forman los
ribosomas. También se
transcriben moléculas de
tRNA correspondientes a
los a.a., y los mRNA que
llevan la información para
la secuencia de a.a de
proteínas. Cuando un
mRNA se une a la
subunidad menor del
ribosoma, comienza el
proceso de síntesis de
proteínas
Los antibióticos pueden interrumpir el
tiempo y especificidad de alguno de
estos pasos, y cada interrupción puede
detener el crecimiento e incluso ser letal
para la bacteria.
 a. Aminoglucósidos: Se unen de manera irreversible a la
subunidad 30s del ribosoma provocando que la lectura del
mensaje contenido en el ARN sea equivocado y, en consecuencia,
una síntesis de proteínas erróneas. Así mismo, también se cree
que estas sustancias producen una alteración en la iniciación del
ensamblaje de aminoácidos y con ello una acumulación de
complejos de iniciación.
 b. Macrólidos: Se ligan en forma reversible a la subunidad 50s del
ribosoma, impidiendo así el acceso del ARNt»aá al complejo
ARNm»ARNr; el resultado es el bloqueo del ensamblaje de
péptidos.
 c. Cloramfenicol: Este antibiótico inhibe la síntesis proteica
bacteriana y , en menor grado, en células eucarióticas.
 d. Tetraciclinas: Inhiben de manera reversible, la unión del ARNt a
los aminoácidos y por lo tanto no hay agregación de estos últimos.
 Penetra fácilmente las estructuras de
recubrimiento bacterianas, mediante difusión
facilitada.
 Inhibe la síntesis proteica en bacterias y en
menor grado en células eucariontes.
 Es bacteriostático.
 Actúa al unirse de manera reversible a la
subunidad ribosómica 50 S (cerca del sitio de
acción de los antibióticos macrólidos, con los
cuales establece inhibición competitiva).
Su mecanismo está dado
por la unión reversible a
la subunidad 50s del
ribosoma, lo que
conlleva el bloqueo del
acceso del complejo
ARNt-a.a al complejo
ARNm-ARNr; en este
caso se cree que hay
inhibición de la enzima
péptido sintetasa.
Obtenido a partir de Streptomyces venezuelae es un
agente bacteriostático de amplio espectro, activo frente
a bacterias gram positivas y gram negativas,
incluyendo anaerobios, clamidias y ricketsias. Exhibe
actividad bactericida frente a H. influenzae, S.
pneumoniae y N. meningitidis.
Se debe considerar el riesgo de toxicidad hematológica
del Cloramfenicol: No se puede soslayar el hecho de
que este antibiótico también inhibe la síntesis proteíca
de las células del mamífero, particularmente en las
células precursoras de la sangre en la médula ósea.
Bloquean la replicación y reparación del
DNA. En este tipo de antibióticos se
engloban aquellos que afectan la
replicación y la transcripción de la
molécula hereditaria.
La replicación del DNA implica que sean
separadas sus dos cadenas. Para esto los
organismos han desarrollado herramientas
enzimáticas que enrollan o desenrollan la
molécula de ADN.
Este proceso se logra por la acción de dos
enzimas: las topoisomerasas. Éstas catalizan la
ruptura y unión de las cadenas de DNA
tornándolo más o menos enrollado que el DNA
original.
 La topoisomerasa I actúa rompiendo temporalmente
una de las cadenas de la doble hélice volviendo a
unirla de manera que disminuye el número de vueltas
dadas por la molécula, resultando una relajación del
superenrrollamiento (En E. coli conocida como
proteína W).
 La topoisomerasa II tiene la capacidad de romper las
dos cadenas del ADN, es dependiente de ATP es decir
las topoisomerasas son ATPasas y puede generar o
deshacer asas superenrrolladas (La de E. coli es
conocida como la DNA girasa).
 Quinolonas: La DNA girasa procariota,
posee dos subunidades a y dos
subunidades ß. Las subunidades a son
las que poseen la capacidad de cortar
las hélices y son el sitio de acción de
las quinolonas, también es capaz de
inhibir las topoisomerasas tipo II
eucarióticas.
 Metronidazol: El grupo nitro que lo
compone puede ser reducido
parcialmente por bacterias anaerobias,
en esta forma es incorporado en el DNA
de la bacteria, tornándolo inestable o
rompiéndolo.
 Rifampicina: Actúa inhibiendo la RNA
polimerasa dependiente de ADN.
Grupo de antibióticos de amplio espectro. La
mayoría de las quinolonas usadas en la clínica
son del grupo de las fluoroquinolonas,
caracterizadas por tener un grupo fluoruro en
el anillo central, normalmente en posición 6.
Actualmente existen cuatro generaciones de
quinolonas como antibióticos, entre los que se
pueden encontrar como conocidos exponentes,
ácido nalixídico, ciprofloxacino, oxiflacino,
moxiflacino y levofloxacino
Las quinolonas actúan en el interior de la
bacteria, penetrando a través del canal acuoso
de las porinas. Son los únicos agentes
antibacterianos que ejercen su actividad
bactericida uniéndose a topoisomerasas
bacterianas e inhibiéndolas. La inhibición de la
actividad de estas enzimas impide a la célula
bacteriana producir las proteínas necesarias
para su reparación, crecimiento y replicación.
Una inhibición prolongada conduciría así a la
muerte de la célula.
Las quinolonas actuaría a nivel de ADN-girasa
(también llamada topoisomerasa tipo II) y de la
topoisomerasa tipo IV.
La actividad de las quinolonas contra las
bacterias gram positivas se debe a su acción
"blanco" en las topoisomerasas IV, en cambio la
actividad contra las bacterias gram negativas
es por su acción "blanco" en las topoisomerasa
II o ADN-girasa.
La compleja interacción de las quinolonas con
las topoisomerasas es la base del diferente
espectro antibacteriano de las quinolonas.
 Infecciones urinarias
 Prostatitis
 Infecciones gastrointestinales
 Infecciones respiratorias
 Infecciones óseas y articulares
 Infecciones de la piel
 ETS´s
Resistencia natural.

Resistencia adquirida

Resistencia cruzada

Resistencia asociada
Resistencia natural.

Es un carácter constante de todas las cepas de una

misma especie bacteriana. El conocimiento de las
resistencias naturales permite prever la inactividad
de la molécula frente a bacterias identificadas
(después del crecimiento) o sospechosas (en caso
de antibioterapia empírica.
Ejemplos:
Resistencia natural del Proteus mirabilis a las
tetraciclinas y a la colistina. Resistencia natural de
mycoplasma, por su pared celular.
Resistencia adquirida

Es una especie cuyo patrimonio genético ha sido modificado

por mutación o adquisición de genes.

Contrariamente a las resistencias naturales, las resistencias

adquiridas son evolutivas, y su frecuencia depende a menudo
de la utilización de los antibióticos.

En el caso de numerosas especies bacterianas, y teniendo

en cuenta la evolución de las resistencias adquiridas, el
espectro natural de actividad no es ya suficiente para guiar la
elección de un tratamiento antibiótico. En ese caso, se hace
indispensable el antibiograma.
Resistencia cruzada

Se debe a un mismo mecanismo de resistencia.

En general, afecta a varios antibióticos dentro de una misma

familia

Ejemplo:

La resistencia a la oxacilina en los Staphylococcus sp se cruza

con todas los ß-lactámicos).
En ciertos casos, puede afectar a antibióticos de familias
diferentes La resistencia por impermeabilidad a las ciclinas se
cruza con la resistencia al cloranfenicol y a la trimetoprima.
Resistencia asociada

Es cuando afecta a varios antibióticos de familias

diferentes.

En general, se debe a la. asociación de varios

mecanismos de resistencia.

Ejemplo:
La resistencia de los Staphylococcus sp a la
oxacilina va frecuentemente asociada a las
quinolonas, aminoglicósidos, macrolidos y
tetraciclinas.
 • La mutación de un gen implicado en el modo de acción de un
antibiótico
• La adquisición de genes de resistencia transferidos a partir de una
Mecanismo cepa perteneciente a una especie idéntica o diferente
genético

• Producción por la bacteria de enzimas que inactivan el antibiótico

• Una modificación del blanco del antibiótico.
• Una impermeabilidad de la pared bacteriana por modificación o por
disminución cuantitativa de las porinas.
Mecanismo • Mecanismo de efusión: expulsión de la molécula por un transporte
bioquímico. activo
 Penicilinasa de los Staphylococcus sp, ß lactamasa de
amplio espectro (BLAE) de las enterobacterias.
 Modificación de las Proteínas de Enlace con la
Penicilina (PBP) de los estafilicocos resistentes a la
oxacilina (llamados estafilococos "Meti-R").
Neumococos resistentes a la penicilina.
 Estafilococos resistentes a las tetraciclinas.
 Estudio de la sensibilidad o resistencia
de determinado microorganismo a varios
antibióticos.
 Utiliza para tratar un patógeno, en
definitiva para saber como se comporta
un m.o. frente a determinado antibiótico.
 El antibiograma se puede hacer tanto en
medio líquido como en medio sólido.
 El mas utilizado es el Müeller-Hinton.
Interés Terapéutico.

Interés Epidemiológico.
 Interés Terapéutico.

Medir la sensibilidad de una cepa

bacteriana
que se sospecha es la responsable de una
infección y resistencia a uno o varios
antibióticos.
 Interés Epidemiológico.

Seguir la evolución de las resistencias

bacterianas. Puede adaptarse la
antibioterapia
empírica, revisarse regularmente los
espectros
clínicos de los antibióticos.
Siempre que una toma bacteriológica de
finalidad dìagnóstica haya permitido el
aislamiento de una bacteria considerada
responsable de la infección.
 Depende de la CIM (concentración
inhibidora mínima).
 Permite establecer la actividad del
antibiótico frente a la bacteria.
Una cepa bacteriana puede ser:

Sensible (S)
 Intermedia (I)
Resistente (R) al antibiótico.
Instituto de estandarización de
laboratorios clínicos, antes NCCLS.
 Establece los parámetros para las
pruebas de susceptibilidad de
antibióticos.
 Tablas de estandarización
A través de la comparación de las
respuestas para cada antibiótico, un
mecanismo de resistencia incluso
débilmente expresado. Así, gracias a
la interpretación, una cepa que
aparece como falsamente sensible
será categorizada como I o R.
 por su alta reproducibilidad.
 bajo contenido de sustancias inhibidoras y el
crecimiento satisfactorio que presentan la
mayoría de los
 patógenos no fastidiosos
 el medio posee propiedades inhibitorias
mínimas para las sulfonamidas, trimetoprima y
tetraciclina.
 El microorganismo a investigar se inocula
en una o varias placas de agar
 y sobre su superficie se disponen los discos
correspondientes a varios antibióticos.
 Se incuban las placas durante 16-24 horas a
35ºC.
 Se valora el diámetro de la zona de
inhibición que se forma alrededor de cada
disco y se compara con las referencias
oportunas publicadas por el CLSI.
 Se trata de una técnica cuantitativa en
placa que permite obtener una lectura
directa de CMI en µg/mL, ya que se
emplean tiras plásticas impregnadas en
concentraciones crecientes de
antibiótico indicadas en una escala
graduada sobre la propia tira.
• Sistemas de microdilución en medio
líquido sobre microplacas con pocillos
en "U"
• Autoanalizador (mediciones por turbidez
o fluorescencia)
• Por simple lectura óptica del técnico a
través de un visor invertido de espejo.
 El control de calidad riguroso es importante en el
caso de las pruebas de susceptibilidad a
antimicrobianos, debido a la gran cantidad de
variables que pueden afectar los resultados.
Algunas de las características físicas y químicas de
los medios, como el pH y el espesor de la capa de
agar, pueden controlarse pero el control definitivo
esta dado por una serie de cepas bacterianas de
referencia que incluyen:
 Escherichia coli (ATCC# 25922)
 Pseudomonas aeruginosa (ATCC# 27853)
 Staphylococcus aureus (ATCC#29213)
 Streptococcus faecalis (ATCC#29212)
 Haemophylus influenzae (ATCC#49247)
 Neisseria gonorrhoeae (ATCC#49226)
 Las cepas control ideales poseen puntos
finales de sensibilidad en el rango medio de
concentraciones antimicrobianas probadas.
 Estas cepas de referencia deben ser
conservadas en condiciones que minimicen
la posibilidad de mutacion,
El abuso y uso indiscriminado de
los antibióticos, conlleva que
los diferentes agentes
patógenos se hagan
resistentes
 Automedicación.
 Interrupción de un tratamiento.
 Uso abusivo de antibióticos.
 Prescripción facultativa incorrecta.
 Dosis inapropiada.
 La presencia de ciertas enfermedades
como el SIDA.
 Bergoglio R. Antibióticos. Medica
Panamericana. 3ª edición, Buenos aires
1979
 Walsh, Christopher; Antibiotics, ASM
Press, USA, 2003
 Koneman, E. W: Diagnostico
Microbiológico. México: Editorial Medica
Panamericana. 1985
 Pelczar M. et al. Microbiología. 4ta
Edición. Mc-Graw Hill. México. 1982.
 Tortora G. J. Microbiology. 5ª. The
Benjamin Cummings Pulishing Co. Inc.
1995.