INTERAKTIF PENGARUH AMMONIA DAN NITRAT PADA serapan nitrogen OLEH

Nannochloropsis sp.
Abstrak : Mikroalga mampu menyerap berbagai jenis nitrogen. Interaksi nitrogen pada
penghapusan mereka dengan mikroalga harus menjadi perhatian besar ketika mikroalga yang
digunakan sebagai pengobatan biologis dalam air limbah. Penelitian ini bertujuan untuk
mengungkapkan preferensi senyawa nitrogen oleh Nannochloropsis sp. Mikroalga yang
ditumbuhkan dalam 900 mM nitrat, 900 mM amonium, nitrat dan 900 mM amonium ditambah
900 pM. Nannochloropsis sp. disukai amonium nitrat daripada ketika kedua senyawa yang
tersedia untuk mikroalga. Nitrat digunakan dalam ketiadaan amonium. Tingkat penyerapan
amonium secara signifikan lebih tinggi dibandingkan nitrat (p = 0,004). Ada perbedaan yang
signifikan dalam tingkat pertumbuhan mikroalga dengan sumber nitrogen yang berbeda (p
<0,000). Nannochloropsis sp. tumbuh lebih cepat dalam amonia pengobatan yang mengandung.
Namun, tidak ada perbedaan yang signifikan dalam kepadatan sel maksimum yang dihasilkan
oleh budaya nutrisi nitrogen yang berbeda (p = 0.224). Nannochloropsis sp. dapat digunakan
sebagai pengobatan biologis untuk air limbah. Mikroalga yang pertama akan menghapus
amonium dan memulihkan toksisitas amonia menjadi ikan yang paling. Setelah amonium telah
dihapus atau diturunkan ke tingkat yang lebih aman, nitrat dapat dihapus oleh mikroalga.
Kata Kunci: Amonium, Nannochloropsis sp, nitrat, penghapusan, air limbah.

Pendahuluan
Limbah dari budidaya kaya padatan
terlarut dan nutrisi. Nutrisi terutama dalam
bentuk nitrogen anorganik dan fosfor
(Pillay, 1990). Limbah dari industri
akuakultur harus diperlakukan sebelum
dibuang ke ekosistem perairan yang
berdekatan mereka. Nutrisi yang berlebihan
dibuang ke lingkungan akan menyebabkan
eutrofikasi dan kontaminasi (Tovar et al,
2000a;. Tovar et al, 2000b;. Holmer et al,
2002;. Peuhkuri, 2002). Komposisi senyawa
nitrogen dalam budidaya air dapat bervariasi
tergantung pada stok ikan, pakan, rezim
makan, sistem budaya, dan kualitas air
manajemen (Hargreaves, 1998; Nielsen et
al, 1999;. Engin dan Carter, 2001; Perera et
al , 2005;. Rafiee dan Saad, 2005; Mazon et
al, 2007;. Merino et al, 2007;. Ahmed et al,
2008;. TNG et al, 2008).. Amonia adalah
nitrogen prinsip limbah diekskresikan oleh
ikan (Morii et al., 1978). Selain amonia,
nitrit, nitrat dan urea merupakan senyawa
nitrogen lain yang biasanya ditemukan
dalam budidaya air. Ikan juga bisa
mengeluarkan nitrogen metabolisme seperti
urea (Gregory, 1977; Wright dan Lahan,
1998;. Kajimura et al, 2002). Urea dapat
dihidrolisis menjadi amonia (Allison dan
Prosser, 1991) sedangkan amonia dapat
diubah menjadi nitrit dan nitrat melalui
nitrifikasi (Abraham et al., 2004).
Mikroalga mampu menyerap
nitrogen dari berbagai sumber (Paasche dan
Kristiansen, 1982; Queguiner et al, 1986;.
Lund, 1987; Dortch, 1990; Cochlan dan
Harrison, 1991;. Page et al, 1999). Amonia,
nitrit, nitrat dan banyak nitrogen organik
terlarut (urea, asam amino bebas-dan
peptida) dianggap sebagai sumber nitrogen
utama mikroalga (Abe et al, 2002;. Soletto
et al, 2005;.. Converti et al, 2006 ).
Mikroalga telah banyak digunakan untuk
menghilangkan nutrisi dalam air limbah
(Hammouda et al, 1995;.. Craggs et al,
1997; Hoffmann, 1998; Olguin, 2003;
Borges et al, 2005.). Mereka dianggap
sebagai salah satu yang paling efisien,
ramah lingkungan, relatif perawatan murah
dan sederhana dibandingkan dengan
perlakuan fisik dan kimia lainnya.
Nannochloropsis sp. adalah sumber
makanan penting dan bahan baku untuk
formulasi pakan dalam akuakultur, terutama
untuk live-makanan organisme seperti
rotifera dan copepoda (Suchar dan Chigbu,
2006; Milione dan Zeng, 2007). Hal ini
umumnya dibudidayakan untuk
menciptakan'' hijau'' efek air dalam tangki
larva ikan. Nilai gizi Nannochloropsis sp.
membuatnya baik dihargai dalam akuakultur
(Lubian et al, 2000;. Krienitz dan Wirth,
2006).
Nannochloropsis sp. merupakan
sumber potensial dari EPA karena kadar
tinggi asam eicosapentaenoic (EPA, C20:
5N3) (Sukenik, 1991, Volkman et al, 1993;
Krienitz dan Wirth, 2006.). Selain itu,
Nannochloropsis sp. diakui sebagai sumber
berharga komersial-pigmen. Bunga terkait
dengan ketersediaan dari berbagai pigmen
seperti zeaxanthin, dan astaxanthin
canthaxanthin, masing-masing dengan
tingkat produksi yang tinggi (Lubian et al.,
2000).
Interaksi sumber nitrogen pada asimilasi
nitrogen oleh mikroalga bervariasi antara
spesies dan sangat dipengaruhi oleh kondisi
lingkungan (Thacker dan Syrett, 1972;
Admiraal et al, 1987;. Lund, 1987; Dortch,
1990, Harrison et al, 1990.; Flynn et al,
1997;. Yin et al, 1998;. Page et al, 1999;.
Soletto et al, 2005;. Converti et al, 2006).
Dalam rangka menerapkan
Nannochloropsis. sp untuk menghilangkan
nitrogen dalam akuakultur air, pemahaman
terhadap pertumbuhan dan serapan nitrogen
oleh mikroalga yang sangat penting.
Penyerapan amonia dan nitrat oleh
Nannochloropsis sp. dinilai karena amonia
merupakan racun bagi organisme akuatik
yang paling dan nitrat merupakan produk
akhir dari nitrifikasi. Juga, interaksi antara
amonia dan nitrat pada serapan nitrogen oleh
Nannochloropsis sp. ditentukan. Budidaya
Nannochloropsis sp. pada perikanan
budidaya air menawarkan keuntungan
gabungan menghilangkan nutrisi dan, pada
saat yang sama, menghasilkan biomassa
yang dapat lebih dimanfaatkan sebagai
pakan hidup dan sumber biokimia yang
berharga sebagai bahan baku.
Bahan dan metode
Nannochloropsis sp. diperoleh dari
budaya saham mikroalga laut di Universiti
Malaysia Terengganu, Malaysia. Alam-
disaring (Whatman Protran nitroselulosa
membran filter, ukuran pori 0,45 pM) dan
dipasteurisasi (95 C selama satu jam) air
laut diperkaya dengan Guillard f / 2 media
(Smith et al., 1993) digunakan untuk kultur
saham. Nannochloropsis sp. yang
dibudidayakan di 2 labu Erlenmeyer L
dengan pencahayaan terus menerus di
bawah intensitas cahaya konstan 100 umol
m-2 s-1 dari dingin-putih lampu neon.
Kultur dilanjutkan di bawah lingkungan
konstan pada parameter 28 C, salinitas 30
ppt, dan pH 8.
Sebuah alikuot dari eksponensial-
tumbuh Nannochloropsis sp. Kultur dipanen
dengan sentrifugasi pada 3000 rpm selama
15 menit. Sel kepadatan ditentukan dengan
spektrofotometer (UV-160, Shimadzu) pada
600 nm. Sel-sel dicuci dua kali dengan air
laut dipasteurisasi dan re-tersuspensi dalam
air laut dipasteurisasi. Sebuah volume
dipilih dari Nannochloropsis sp.
terkonsentrasi. suspensi sel dicampur
dengan media f / 2 dengan sumber nitrogen
yang berbeda. Perlakuan yang diterapkan
sebagai amonia (900 pM dari NH4 +-N),
nitrat (900 pM dari NO3 - N), dan amonia
ditambah nitrat (900 mM dari NH4 +-N dan
900 pM dari NO3 - N). Sodium nitrat,
NaNO3, digunakan dalam f / 2 media
digantikan oleh amonium klorida, NH4Cl
sebagai sumber nitrogen untuk mikroalga.
Percobaan dilakukan di triplicates dalam
kondisi budaya standar dengan kepadatan
sel awal 1 106 sel x / ml. F / 2 media
Guillard dengan sumber nitrogen yang
berbeda tapi tanpa inokulasi sel digunakan
sebagai kontrol.
Pada setiap kali sampling, 40 ml
sampel air diambil untuk analisis. Kepadatan
sel ditentukan secara spektrofotometri pada
600 nm. Sampel air kemudian disentrifugasi
pada 3000 rpm selama 15 menit dan
supernatan yang jelas digunakan untuk
menentukan konsentrasi nitrogen. Penentuan
amonia dalam sampel air dilakukan
mengikuti Parsons et al. (1984). Secara
singkat, sampel air di triplicates dirawat di
media sitrat alkali dengan sodium hipoklorit
dan fenol dengan adanya nitroprusside
natrium dan diukur secara spektrofotometri
pada 640 nm.
Metode yang dijelaskan oleh Collos
et al. (1999) digunakan untuk pengukuran
cepat konsentrasi mikromolar nitrat.
Absorbansi sampel air diukur pada 220 nm
dalam cuvette cm 1 kuarsa dengan
menggunakan spektrofotometer (UV-160,
Shimadzu). Nilai pH tercatat dengan pH
meter (WTW SERIES) dan dipertahankan
pada pH 8 - pH 10 dengan 0,01 M HCl
disterilkan.
Laju pertumbuhan Nannochloropsis sp, (sel
/ ml / hari) dihitung dengan persamaan:

Mana Cx (sel ml-1) adalah densitas sel yang
diperoleh pada saat tx (hari) dan C0 (sel ml-
1) adalah densitas inokulum.
Serapan tingkat nitrogen, PBB (pM N / sel /
hari) dalam bentuk amonia atau nitrat
dihitung dengan persamaan:

mana N0 (pM N / sel) adalah konsentrasi
nitrogen awal dan Nx (pM N sel-1) adalah
konsentrasi nitrogen yang tersisa pada saat
tx (jam).
Sebuah ANOVA satu arah
digunakan untuk membandingkan jumlah
maksimum sel yang diproduksi, tingkat
pertumbuhan, dan tingkat serapan antara
nitrat, amoniak amonia, nitrat dan ditambah
perawatan. Perbedaan yang signifikan jika p
<0,05 dan dilanjutkan dengan uji Tukey
suatu 'untuk memverifikasi perbedaan.
Hasil
Nannochloropsis sp. disukai amonia
daripada nitrat ketika kedua amonia dan
nitrat yang tersedia. Kehadiran amonia
menekan penyerapan nitrat oleh
Nannochloropsis sp. (Gambar 1). Nitrat
digunakan dalam ketiadaan amonia. Amonia
tingkat penyerapan secara signifikan lebih
tinggi dibandingkan nitrat (p = 0,004, Tabel
1). Pada akhir percobaan, 50% dari amonia
dan 33,24% nitrat telah dihapus dari media
tersebut. Amonia dan nitrat serapan yang
terbelakang ketika pertumbuhan
Nannochloropsis sp. mendekati fase diam.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa
ada perbedaan yang signifikan dalam tingkat
pertumbuhan mikroalga dibudidayakan
dengan menggunakan sumber nitrogen yang
berbeda (p <0.000, Tabel 1).
Nannochloropsis sp. tumbuh lebih cepat
daripada di dalam amonia nitrat (Gambar 2).
Rata-rata angka pertumbuhan
Nannochloropsis sp. dalam amonia dan
amonia + perawatan nitrat adalah 9,68
0,058 x 105 dan 9,92 0,222 x 105 sel ml-1
hari-1, masing-masing. Pertumbuhan
eksponensial berlangsung selama lima hari
dalam perawatan. Berarti tingkat
pertumbuhan Nannochloropsis sp. nitrat
adalah 8.19 0.640 x 105 sel ml-1 hari-1.
Pertumbuhan eksponensial berlangsung
selama delapan hari. Tidak ada perbedaan
yang signifikan dalam kepadatan sel
maksimum yang dihasilkan dalam budaya (p
= 0,224, Tabel 1).
Diskusi
Dalam studi ini, keberadaan amonia
secara langsung mengganggu penyerapan
nitrat oleh Nannochloropsis sp. Amonia
disukai mikroalga sebagai sumber nitrogen
nya. Penyerapan preferensial amonia dan
penindasan penyerapan nitrat oleh
ketersediaan amonia baik dipelajari (Syrett
dan Morris, 1963; Losada et al, 1970;.
Herrera et al, 1972;. Cresswell dan Syrett,
1979; Blasco dan Conway, 1982; Paasche
dan Kristiansen, 1982; Admiraal et al,
1987;. Parker, 1993; Flynn et al, 1997;.
Flynn, 1999; Maguer et al, 2007)..
Penghambatan penyerapan nitrat mungkin
karena inaktivasi sistem nitrat reduktase
oleh amonia (Losada et al, 1970;. Herrera et
al, 1972;.. Serra et al, 1978) atau dengan
produk sampingan asimilasi amonia (Syrett
dan Morris, 1963; Thacker dan Syrett, 1972;
Cresswell dan Syrett, 1979). Amonia tidak
memerlukan pengurangan enzimatik untuk
asimilasi, tetapi nitrat harus direduksi
menjadi amonia sebelum dapat diasimilasi
oleh mikroalga. Pengurangan nitrat menjadi
amonia melibatkan dua langkah enzimatik
independen. Pertama, pengurangan nitrat
menjadi nitrit dikatalisis oleh NADH2-nitrat
reduktase, dan kedua, pengurangan nitrit
menjadi amonia katalis oleh reduktase
ferredoxin-nitrit. Ada kebutuhan energi yang
cukup untuk pemanfaatan nitrat karena
jumlah elektron yang dibutuhkan untuk
mengurangi nitrat menjadi amonia (Losada
et al, 1970; Serra et al, 1978).

Gambar 1. Amonia dan nitrat serapan (garis
utuh) oleh Nannochloropsis sp. diinokulasi
dengan 1 x 106 sel ml-1 di f / 2 media
diperkaya dengan 900 mM NO3 - N, 900
mM NH4 +-N, dan 900 pM NH4 +-N + 900
mM NO3 - N. Control (garis dasbor) adalah
media tanpa inokulasi mikroalga. Spidol
adalah sarana dan bar vertikal menunjukkan
standar deviasi dengan n = 3.
Amonia dan nitrat mengerahkan efek
yang berbeda pada kepindahan mereka serta
terhadap pertumbuhan biomassa. Hasil
penelitian menunjukkan bahwa tingkat
penyerapan amonia lebih tinggi
dibandingkan nitrat. Demikian pula,
Cochlan dan Harrison (1991) melaporkan
bahwa maksimum amonia serapan spesifik
oleh picoflagellate eukariotik, Micromonas
pusilla, adalah dua kali lebih tinggi
dibandingkan nitrat atau urea. Juga, amonia
serapan tingkat dinoflagellata, Alexandrium
minutum, adalah secara konsisten lebih
tinggi dibandingkan nitrat pada setiap
konsentrasi substrat dan tingkat kekurangan
nitrogen dari sel-sel (Maguer et al., 2007).
Dalam studi ini, Nannochloropsis sp.
mampu menghasilkan kepadatan sel yang
sama yang tumbuh pada kedua amonia dan
nitrat. Namun demikian, saat itu tumbuh
pada amonia, densitas sel yang tinggi
tercapai lebih cepat, mungkin karena
semakin tinggi

Tabel 1. Ringkasan hasil dan satu-way
ANOVA budidaya batch Nannochloropsis
sp. diinokulasi dengan 1 x 106 sel ml-1 di f /
2 media diperkaya dengan spesies nitrogen
yang berbeda sebagai sumber nitrogen: 900
mM NO3 - N, 900 mM NH4 +-N, dan 900
mM NH4 +-N + 900 mM NO3 - N. Data
berarti standar deviasi n = 3 inkubasi.



Gambar 2. Sel pertumbuhan
Nannochloropsis sp. diinokulasi dengan 1 x
106 sel ml-1 di f / 2 media diperkaya dengan
900 mM NO3 - N, 900 mM NH4 +-N, dan
900 pM NH4 +-N + 900 mM NO3 - N.
Spidol adalah sarana dan bar vertikal
menunjukkan standar deviasi dengan n = 3.
Laju pertumbuhan. Namun,
Nannochloropsis sp. bisa mempertahankan
populasi kepadatan sel tinggi untuk durasi
yang lebih lama di bawah nitrat. Rckert dan
Giani (2004) menunjukkan bahwa viridis,
cyanobacteria Microcystis, tumbuh lebih
cepat dibandingkan dengan amonia nitrat.
Mereka menganggap pola ini ke tingkat
yang lebih tinggi asimilasi amonia
dibandingkan nitrat. Sebaliknya, tidak ada
pengaruh yang signifikan dari sumber
nitrogen pada laju pertumbuhan mikroalga
laut, Isochrysis Galbana, dan diatom laut,
Phaeodactylum tricornutum dan
Chaetoceros muelleri (Fidalgo et al, 1998;.
Liang et al, 2006).
Penyerapan preferensial amonia oleh
Nannochloropsis sp. adalah
menguntungkan. Amonia nitrogen-total,
terdiri dari un-terionisasi amonia (NH3) dan
amonia terionisasi (NH4 +), adalah senyawa
nitrogen prinsip dalam budidaya air. Amonia
un-terionisasi sangat beracun untuk ikan
yang paling. Oleh karena itu, penghapusan
amonia merupakan perhatian utama dalam
kegiatan budidaya. Di sisi lain, nitrat,
produk akhir dari nitrifikasi, relatif tidak
beracun kecuali pada konsentrasi yang
sangat tinggi. Konsentrasi Nitrat juga harus
dikurangi ke tingkat keamanan sebelum
budidaya air dibuang. Nannochloropsis sp
saat. digunakan untuk menghilangkan
nitrogen dalam akuakultur air, mikroalga
pertama akan memecahkan masalah
toksisitas amonia untuk ikan. Setelah
amonia telah dihapus atau turun ke tingkat
yang aman, nitrat dapat dihapus oleh
mikroalga.
Kesimpulan
Nannochloropsis sp. disukai amonia
sebagai sumber nitrogen nya. Namun, nitrat
akan dimanfaatkan tanpa adanya amonia.
Serapan tingkat amonia lebih tinggi
dibandingkan nitrat. Nannochloropsis sp.
mampu menghasilkan kepadatan sel yang
sama yang tumbuh pada kedua amonia dan
nitrat. Mikroalga yang tumbuh lebih cepat
daripada di amonia nitrat, mungkin karena
tingkat penyerapan yang lebih tinggi. Hasil
penelitian menunjukkan bahwa
Nannochloropsis sp. dapat menjadi
pengobatan biologis potensial untuk
budidaya air. Penyerapan preferensial
amonia oleh Nannochloropsis sp.
memecahkan masalah toksisitas amonia
dalam sistem budaya. Mikroalga akan
menggunakan nitrat dari air budidaya dan
membawanya ke tingkat yang aman sebelum
dibuang.
Ucapan Terima Kasih
Penulis ingin mengucapkan terima kasih
kepada Departemen Sains, Teknologi dan
Inovasi (MOSTI) untuk mendanai penelitian
ini melalui e-ilmu Proyek, 05-01-12-
SF0001.
References

Abe, K., Imamaki, A., Hirano, M. (2002).
Removal of nitrate, nitrite, ammonium
and phosphate ions from water by the
aerial microalga Trentepholia aurea. J.
Appl. Phycol. 14: 129 134.
Abraham, T. J., Ghosh, S., Nagesh, T. S.,
Sasmal, D. (2004). Distribution of
bacteria involved in nitrogen and
sulphur cycles in shrimp culture
systems of West Bengal, India.
Aquaculture 239: 275 288.
Admiraal, W., Riaux-Gobin, C., Laane, R.
W. P. M. (1987). Interactions of
ammonium, nitrate, and D- and L-
amino acids in the nitrogen assimilation
of two species of estuarine benthic
diatoms. Mar .Ecol. Prog. Ser. 40: 267
273.
Ahmed, F., Segawa, S., Yokota, M.,
Watanabe, S. (2008). Effect of light on
oxygen consumption and ammonia
excretion in Haliotis discus discus, H.
gigantea, H. madaka and their hybrids.
Aquaculture 279: 160 165.
Allison, S. M., Prosser, J. I. (1991). Urease
activity in neutrophilic autotrophic
ammonia-oxidizing bacteria isolated
from acid soils. Soil Biol. Biochem. 23:
45 51.
Blasco, D., Conway, H. L. (1982). Effect of
ammonium on the regulation of nitrate
assimilation in natural phytoplankton
populations. J. Exp. Mar. Biol. Ecol.
61: 157 158.
Borges, M. T., Silva, P., Moreira, L., Soares,
R. (2005). Integration of consumer-
targeted microalgal production with
marine fish effluent biofiltration a
strategy for mariculture
sustainability. J. Appl. Phycol. 17:
187 197.
Cochlan, W. P., Harrison, P. J. (1991).
Kinetics of nitrogen (nitrate,
ammonium and urea) uptake by the
picoflagellate Micromonas pusilla
(Prasinophyceae). J. Exp. Mar. Biol.
Ecol. 153: 129 141.
Collos, Y., Mornet, F., Sciandra, A., Waser,
N., Larson, A., Harrison, P. J.
(1999). An optical method for rapid
measurement of micromolar
concentrations of nitrate in marine
phytoplanlton cultures. J. Appl.
Phycol. 11: 179 184.
Merino, G. E., Piedrahita, R. H., Conklin, D.
E. (2007). Ammonia and urea excretion
rates of California halibut (Paralichthys
californicus, Ayres) under farm-like
conditions. Aquaculture 271: 227 243.
Milione, M., Zeng, C. S. (2007). The effects
of algal diets on population growth and
egg hatching success of the tropical
calanoid copepod, Acartia sinjiensis.
Aquaculture 273: 656 664.
Morii, H., Nishikata, K., Tamura, O. (1978).
Nitrogen excretion of mudskipper fish
Periophthalmus cantonensis and
Boleophthalmus pectinirostris in water
and on land. Comp. Biochem. Physiol. A
60: 189 193.
Nielsen, S. N., Anastacio, P. M., Frias, A.
F., Marques, A. F. J. C. (1999). CRISP-
crayfish rice integrated system of
production. 5. Simulation of nitrogen
dynamics. Ecol. Modell. 123: 41 52.
Olguin, E. J. (2003). Phycoremediation: key
issues for cost-effective nutrient removal
processes. Biotechnol. Adv. 22: 81 91.
Paasche, E., Kristiansen, S. (1982). Nitrogen
nutrition of the phytoplankton in the
Oslofjord. Estuar. Coast. Shelf. Sci. 14:
237 249.
Page, S., Hipkin, C. R., Flynn, K. J. (1999).
Interactions between nitrate and
ammonium in Emiliania huxleyi. J. Exp.
Mar. Biol. Ecol. 236: 307 319.
Parker, R. A. (1993). Dynamic models for
ammonium inhibition of nitrate uptake
by phytoplankton. Ecol. Modell. 66: 113
120.
Parsons, T. R., Maita, Y., Lalli, C. M.
(1984). A manual of chemical and
biological methods for seawater
analysis. Pergamon Press, Oxford.
173pp.
Perera, E., Fraga, I., Carrillo, O., Diaz-
Iglesias, E., Cruz, R., Baez, M., Galich,
G. S. (2005). Evaluation of practical
diets for the Caribbean spiny lobster
Panulirus argus (Latreille, 1804): effects
of protein sources on substrate
metabolism and digestive proteases.
Aquaculture 244: 251 262.
Peuhkuri, T. (2002). Knowledge and
interpretation in environmental conflict:
Fish farming and eutrophication in the
Archipelago Sea, SW Finland.
Landscape Urban Plann. 61: 157 168.
Pillay, T. V. R. (1990). Aquaculture:
Principles and Practices. Fishing New
Books, Englands. Pp. 106 120.
Queguiner, B., Hafsaoui, M., Treguer, P.
(1986). Simultaneous uptake of
ammonium and nitrate by phytoplankton
in coastal ecosystems. Estuar. Coast.
Shelf. Sci. 23: 75 l 757.
Rafiee, G., Saad, C. R. (2005). Nutrient
cycle and sludge production during
different stages of red tilapia
(Oreochromis sp.) growth in a
recirculating aquaculture system.
Aquaculture 244: 109 118.
Ruckert, G. V., Giani, A. (2004). Effect of
nitrate and ammonium on the growth
and protein concentration of
Microcystis viridis Lemmermann
(Cyanobacteria). Revista Brasil Bot.
27: 325 331.
Serra, J. L., Llama, M. J., Cadenas, E.
(1978). Characterization of the
nitrate reductase activity in the
diatom Skeletonema costatum. Plant
Sci. Lett. 13: 41 48.
Smith, L. L., Fox, J. M., Granvil, D. R.
(1993). Intensive algae culture
techniques, in: McVey, J.P., (Eds.),
CRC Handbook of mariculture.
Volume 1. Crustacean Aquaculture,
2nd ed. CRC Press, Inc., Boca
Raton, Florida, USA, pp. 3 13.
Soletto, D., Binaghi, L., Lodi, A., Carvalho,
J. C. M., Converti, A. (2005). Batch
and fed-batch cultivations of
Spirulina platensis using ammonium
sulphate and urea as nitrogen
sources. Aquaculture 243: 217 224.
Suchar, V. A., Chigbu, P. (2006). The
effects of algae species and densities
on the population growth of the
marine rotifer, Colurella dicentra. J.
Exp. Mar. Biol. Ecol. 337: 96 102.
Sukenik, A. (1991). Ecophysiological
Considerations in the Optimization
of Eicosapentaenoic Acid Production
by Nannochloropsis sp. (Eustigmato-
phyceae) Bioresour. Technol. 35:
263 269.
Syrett, P. J., Morris, I. (1963). The inhibition
of nitrate assimilation by ammonium
in Chlorella. Biochim. Biophys. Acta
67: 566 575.
Thacker, A., Syrett, P. J. (1972). The
assimilation of nitrate and
ammonium by Chlamydomonas
reinhardi. New Phytol. 71: 423
433.
Tng, Y. Y. M., Wee, N. L. J., Ip, Y. K.,
Chew, S. F. (2008). Postprandial
nitrogen metabolism and excretion in
juvenile marble goby, Oxyeleotris
marmorata (Bleeker, 1852).
Aquaculture 284: 260 267.
Tovar, A., Moreno, C., Manuel-Vez, M. P.,
Garcia-Vargas, M. (2000a).
Environmental impacts of intensive
aquaculture in marine waters. Water
Res. 34: 334 342.
Tovar, A., Moreno, C., Manuel-Vez, M. P.,
Garcia-Vargas, M. (2000b).
Environmental implications of intensive
marine aquaculture in earthen ponds.
Mar. Pollut. Bull. 40: 981 988.
Volkman, J. K., Brown, M. R., Dunstan, G.
A., Jeffrey, S. W. (1993). The
Biochemical composi-tion of marine
microalgae from the class
eustigmatophyceae. J. Phycol. 29: 69
78.
Wright, P. A., Land, M. D. (1998). Urea
production and transport in teleost
fishes. Comp. Biochem. Physiol. A 119:
47 54.
Yin, K., Harrison, P. J., Dortch, Q. (1998).
Lack of ammonium inhibition of nitrate
uptake for a diatom grown under low
light conditions. J. Exp. Mar. Biol. Ecol.
228: 151 165.