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PRÁCTICA No.2“DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE CREATININA EN SUERO”INTRODUCCIÓN
La creatinina es el producto de degradación de la creatina. La creatina es un derivado de los aminoácidosarginina, glicina y metionina, el cuerpo la fabrica básicamente enel hígado, los riñones y el páncreas, y tambiénpuede obtenerse a través de una dieta rica en carne o pescado (podemos encontrar unos 5 gr., de creatina por cada kilo de carne). Se acumula básicamente en los músculos esqueléticos (aproximadamente un 98 %)enforma de creatina libre unida a una molécula de fosfato (PCr o fosfocreatina). La PCr sirve como fuenteinmediata de energía para la contracción muscular para lo que se degrada produciendo creatinina. Esta esllevada a la sangre a través riñones los cuales la filtran del cuerpo en la orina (puede también ser medida en laorina).
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Creatina y creatinina
La creatina es una sustancia elaborada por el organismo que se encuentra en cada célulahumana y tiene la función de almacenar energía. Sólo con la ayuda de la creatina es posibleel rendimiento físico y mental.La creatina es elaborada en nuestro organismo a partir de los aminoácidos glicina, arginina y metionina,principalmente en el hígado, los riñones y el páncreas. De allí es transportada en el torrente sanguíneo a todaslas células del cuerpo. Ya que la creatina participa en todos los procesos que requieren energía, las célulasmusculares, cerebrales y nerviosas contienen mucha creatina.La creatina almacenada en una personaque pesa 70 kg es aproximadamente 120g.La mayor parte de la creatina (aprox. el 95%) está almacenada en la musculaturaporque la creatinadesempeña un papelesencial en la contracción muscular. Laincorporación de la creatina a la célulamuscular desde la sangre tiene lugaratravés de un transportador de creatinasituado en la membranacelular impulsadopor el sodio.Alrededor del 60–70 % de toda la creatinamuscular se encuentra almacenada enforma de la moléculafosfocreatina, rica enenergía. Los 30–40 % restantes seencuentran libres. Aparte del adenosíntrifosfato (ATP), la creatina es la fuenteenergética más importante del cuerpo.Todas las células del organismo puedenutilizar solamente al adenosín trifosfato(ATP) como sustanciasuministradora deenergía, pero debido a que el cuerpo sólopuede almacenar cierta cantidad de ATPenun momento dado, el ATP debe ser elaborado y suministrado continuamentepor el metabolismo.ElATP se elabora a partir de grasas ycarbohidratos, los suministradores deenergía a largo plazo.Cuando la célula consume energía, el ATP“alto en energía” es convertido al adenosín difosfato (ADP)“bajo en energía”. Como un acumulador, la creatina(en forma de fosfocreatina) recarga el ADP bajo enenergía al ATP alto en energía hasta que el ATP vuelve aestar disponible a partir de la conversión degrasas y carbohidratos.
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Los músculos contienen de 3 a 4 veces más fosfocreatina que ATP y por ello esta sustancia almacenaenergía acorto plazo, especialmente cuando el consumo de ATP es mayor que susíntesis a partir de loscarbohidratos ylas grasas. La concentración de fosfocreatina y la regeneración del ATP son factoresdecisivos en ejercicioscontinuos que requieren un gran esfuerzo. El aumento en la concentración decreatina y fosfocreatina acelera laregeneración del ATP, lo que conduce directamente a que se libere yponga a disposición aún más energía.
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FISIOLOGÍA
La creatinina, aminoácido de origen no proteínico, es un ingrediente del tejido muscular que se forma por laacción de la creatinfosfocinasa (CPK) cuando se requiere energía para procesos metabólicos.Cuando se consume energía, forma el metabolito inactivo creatina, que pasa del músculo a la circulación a uníndice constante. En los varones se producen en cantidades más grandes que en las mujeres debido a su masamuscular mayor.El glomérulo renal filtra al creatinina y los túbulos no lo reabsorben, por lo cual, el índice de excreción en la orinaes también constante. Al parecer, las concentraciones sanguíneas fluctúan incluso menosque los valoresurinarios, tal vez por la capacidad de los túbulos para secretar creatinina en presencia de concentracionesaumentadas en el suero. La creatinina es excretada sin cambio en la orina debido a que se modifica pocodurante su paso a través dela neurona. Los riñones al excretan con mayor facilidad que al urea o el ácidoúrico.
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Análisis de creatinina
La creatinina es una molécula de deshecho que se genera a partir del metabolismo muscular. La creatininaproviene de la creatina, una moléculamuy importante para la producción de energía muscular.Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se convierte en creatinina cada día. La creatinina setransporta desde los músculos por medio de la sangre hacia el riñón. Los riñones filtran la mayoría de lacreatinina y la eliminan en la orina.Aunque es una sustancia de deshecho, la creatinina es una prueba diagnóstica esencial, ya que se haobservado que su concentración en sangre indica con bastante fiabilidad el estado de la función renal. Si losriñones no funcionan bien, no eliminan bien la creatinina y por lo tanto ésta se acumula en la sangre. Por esto lacreatinina puede avisar de una posible disfunción o insuficiencia renal, incluso antes de que se presentensíntomas. Por eso la creatinina suele figurar en los análisis de sangre que se realizan comúnmente.La cantidad de creatinina que aparece en la sangre de un individuo depende de su masa muscular, por tanto,esta concentración será constante para cada individuo si no varía su masa muscular.Los valores de referencia son:
Neonatos
0.3 –1.2 mg/dl
Infantes
0.2 –0.4 mg/dl
Niños
0.3 –0.7 mg/dl
Adolescentes
0.5 –1 mg/dl
Mujeres adultas
0.5 –1.1 mg/dl
Varones adultos
0.6 –1.2 mg/dl
La razón de la elevación de la Creatinina sérica en neonatoses que esta refleja,en los primeros días de vida, el valor materno y es proporcionalmente elevadapara la masamuscular del neonato. Esta cifra desciende progresivamente
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hastavalores estables al cabo de dos o tres semanas.Algunos fármacos pueden producir una elevación anormal de las concentraciones de creatinina en sangre. Unaconcentración muy elevada de creatinina en la sangre puede indicar la necesidad de someterse a diálisis paraeliminar las sustancias de deshecho de la sangre.
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Métodos de análisis:
Reacción de Jaffe modificada (picrato en medio alcalino cinético)
Enzimático colorimétrico (creatininasa-peroxidasa)
Enzimático UV (creatininasa GLDH).
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Significado clínico
La creatinina es la menos variable de las sustancias nitrogenadas no proteínicas (NNP) en el suero y es unindicador sensible de la función renal. Es un producto del metabolismo muscular, que pasa a la sangre y esexcretado en la orina virtualmente a un índice constante. Por tanto, su concentración en suero es tambiénconstante en la persona sana. De todas las sustancias NNP, sólo la creatina precursor de la creatina es usadapor el cuerpo. Se almacena para proporcionar el desgaste muscular.Con propósitos de diagnóstico, la creatinina se correlaciona con los cambio del nitrógeno de urea sérico (NUS),pero es más exacta como una indicación del índice de filtración glómerular (IFG) debido a que se produce encantidades relacionadas con al amasa muscular, que cambia muy poco, en tanto en que los valores NUS seelevan en respuesta a varios factores. Por ello se usan como indicador cuando hay disfunción renal o enaquellos casos en que incierta la causa de un valor elevado.La creatinina es el resultado de la degradación de la creatina, componente de los músculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energía para las células. La producción de creatinina depende de lamodificación de la masa muscular. Varía poco y los niveles suelen ser muy estables. Se elimina a través delriñón. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico.La creatinina es un compuesto relativamente inestable, especialmente en la orina, por lo que en el laboratorio sepreviene la degradación congelando suero separado o la orina. El uso clínico de la medición de creatinina séricahaaumentado con al introducción de equipos automáticos de análisis rápido.El dosaje de creatinina es un indicador útil para evaluar la función glómerular renal, teniendo en cuentaelprerrequisito que la producción de creatinina y su excreción sean iguales. Esto se cumple enindividuos sanoscon dieta normal. Las variaciones intraindividuales en estas condiciones son mínimasmientras que lasinteridividuales son muy fluctuantes debido a:
Diferencia en la masa muscular y por tanto de producción de creatinina en distintosindividuos.
Diferencia en la ingesta de carne. Un kg. de carne contiene 2-5 g. de creatina que se convierteen creatininaen el proceso de cocción. 15-30 % de la creatinina excretada diariamente es deorigen alimentario.La creatinina en suero no es un buen indicador de la tasa de filtración glómerular (enlace conclearance)solamente cuando ésta ha disminuido a valores de 60-40 mL/min/1.73 m
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su valor seencuentra aumentado.
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Patologías
La Creatinina sufre filtración glomerular pero no se reabsorbe y su secrecióntubular es mínima.La razón másimportante del aumento de este metabolito en sangre es la malafiltración glomerular. Esto se puede valorar rápidamente con la determinaciónde creatinina en sangre cuando esta presente en valores por encima de losnormales y combinando posteriormente estos resultados con los niveles enorina (Aclaramiento de creatinina)El aumento de los niveles en sangre también podría indicar un gran recambiomuscular patológico porque elmúsculo se esta “rompiendo”, o bien fisiológicosi el individuo presenta una gran masa muscular (deportistas por ejemplo).Una de las aplicaciones clínicas de emergencia más importantes de ladeterminación de creatinina en sangre esla detección de la INSUFICIENCIARENAL AGUDA que es la disminución rápida en horas o días de la funciónrenal con caída de la filtración glomerular y en algunos casos disminución en laproducción de orinaacompañada de retenciones nitrogenadas y alteracioneshidroeléctricas y acido básicas.Durante el curso de esta enfermedad los valores de creatinina sufren un granaumento en un periodo cortomostrando valores que superan los 1.5 mg/dl.Se clasifica en• Insuficiencia renal aguda Prerenal• Insuficiencia renal aguda intrínseca• Insuficiencia renal aguda Postrenal.
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2.- Determinacion Cuantitativa de Creatinina en Suero
En 1886 Jaffe describió un método para la determinación de creatinina que comprendía un filtrado libre de proteínas y una reacción con ácido pícrico en solución alcalina. Aunque se han descrito bastantes métodos desde entonces, la…
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