Universidad de San Carlos de Guatemala

Facultad de Ciencias Qumicas y Farmacia

Escuela de Qumica
Departamento de Qumica Organica
Rony J. Letona
200960024
Informe Final Qumica de Productos Naturales
Extracci on de actinidina
de races de valeriana (Valeriana prionophylla)
La valeriana ha sido una especie de planta estudiada ampliamente por su actividad como sedante en
infusiones. En este estudio, se intento aislar la actinidina, un alcaloide presente en la especie Valeriena
ocinalis, de las races de Valeriana prionophylla. Para esto se utilizo la metodologa hallada por
Torsell & Wahlberg (1967). Se hallo algunas diferencias entre los resultados reportados para cada
etapa de la extraccion y los obtenidos con esta especie de valeriana. No se llego a aislar la actinidina
al nal, pero s se logro identicar su presencia en el extracto de alcaloides obtenidos de las races.
Se recomienda, si se intenta este procedimiento, que se busque que las races esten en buen estado,
eliminar las resinas desde el principio y realizar las pruebas para alcaloides con mucha cautela en cada
etapa.
Introducci on
El estudio de productos naturales ha sido un campo
al que se la ha prestado mas atencion en recientes a nos.
Esto se ha debido principalmente a la nueva cultura
verde que esta buscando no consumir ni producir ma-
teriales de sntesis. Ademas de ello, se ha regresado a
los medicamentos provenientes de productos naturales,
porque aquellos de sntesis no han logrado el impacto
que se deseo en los ultimos 20 a nos.
En Guatemala, estos estudios han sido bastante
fructferos, puesto que Guatemala cuenta con una diver-
sidad de ora y fauna muy particular, teniendo muchas
especies que son endemicas. Aparte de esto, se ha no-
tado que en muchas comunidades del interior, se utiliza
remedios caseros como lo son infusiones, extractos y la
ingesta de partes de plantas. Los efectos son muchas
veces similares o hasta mejores que los de la medici-
na convencional, as que el estudio de estos remedios
tambien es recomendable ponerlo en practica (Caceres,
1996; Cruz, 2005).
La hierba Valeriana prionophylla, conocida vulgar-
mente como valeriana en Guatemala, ha presentado
caractersticas interesantes en estudios previos; se ha
analizado desde su contenido de metabolitos hasta su
actividad como sedante, hipnotico e inhibidor de la
acetilcolinesterasa. Esta planta tiene mas de 150 com-
puestos en su matriz al ser analizada, por lo que ha
sido objeto de estudio durante mucho tiempo. En par-
ticular, la especie Valeriana ocinalis (Caceres, 1996;
Holzmann et. al., 2011; Houghton, 1988).
En este estudio lo que se busco aislar uno de los
compuestos de Valeriana prionophylla y cuanticarlo.
El procedimiento utilizado fue el mismo que ha sido
utilizado para Valeriana ocinalis desde 1967, sin em-
bargo, se esperaban diferentes resultados debido al cam-
bio de la especie. Ademas de ello se busco documentar
todos los cambios observados a modo de enriquecer los
estudios sobre los metabolitos que esta puede contener
(Jir & Jir, 2010; Johnson & Waller, 1972; Torsell &
Wahlberg, 1967).
Metodologa
Se siguio el procedimiento descrito en Torsell &
Wahlberg (1967), sin embargo, se hicieron algunos
cambios en las cantidades. Se comenzo con 100g de
material vegetal molido y tamizado a modo de evitar
polvos nos. Este se dejo reposando en una mezcla de
cloroformo/metanol (2:1) por una semana. Luego se le
cambio el solvente por otra cantidad igual de la misma
mezcla y se dejo otra semana para continuar con la
maceracion. Posteriormente se ltro el material vegetal
y el lquido extrado se rotaevaporo a modo de obtener
un aceite: el extracto puro.
Se agrego a esto 20mL de metanol, 30mL de cloro-
formo y 150mL de eter dietlico. Se refrigero por 24h y
se decanto el solvente lquido. Se observo aqu que las re-
sinas y ceras haban formado un semisolido que oto so-
bre la supercie del extracto. Despues se agrego 20mL
de HCl al 1 % en 2 porciones de 10mL para ex-
traer los alcaloides totales. Durante este procedimiento,
se formo una fase emulsionada que despues se con-
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rmo eran resinas que no se habian logrado eliminar.
Se neutralizo con NaHCO
3
hasta tener un pH de 8 y
nalmente se realizo una extraccion con 200mL de una
mezcla de cloroformo/etanol (3:2) en 10 porciones de
20mL.
Para terminar se realizo una cromatografa en capa
na (TLC) y pruebas de Dragendor, Wagner y Meyer
para las diferentes etapas del procedimiento, a modo de
identicar la presencia de alcaloides. Como fase movil
de la TLC se utilizo una mecla de hexano/cloroformo
(9:1) y como fase estacionaria slica gel soportada sobre
una placa de aluminio.
Finalmente se reinicio el proceso entero, desde el
material vegetal pesando 265g de material molido y ta-
mizado. Se desengraso dejandose 2 semanas en hexano
y luego realizando una extraccion con hexano caliente
utilizando un aparato de Soxhlet. El hexano se torno de
un color amarillo oscuro conrmando la extraccion de
alg un componente de la raz. Luego se hizo lo mismo,
pero con cloroformo caliente, realizando extracciones
de 2 porciones de 50g. El cambio de color revelo que la
extraccion se haba llevado a cabo de manera similar a
la maceracion en fro.
El extracto se reconcentro mediante rotaevaporacion
y se extrajo con HCl al 5 %. De nuevo se observo que la
extraccion sucedio igual que con el otro procedimiento.
Se neutralizo y se llevo a un pH de 8 y de all se extrajo
nuevamente con cloroformo.
Se debio continuar con una cromatografa en capa
na para identicar los alcaloides, y entre ellos, el mas
abundante: la actinidina. Posteriormente, se debio rea-
lizar una cromatografa preparativa para aislar la ac-
tinidina y nalmente extraerla de la slica gel con sol-
ventes para terminar evaporando solventes y realizando
pruebas para alcaloides e identicacion estructural por
GC/MS. La razon por la que no se logro nalizar fue
por falta de tiempo.
Resultados
Tabla 1: Caractersticas del material vegetal al inicio.
Caracterstica Observaciones
Aspecto Races estriadas y enrolladas
en si mismas
Tama no Aproximadamente de 6cm cada una
en promedio
Dureza Un poco exibles, pero difciles
de moler
Color Cafe oscuro con manchas m as oscuras
en su supercie
Aroma Penentrante a valeriana
Tabla 2: Pruebas para alcaloides realizadas en diferentes
etapas de la extraccion.
Etapa Prueba Resultados
Polvos nos Dragendor Positivo
Primer extracto Wagner Positivo
Meyer Positivo
Dragendor Positivo
Fase acuosa Dragendor Negativo
TLC Dragendor Positivo
Tabla 3: Coecientes de retencion de la TLC.
R
f
Radio Revelado Revelado
(mm) UV Dragendor
0,24 2,0 + +
0,08 1,5 + -
0,05 1,0 + +
Discusi on
Desde el comienzo, se noto que las races de valeria-
na, que si bien estaban secas y eliminaban el paso de
secado en el procedimiento genral, no se haban secado
de manera correcta. Como se puede ver en la Tabla
1, la apariencia de las races era oscura y de aroma
penetrante. Esto revelo que en las races ya se haba
comenzado el proceso de descomposicion del acido va-
lerenico. Esto tambien representa la descomposicion de
la actinidina y su perdida como parte del aroma (AHP,
1999).
Durante el desarrollo se realizo pruebas de Meyer,
Wagner y (principalmente) Dragendor. Al principio,
en la etapa de molido y tamizado, se realizo una prueba
de Dragendor de los polvos nos. Esta, como se puede
ver en la Tabla 2, dio positivo conrmando la presen-
cia de alcaloides. Con este resultado se procedio a la
maceraci n en fro de la cual tambien se realizo pruebas.
Las pruebas de Meyer, Wagner y Dragendor dieron
resultados positivos, conrmando que de la maceracion
se haba logrado extraer los alcaloides. Posteriormente,
se seiguio con el procedimiento planteado hasta llegar
a la extraccion en acido.
La extraccion con acido dio una fase emulsionada
entre la fase acuosa y organica. Al aislarla y eliminar los
solventes organicos, se noto que el agente responsable
de la emulsion eran ceras y resinas. El agua se pudo
aislar pudiendo agregarla al resto del extracto acido
y continuar, pero no se descarta la posibilidad de que
parte de los alcaloides se hayan perdido al quedar estos
atrapados en la resina.
En esta etapa, al realizarle la prueba de Dragendor
a la fase acida, esta dio negativo. Esto llevo a la creen-
cia de que los alcaloides se hallaban todava en la fase
eterea. Sin embargo, considerando las condiciones de
la prueba de Dragendor y que por eso no se le puede
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realizar a la fase organica, se continuo con el procedi-
miento. Se volvio a tener evidencias de los alcaloides
hasta la cromatografa.
Al realizar la cromatografa de capa na (TLC), se
hallo que haba varios compuestos que se revelaban con
lus UV. Y al revelar con la prueba de Dragendor, se
evidencio al principio que la primera mancha daba posi-
tivo (ver Tabla 3). Sin embargo, despues de unas horas,
la primera mancha (la mas grande) se revelo de un color
oscuro. Esto despues se concluyo era un alcaoide, y por
su proporcion con respecto a los demas ademas de su
alta anidad por el solvente, se armo que era actinidi-
na (Johnson & Waller, 1972; Torsell & Wahlberg, 1967).
De la segunda vez que se intento repetir el procedi-
miento, solo se pudo notar como las ceras y las resinas
se haban logrado eliminar por medio de una extraccion
previa con hexano. Sin embargo, a pesar de que no se
logro realizar pruebas a tiempo, todas las caractersti-
cas y colores de los extractos fueron iguales a las de la
primera extracci on.
Quedo por realizarse una TLC al extracto de la se-
gunda metodologa y una cromatografa preparativa en
ambos casos para aislar la actinidina. Finalmente de-
bio realizarse un analisis por cromatografa de gases
acoplada a espectrometra de masas (GC/MS) y, de ser
posible, una espectroscopa en infrarrojo (IR) para con-
rmar tanto la pureza como la identidad de la actinidina
por analisis estructural.
Conclusiones
La raz de Valeriana prionophylla que se halla a
la venta de manera comercial no es secada de ma-
nera adecuada para la extraccion de alcaloides.
La raz de Valeriana prionophylla contiene alca-
loides, aunque se desconoce la identidad de todos
y su proporcion.
La alta cantidad de ceras y resinas presentes en
las races de Valeriana prionophylla dicultan la
extraccion.
El metodo reportado para la extraccion de alcaloi-
des para Valeriana ocinalis no aplica del todo
para Valeriana prionophylla debido a su diferente
contenido de alcaloides, ceras y resinas.
Es posible remover las ceras y resinas de las races
de Valeriana prionophylla por medio de una ex-
traccion con hexano caliente.
La prueba de Dragendor revela la presencia de
alcaloides en el extracto de valeriana para los pri-
meros pasos de la extraccion, pero para los pasos
posteriores, se debe de esperar mas, puesto que
que los resultados de la prueba no son inmedia-
tos.
Recomendaciones
Buscar un distribuidor de valeriana que pueda
proporcionar las races sin secar para evitar un
mal secado de las mismas.
Comenzar con una cantidad mucho mayor de ma-
terial vegetal (1kg).
Desengrasar el material vegetal previo a realizar la
extraccion de alcaloides para evitar interferentes
y retrasos.
Intentar realizar la extraccion en caliente para a
modo de garantizar una mayor extraccion de los
alcaloides.
Al realizar la prueba de Dragendor, tener cuida-
do con los resultados; estos tardan en aparecer.
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