ESPECTROFOTOMETRA

CONCEPTOS
*TRANSMITANCIA
T = I/I
0
%T = (I/ I
0
)x100
*ABSORBANCIA
A = log I/I
0
= cl
I : intensidad de la radiacin transmitida
I
0
: intensidad de la radiacin incidente
c : concentracin molar de la sustancia absorbente
: coeficiente de extincin molar (M
-1
cm
-1
)
l : espesor de la sustancia atravesada
LEY DE LAMBERT-BEER
A = c l
A : Absorbancia
: coeficiente de extincin molar (M
-1
cm
-1
)
l : espesor de la sustancia atravesada
c : concentracin molar de la sustancia absorbente
La fraccin de luz incidente absorbida por una sustancia
absorbente es proporcional al nmero de molculas que
interaccionan con la radiacin en su recorrido.
MEDICIN DE LA
ABSORBANCIA
* Importancia del blanco.
A
disolucin
=A
soluto
+ A
disolvente
A
soluto
=A
disolucin
- A
disolvente
* En las mezclas:
A
total
=A
1
+ A
2
+ .+ A
n
* Limitaciones de la Ley de Beer.
NATURALEZA
EXPONENCIAL DE LA LEY
DE LAMBERT-BEER
La Transmitancia decrece
exponencialmente y la Absorbancia
aumenta linealmente a medida que se
incrementa la concentracin o el
camino ptico atravesado por la
radiacin.
SPECTRONIC 20
1 Encendido y ajuste
de la transmitancia
4 Ajuste del blanco
5 Escala de
absorbancia
y transmitancia
2 Selector de la
longitud de onda
3 Compartimento
para la muestra
Monocromador
Fuente de
radiacin
Cubeta con
muestra
Detector
Sistema de
lectura
ESPECTRO VISIBLE
Longitud de onda (nm)
IR UV
ESPECTROFOTMETROS
HITACHI U-2000 Y U-2001
Men principal. Opciones:
1.- PHOTOMETRY
2.- WL SCAN
3.- TIME SCAN
4.- MULTIPLE WL
5.- MULTIPLE COMPONENT
6.- TEST MENU
7.- OPTIONAL FUNCTIONS
8.- CALIBRATION
9.- REMOTE CONTROL
FOSFORIMAGER
(BAS-1500, FUJIFILM)
Equipo analizador de imgenes.
Consta de 3 componentes:
1.- pantallas (Imaging Plate, IP)
2.- lector
3.- borrador
PANTALLAS, IP
Tienen en su composicin una capa de cristales
de fsforo radiosensibles y fotoestimulables
unidos a una capa de poliester.
2 tipos: *para istopos de uso general
*especiales para
3
H
Las pantallas de uso general son reutilizables.
OBTENCIN DE UNA
IMAGEN
3 PROCESOS:
- EXPOSICIN
- LECTURA: LSER DE He/Ne
- BORRADO