Analisa Antara Tinjauan Teori Dengan Jurnal Cord Injury : Regenerative Medicine

For Treatment Of Spinal Cord Injury : More That Just Promises ?

Cidera medula spinalis adalah suatu kerusakan fungsi neurologis yang disebabkan oleh
benturan pada daerah medulla spinalis (Brunner & Suddarth, 2001)
Cidera medulla spinalis adalah buatan kerusakan tulang dan sumsum yang mengakibatkan
gangguan sistem persyarafan didalam tubuh manusia yang diklasifikasikan sebagai :
komplet (kehilangan sensasi dan fungsi motorik total)
tidak komplet (campuran kehilagan sensori dan fungsi motorik)
Didalam jurnal juga bahwa Cedera tulang belakang memicu serangkaian peristiwa komplek
yang mengakibatkan penyembuhan jaringan tanpa pemulihan fungsi normal jaringan karena
kapasitas regeneratif miskin dari sumsum tulang belakang.
Cidera medullan spinalis adalah suatu kerusakan fungsi neurologis yang disebabkan sering
kali oleh kecelakaan lalu lintas. Apabila cedera itu mengenai daerah servikal pada lengan,
badan dan tungkai mata penderita itu tidak tertolong. Dan apabila saraf frenitus itu terserang
maka dibutuhkan pernafasan buatan, sebelum alat pernafasan mekanik dapat digunakan.
Penyebab dari cidera medulla spinalis yaitu :
kecelakaan otomobil, industri
terjatuh, olah-raga, menyelam
luka tusuk, tembak
tumor.
PATOFISIOLOGI
Kerusakan medulla spinalis berkisar dari kamosio sementara (pasien sembuh sempurna)
sampai kontusio, laserasi dan kompresi substansi medulla, (lebih salah satu atau dalam
kombinasi) sampai transaksi lengkap medulla (membuat pasien paralisis).
Bila hemoragi terjadi pada daerah medulla spinalis, darah dapat merembes ke ekstradul
subdural atau daerah suaranoid pada kanal spinal, segera sebelum terjadi kontusio atau
robekan pada cedera, serabut-serabut saraf mulai membengkak dan hancur. Sirkulasi darah ke
medulla spinalis menjadi terganggu, tidak hanya ini saja tetapi proses patogenik
menyebabkan kerusakan yang terjadi pada cidera medulla spinalis akut. Suatu rantai sekunder
kejadian-kejadian yang menimbulakn iskemia, hipoksia, edema, lesi, hemorargi.
Cidera medulla spinalis dapat terjadi pada lumbal 1-5
Lesi 11 15 : kehilangan sensorik yaitu sama menyebar sampai lipat paha dan
bagian dari bokong.
Lesi L2 : ekstremitas bagian bawah kecuali 1/3 atas dari anterior paha.
Lesi L3 : Ekstremitas bagian bawah.
Lesi L4 : Ekstremitas bagian bawah kecuali anterior paha.
Lesi L5 : Bagian luar kaki dan pergelangan kaki.
MANIFESTASI KLINIS
nyeri akut pada belakang leher, yang menyebar sepanjang saraf yang terkena
paraplegia
tingkat neurologik
paralisis sensorik motorik total
kehilangan kontrol kandung kemih (refensi urine, distensi kandung kemih)
penurunan keringat dan tonus vasomoto
penurunan fungsi pernafasan
gagal nafas
(Diane C. Baughman, 200 : 87)
PENATALAKSANAAN CEDERA MEDULA SPINALIS (FASE AKUT)
Tujuan penatalaksanaan adalah untuk mencegah cedera medula spinalis lebih lanjut dan
untuk mengobservasi gejala perkembangan defisit neurologis. Lakukan resusitasi sesuai
kebutuhan dan pertahankan oksigenasi dan kestabilan kardiovaskuler.
Farmakoterapi
Berikan steroid dosis tinggi (metilpredisolon) untuk melawan edema medela.
Tindakan Respiratori
Berikan oksigen untuk mempertahankan PO2 arterial yang tinggi.
Terapkan perawatan yang sangat berhati-hati untuk menghindari fleksi atau eksistensi
leher bila diperlukan inkubasi endrotakeal.
Pertimbangan alat pacu diafragma (stimulasi listrik saraf frenikus) untuk pasien
dengan lesi servikal yang tinggi.
Reduksi dan Fraksi skeletal
1) Cedera medulla spinalis membutuhkan immobilisasi, reduksi, dislokasi, dan
stabilisasi koluma vertebrata.
2) Kurangi fraktur servikal dan luruskan spinal servikal dengan suatu bentuk traksi
skeletal, yaitu teknik tong /capiller skeletal atau halo vest.
3) Gantung pemberat dengan batas sehinga tidak menggangu traksi



Intervensi bedah = Laminektomi
Dilakukan Bila :
1. Deformitas tidak dapat dikurangi dengan fraksi
2. Terdapat ketidakstabilan signifikan dari spinal servikal
3. Cedera terjadi pada region lumbar atau torakal
4. Status Neurologis mengalami penyimpanan untuk mengurangi fraktur spinal atau
dislokasi atau dekompres medulla.
(Diane C. Braughman, 2000 ; 88-89)
Di dalam jurnal inipun mengulasan dan membahas kemajuan terbaru dan prestasi
dalam terapi berbasis sel untuk pengobatan SCI. mediskusi tentang jenis sel potensi dan
sumber, serta fokus pada kontribusi baru-baru biomaterial ke lapangan dan merupakan alat
utama untuk pengembangan terapi berbasis sel untuk regenerasi jaringan saraf.
Aspek batang terapi berbasis sel untuk cedera tulang belakang
Berbagai jenis sel telah diteliti untuk terapi sel di SCI, termasuk sel-sel induk embrionik
(ESCs) diinduksi terhadap keturunan saraf, sel-sel induk saraf (NSC), sel-sel induk dewasa
seperti sel-sel batang mesenchymal (MSC), darah tali pusat sel induk, makrofag, sel
Schwann, sel ensheathing penciuman (OECs) dan sel-sel progenitor oligodendrocyte, antara
lain [11]. Pemilihan jenis sel yang tepat dengan demikian merupakan faktor kunci yang
menentukan efektivitas terapi pendekatan khusus untuk transplantasi sel. Menurut baru-baru
ini sastra, serta hasil kami sendiri, ini juga mencatat bahwa sel-sel yang ditransplantasikan
asal non-saraf, seperti MSC, sel-sel darah tali pusar atau makrofag, dapat memfasilitasi
pemulihan fungsional, kemungkinan besar melalui mekanisme tidak langsung dimana mereka
memberikan dukungan trofik, memodulasi respon inflamasi awal, meningkatkan
vaskularisasi, menyediakan substrat pertumbuhan permisif dan / atau menekan pembentukan
rongga di lokasi lesi setelah SCI. Di sisi lain, transplantasi NSC atau ESCs neurally
diinduksi, yang mampu menimbulkan semua jenis jaringan saraf, telah menghasilkan dalam
jumlah yang sangat terbatas untuk bertahan hidup, neuron sepenuhnya dibedakan, sehingga
hanya beberapa laporan telah menyarankan bahwa mereka dapat berkontribusi pada
pemulihan fungsional diamati. Oleh karena itu, lebih mungkin bahwa efek yang
menguntungkan mereka mungkin dimediasi, sama seperti dalam kasus cangkok non-saraf,
melalui pelepasan faktor pertumbuhan / trofik oleh sel-sel yang ditransplantasikan, sehingga
mempertahankan kelangsungan hidup sel endogen atau mendukung aksonal tumbuh .
Sebuah komponen penting dari SCI patologi adalah hilangnya oligodendrocytes dan
demielinasi yang dihasilkan, menyebabkan degenerasi progresif dan tertunda saluran aksonal
sisa. Transplantasi nenek moyang oligodendroglial (berasal dari ESCs, nenek moyang saraf
atau sel induk pluripotent) atau perekrutan dan stimulasi nenek moyang oligodendroglial
endogen dianggap pendekatan yang menjanjikan untuk menyelamatkan akson yang tersisa.
Ada bukti yang meyakinkan yang menunjukkan bahwa sumber endogen sel induk saraf dapat
dimobilisasi dari berbagai daerah untuk menggantikan neuron yang hilang / rusak pada
penyakit neurodegenerative atau cedera SSP. Dalam kaitan dengan mekanisme regeneratif
endogen, telah menunjukkan bahwa rangsangan patologis serta fisiologis (misalnya,
peningkatan aktivitas fisik) dapat meningkatkan proliferasi sel induk endogen ependymal dan
dengan demikian meningkatkan jumlah sel-sel induk endogen yang dapat digunakan untuk
mengembalikan atau menggantikan sel saraf rusak atau hilang.
Kriteria untuk terapi berbasis sel untuk cedera tulang belakang
efektivitas terapi berbasis sel untuk SCI tergantung pada beberapa faktor:
1. Pemilihan sumber terbaik sel induk (dewasa, embry-onic, janin, sel induk
pluripotent);
2. Karakterisasi dan perluasan sel induk dalam upaya untuk mencapai jumlah yang
diinginkan sel induk didefinisikan dengan baik untuk transplantasi lebih lanjut;
3. Pengembangan minimal invasif tetapi sangat efektif strategi pengiriman (sistemik,
transplantasi lokal / int-raspinal, intratekal);
4. Dosis optimal dari sel induk (dosis tunggal, administrasi kontinu sel induk selama
beberapa hari);
5. Waktu yang tepat transplantasi sel (selama fase akut atau kronis penyakit);
6. Pengurangan risiko pengobatan sel induk, sehingga memenuhi keselamatan dan
pertimbangan peraturan;
7. Kelangsungan hidup sel ditransplantasikan;
8. Efektivitas transplantasi, kemampuan untuk mengembalikan fungsi sel jenis tertentu
rusak atau hilang.
Sumber sel induk untuk cedera tulang belakang repairIn
beberapa paragraf berikutnya sumber utama sel induk sedang diselidiki baik dalam studi pra-
klinis dan klinis akan disajikan dan hasil utama dari studi ini dibahas (lihat Tabel 1 untuk
gambaran).
Sel induk embrionik
ESCs, yang berasal dari inner cell mass dari embrio blastokista, dan yang ditandai dengan
propagasi pluripotency dan tidak terbatas, merupakan salah satu kandidat yang paling
menjanjikan untuk berbagai terapi penggantian sel.
Tahap I uji klinis yang dilakukan oleh perusahaan AS Geron Perusahaan menggunakan hESC
yang diturunkan sel progenitor oligodendroglial (GRNOPC1) sedang berlangsung pada
pasien dengan cedera tulang belakang. Analisis awal menunjukkan profil keamanan yang
sangat baik, dengan tidak ada efek samping yang serius, tidak ada bukti kavitasi di lokasi
cedera dan tidak ada respon imun ke sel transplantasi bahkan setelah penarikan lengkap
kekebalan penindasan. Baru-baru ini, Geron Corporation telah mengumumkan bahwa karena
perubahan dalam pembangunan strategis mereka berencana akan "menghentikan
pengembangan lebih lanjut dari program sel induk nya" (Geron News Release, CA, AS,
November 14, 2011).
Sel induk saraf
NSCs didefinisikan sebagai multipoten, diri memperbaharui sel induk yang ditemukan dalam
jaringan baik embrio dewasa. Mereka sebagian besar berasal dari tikus atau tikus jaringan
embrio, mempertahankan beberapa kapasitas untuk pembaruan diri, dan menghasilkan
dibedakan neurogenik dan gliogenic keturunan yang secara fungsional dapat
mengintegrasikan dan memperbaiki jaringan saraf yang rusak, jika dicangkokkan ke daerah
neurogenik dari SSP. Namun, data dari penelitian awal telah menunjukkan bahwa NSCs
ditransplantasikan ke SCI membedakan terutama ke astrosit, dengan potensi terbatas untuk
menghasilkan neuron dan oligodendroglia in vivo.
Beberapa studi telah meneliti potensi NSCs dipanen dari jaringan manusia untuk
mempromosikan pemulihan fungsional dalam berbagai pra-clin-ical model hewan SCI.
Misalnya, NSCs berasal dari otak janin manusia meningkatkan pemulihan setelah SCI memar
di kedua gabungan tikus shiverer parah immunodeficiency (SCID) dan myelin-kekurangan .
Studi lain menunjukkan bahwa saraf prekursor (HNT) diisolasi dari teratokarsinoma sel
manusia-line atau prekursor saraf tulang belakang tikus (SNP) dicangkokkan ke segmen
tulang belakang iskemik habis neuron hambat, mengembalikan kekencangan hambat lokal
dan memperbaiki kelenturan. Selain itu, ketika manusia yang diturunkan NSCs diobati
dengan koktail faktor pertumbuhan dan kemudian ditransplantasikan ke dalam sumsum
tulang belakang terluka, mereka dibedakan menjadi neuron kolinergik istimewa. Data terbaru
menggunakan NSCs janin manusia menunjukkan bahwa setelah transplantasi menjadi SCI,
sel-sel ini bertahan dalam lesi, berdiferensiasi menjadi motoneurons dan meningkatkan
motorik serta fungsi sensorik.
sel Schwann
Sel Schwann adalah sel myelinating dari sistem saraf perifer (PNS) yang mempertahankan
regenerasi akson perifer, tetapi yang juga dapat mendukung SSP akson regenerasi. Sel-sel ini
dapat dengan mudah diisolasi dari saraf perifer dan diperluas in vitro, merupakan sumber
berharga untuk perbaikan autografts sumsum tulang belakang. Kapasitas remyelinating sel
Schwann telah ditunjukkan dalam sejumlah model hewan yang berbeda dari SCI yang
disajikan oleh impuls konduksi akson regenerasi. Misalnya, setelah transeksi dari sumsum
tulang belakang dan grafting sel Schwann, akson yang rusak dapat memperpanjang ke
cangkokan dan bahkan menjadi myelinated, tetapi mereka tidak dapat meninggalkan
cangkokan distal dan kembali innervate jaringan target caudally terletak. Demikian pula,
setelah cedera memar, transplantasi sel Schwann mengurangi tingkat kavitasi, dan akson
tulang belakang yang tumbuh ke korupsi kebanyakan remyelinated [58]. Mekanisme yang
Schwann sel mempromosikan regenerasi aksonal mungkin melibatkan sekresi faktor trofik
berbagai, seperti NGF, faktor pertumbuhan fibroblast-2 (FGF-2), BDNF atau NT-3.
Meskipun banyak penelitian telah menunjukkan efek menguntungkan dari sel Schwann pada
perbaikan saraf tulang belakang, mereka menunjukkan migrasi sangat terbatas dari situs
dicangkokkan dan ketidakmampuan untuk berbaur dengan astrosit tuan rumah. Ini Schwann
sel-negatif astrosit interaksi mungkin dimediasi oleh ephrin-terkait mekanisme melalui VAV
sinyal mempengaruhi fungsi integrin.
Penciuman ensheathing sel
OECs adalah sel glial khusus sekitarnya neuron sensorik penciuman. Banyak studi pra-klinis
telah menunjukkan bahwa ketika ditransplantasikan ke sumsum tulang belakang, OECs,
mirip seperti sel Schwann.
Batang mesenchymal transplantasi sel dan studi aclinical
MSC saat ini merupakan sumber sel yang paling menjanjikan untuk transplantasi klinis [71].
Mereka hadir dalam jaringan dewasa, terutama di sumsum tulang, tetapi mereka juga dapat
ditemukan dalam lemak, kulit, darah hati, perifer dan tali pusat, antara jaringan lainnya. Sel-
sel ini mudah untuk mengisolasi dan memperluas untuk aplikasi autologous.
Pilot studi klinis telah dilaporkan juga menggunakan transplantasi ex vivo diperluas
autologous MSC. Autologous BMC implantasi Oleh karena itu digunakan dalam percobaan I
/ II Tahap yang sedang berlangsung klinis pada pasien dengan SCI akut atau kronis di tingkat
serviks atau dada. Sumsum tulang dipanen dari tulang iliaka dari 41 pasien dengan lesi
sumsum tulang belakang transversal di bawah anestesi lokal. Sel mononuklear dipisahkan
melalui sedimentasi, dan sekitar 1,5 9 108 sel diberikan melalui intra-arteri kateterisasi atau
intravena. Untuk evaluasi fungsional, Ameri-bisa Cord Asosiasi Spinal (ASIA) skor
digunakan, bersama dengan pengukuran motor dan membangkitkan potensi somatosensori
dan Magnetic Resonance Imaging (MRI). Evaluasi dari ukuran lesi menggunakan MRI
biasanya sulit, karena pasien telah distabilkan menggunakan implan logam. Intra-arteri
administrasi melalui kateterisasi dari vertebralis yang menyebabkan peningkatan yang
signifikan dalam 90% dari pasien akut dengan luka serviks (hingga 4 minggu setelah cedera),
namun, perbaikan ringan pada skor ASIA ditemukan pada pasien kronis bahkan 467 hari
pasca -luka. Sampai saat ini, tidak ada komplikasi serius yang berhubungan dengan terapi sel
telah diamati (pasien pertama yang ditransplantasikan 7 tahun yang lalu). Namun demikian,
untuk mengevaluasi efektivitas terapi ini, kelompok yang lebih besar dan lebih homogen
pasien diperlukan. Sebuah studi klinis masa depan akan didasarkan pada kombinasi dari MSC
diperluas dengan bridging dari lesi sumsum tulang belakang dengan biomaterial yang tepat,
baik hidrogel atau nanofibre perancah.
Stem sel dan terapi gen
Sel induk juga berfungsi sebagai alat utama untuk terapi gen karena modifikasi genetik
mereka dapat mendorong mereka untuk menghasilkan beberapa faktor trofik yang penting
untuk regenerasi jaringan saraf terluka. Karena aplikasi eksogen faktor neurotropik beberapa
telah terbukti memiliki keterbatasan fungsional serius akibat degradasi cepat mereka, hal ini
dapat diatasi dengan pengembangan non-beracun, non-imunogenik virus vektor jangka
panjang ekspresi transgen. Ini "zaman generasi baru" dari vektor virus dapat diterapkan baik
ke dalam sel induk sebelum transplantasi dilakukan (ex vivo) atau disuntikkan langsung di
situ ke dalam jaringan SSP yang rusak-gangguan. Dalam hal ini, adeno terkait vektor virus
(AAVs), khususnya serotipe AAV-2 atau AAV-1 dan AAV-5, merupakan salah satu sistem
yang paling menarik gen pengiriman untuk terapi gen yang ditargetkan ke saraf jaringan.
Mereka mampu secara efisien mentransduksi neuron sementara merangsang respon imun
minimal di otak host. Saat ini, mapan bahwa kemajuan dalam strategi transfer gen merupakan
prospek yang realistis memberikan terapi gen ke jaringan saraf untuk pelindung saraf,
pemulihanfungsi dan / atau penggantian protein kekurangan dalam berbagai gangguan
neurodegenerative. penelitian lebih lanjut diperlukan untuk menentukan jenis AAV sero
harus dipilih untuk mencapai transduksi yang aman, luas dan dikendalikan dari SSP.
Biomaterial berbasis matriks untuk perbaikan cedera tulang belakang
Dalam SCI akut, sel-sel ditransplantasikan baik dapat menggantikan sel-sel mati atau
memberikan faktor bioaktif yang mempromosikan berbagai regenerasi endogen dan
mencegah apoptosis dan pembentukan rongga. Namun, dalam kasus lesi sumsum tulang
belakang kronis, ketika rongga kistik sudah dikembangkan, transplantasi sel saja tidak cukup
untuk mempromosikan regenerasi jaringan. Dalam kasus ini perbaikan jaringan
membutuhkan "menjembatani" lesi dengan matriks yang menyediakan lingkungan yang
permisif, mengisi kesenjangan jaringan dan, bersamaan, memberikan dukungan struktural
untuk rekoneksi re-pertumbuhan dan fungsional aksonal. Desain biomaterial hati-hati harus
mempertimbangkan parameter seperti biokompatibilitas, sifat mekanik yang cocok dengan
jaringan saraf, porositas dan permeabilitas dan, di samping itu, kemampuan untuk
mendukung sel lampiran, pertumbuhan dan diferensiasi.

biomaterial alam
Polimer biodegradable terus potensi untuk pemulihan akhir dari fungsi dan regenerasi
jaringan penuh. Namun, beberapa kekhawatiran tentang respon inflamasi potensial dipicu
oleh proses degradasi dan oleh-produk masih ada dalam komunitas medis. Di antara polimer
biodegradable sintetis, poliester alifatik, seperti poli (laktida), poli (glycolide) dan kopolimer
mereka, dan poli (ecaprolactone) adalah yang paling dieksplorasi, mungkin didorong oleh
persetujuan oleh FDA untuk aplikasi medis.
Polimer alami umumnya biokompatibel, dapat mendukung adhesi sel dan meminimalkan
terjadinya efek sitotoksik. Properti ini membuat bahan polimer alam menguntungkan untuk
teknik jaringan saraf, meskipun fakta bahwa bahan-bahan alami yang dipanen memiliki tinggi
batch-to-batch variabilitas dan dapat, dalam beberapa kasus, menyebabkan reaksi
imunogenik. Alami berasal polimer yang terdiri dari kolagen, fibrin, hyaluronic acid, agarosa,
alginat, chitosan, serat atau poli (b-hidroksibutirat), telah dilaporkan dalam berbagai studi
untuk menjadi bahan perancah menjanjikan untuk pengobatan lesi sumsum tulang belakang.
Penggunaan komposit alami dan sintetis dapat menggabungkan sifat biokompatibel bahan
alami dan kekuatan mekanik dan tingkat degradasi merdu dari bahan sintetis
Baru-baru ini, Stupp dan rekan kerja telah dirancang dan disintesis berbagai amphiphiles
peptida untuk membuat biomaterial selfassembling baru. Struktur molekul-molekul terdiri
dari blok hidrofobik singkat terikat dengan urutan peptida pendek dengan hidrofilisitas
keseluruhan relatif terhadap blok lainnya. Senyawa sintetis menggabungkan fitur struktural
surfaktan amphiphilic dengan fungsi peptida bioaktif. Salah satu dari sistem ini
menggabungkan IKVAV urutan laminin yang diturunkan dan telah digunakan untuk
mempersiapkan hidrogel membentuk situ untuk mempromosikan SCI regenerasi.
Implan perancah versus di hidrogel membentuk insitu
Penggunaan biomaterial implan untuk mempromosikan regenerasi sumsum tulang belakang
dalam skenario lesi kronis bertujuan tidak hanya untuk mengisi kesenjangan yang terbentuk
di sumsum tulang belakang atas penghapusan jaringan parut, tetapi juga mencegah
pembentukan bekas luka sekunder, memindahkan lokasi lesi menuju pro-regeneratif
lingkungan, sambil memberikan fisik isyarat untuk ekstensi aksonal.
Namun, kapasitas regeneratif bahan saluran bimbingan telah sebagian besar telah dievaluasi
dalam model SCI akut, seperti transeksi, sedangkan dalam kasus SCI lebih kompleks, ketika
rongga tidak teratur atau beberapa berbentuk berkembang, bentuk perancah mungkin tidak
sesuai dengan rongga dan dengan demikian dapat menimbulkan kesulitan struktural dan
integrasi, di samping itu, implantasi perancah mungkin pembedahan bermasalah.
self-assembling nanofibres yang secara spontan agregat dari larutan menjadi stabil nanofibre
gel karena beberapa non-kovalen interaksi dengan adanya larutan garam fisiologis atau
dengan mengubah pH baru-baru ini telah terbukti menjadi alat yang efektif untuk implantasi
ke dalam jaringan saraf lunak. Pada Tabel 2 ringkasan dari materi yang dibahas, serta fitur
utama mereka dalam hal penguraian dan processability disajikan.
Biomaterial dalam terapi kombinasi
Penggunaan matriks untuk mempromosikan regenerasi aksonal setelah lesi sumsum tulang
belakang dapat lebih ditingkatkan oleh kombinasi mereka dengan sel-sel atau agen terapeutik,
seperti neurotrophins. Sel dapat berupa berpegang pada pori-pori dari perancah atau
dimasukkan sebagai suspensi sel dalam hidrogel yang juga dapat dikombinasikan dengan
perancah lebih kaku. Matriks tersebut dapat meningkatkan kelangsungan hidup sel setelah
transplantasi dan mempromosikan diferensiasi menjadi fenotipe yang diinginkan berdasarkan
sifat perancah itu. Sakiyama-Elbert dan rekan kerja baru-baru ini menerbitkan sebuah studi
yang mengevaluasi kelangsungan hidup dan diferensiasi embrio sel induk yang diturunkan
sel progenitor saraf ditransplantasikan dalam fibrin perancah yang mengandung faktor
pertumbuhan untuk meningkatkan kelangsungan hidup sel dan diferensiasi langsung ke
neuron. Mereka melaporkan bahwa kombinasi faktor pertumbuhan dan fibrin perancah
meningkatkan jumlah progenitor sel induk embrio yang diturunkan saraf hadir dalam tali
tulang belakang diobati dan meningkatkan jumlah neuron Neun positif 8 minggu setelah
transplantasi.
Dengan menggabungkan faktor pertumbuhan atau obat lain dalam struktur polimer,
seseorang dapat mencapai pengiriman terkendali dari agen terapeutik, mengatasi keterbatasan
administrasi sistemik dari molekul - pendek setengah-hidup, efek off-target dan sitotoksisitas.
Sebagai sistem pengiriman obat suntik, yang sangat terkonsentrasi kolagen larutan yang
mengandung faktor pertumbuhan telah diberikan intrathecally menjadi cedera kompresi saraf
tulang belakang. Sebuah dalam gelling situ agarose perancah tertanam dengan mikrotubulus
melepaskan BDNF telah ditunjukkan untuk mempromosikan pemberian neurite di
hemisection sumsum tulang belakang. Sebuah foto-polimerisasi PEG-berasal hidrogel yang
mengandung NT-3 itu disuntikkan ke dalam rongga sumsum tulang belakang terluka dan
terkena cahaya dalam gelasi in situ, hidrogel-NT3-diobati hewan menunjukkan perilaku
pemulihan membaik dan pertumbuhan aksonal. Ekspresi lokal faktor neurothrophic, atau
protein terapi yang relevan, dicapai dengan transfer gen juga dapat digunakan untuk
mencapai hasil yang diinginkan. Sejumlah virus telah diuji sebagai vektor gen terapeutik ke
sistem saraf. Meskipun ini terbukti efisien memediasi pengiriman gen, penggunaannya dalam
aplikasi klinis menimbulkan masalah keamanan yang jelas. Juga di sini, biomaterial dapat
digunakan dalam pengembangan non-virus strategi pengiriman gen. Dengan munculnya RNA
(RNAi) teknologi interferensi, kita juga memiliki kemungkinan untuk downregulate ekspresi
molekul penghambatan yang mencegah regenerasi saraf saraf tulang belakang. RNAi
melibatkan double stranded RNA campur kecil (siRNA) molekul sekitar 20-30 nukleotida
panjang yang memediasi pembelahan enzimatik sequencespecific mRNA target melalui
pelengkap pasangan basa. Hal ini memungkinkan desain siRNA spesifik untuk protein
tertentu, yang telah menghasilkan beberapa uji klinis untuk kanker, infeksi virus dan penyakit
penuaan terkait. Namun demikian, deliv-ery ke dalam sel tetap merupakan tantangan untuk
aplikasi klinis siRNA. Hal ini disebabkan kerentanan siRNA telanjang untuk degradasi dalam
aliran darah, pembersihan ginjal, dan masuk ke dalam sel yang tidak memadai. Pendekatan
non-virus pengiriman baru-baru ini adalah penggunaan nanopartikel kitosan berbasis
dibentuk oleh interaksi elektrostatik antara fosfat anionik dari RNA dan kationik amino-
bantalan chitosan. Dalam studi sebelumnya kami telah dikombinasikan kitosan / siRNA
nanopartikel dengan implan microstructured sebagai metode untuk pengiriman lokal siRNA
RhoA-spesifik untuk neuroregeneration dipandu (Gambar 6) dengan hasil yang menjanjikan.
Perspektif masa depan: meningkatkan kapasitas regeneratif aksonal intrinsik
Setelah embrio untuk transisi dewasa, kapasitas pertumbuhan aksonal intrinsik vertebrata
SSP neuron ditekan untuk memungkinkan synaptogenesis benar. Dengan demikian, dalam
kondisi fisiologis, SSP neuron dewasa dalam keadaan non-regeneratif. Namun, sedikit yang
diketahui tentang sifat sinyal bertanggung jawab atas represi dan kemungkinan re-aktivasi
kapasitas otonom CNS akson untuk tumbuh. Dalam paragraf berikut, kemungkinan
mekanisme yang memungkinkan aktivasi intrinsik aksonal kompetensi regenerasi dewasa
vertebrata SSP neuron akan dibahas. Sudah secara luas diakui bahwa setelah cedera, SSP
akson sebagian besar gagal untuk secara spontan regenerasi sedangkan PNS akson segera
kembali tumbuh setelah lesi. Ini perbedaan antara kapasitas regenerasi aksonal dari SSP dan
PNS tidak berhubungan dengan ketidakmampuan intrinsik CNS akson untuk tumbuh setelah
cedera, karena akson ini mampu meregenerasi di hadapan lingkungan pertumbuhan permisif.
Sebagai konsekuensi dari temuan ini, kapasitas regeneratif diferensial dari SSP dan PNS telah
dikaitkan dengan perbedaan lingkungan. Dalam hal ini, para PNS permisif untuk regenerasi
telah berhubungan dengan hal-hal berikut: (i) adanya inhibitor regenerasi aksonal seperti
Nogo-A di PNS mielin dan (ii) respon cepat kekebalan tubuh, sebagai PNS makrofag dan sel
Schwann cepat myelin jelas setelah cedera, menghalangi akumulasi inhibitor mielin dan
pembentukan bekas luka glial. Meskipun kemajuan telah dibuat dalam karakterisasi isyarat
ekstrinsik yang menghambat pertumbuhan akson, mekanisme sel-intrinsik yang mengatur
pertumbuhan akson dan regenerasi tetap kurang dipahami. Meskipun ketidakmampuan umum
SSP akson untuk menumbuhkan ketika lingkungan pertumbuhan permisif tidak ada, SSP
regenerasi dalam lingkungan yang sangat hambat, seperti yang terbentuk atas SCI, adalah
mungkin. Ganglia akar dorsal (DRG) neuron memiliki cabang perifer yang melahirkan
kembali setelah lesi dan cabang pusat yang memasuki sumsum tulang belakang dan tidak
diperbarui pada cedera. Namun, ketika cabang perifer terluka sekitar 1 minggu sebelum lesi
ke cabang pusat (lesi AC), akson sentral tidak mengalami pencabutan dan dieback, melainkan
mengatasi lingkungan penghambatan dari sumsum tulang belakang terluka dan memulihkan
diri sendiri, dengan beberapa akson bahkan mampu tumbuh melampaui situs cedera.
Meskipun hal ini SSP regenerasi aksonal hanya pada skala milimeter, itu telah memicu upaya
untuk memahami mekanisme melalui mana lesi pendingin mengarah ke gain kapasitas
regeneratif. Menariknya, efek ini tidak terbatas pada DRG neuron seperti juga telah
dijelaskan dalam motor neuron dan sel ganglion retina spesies tertentu. Selain itu, efek ini
juga diamati in vitro sebagai neuron DRG AC telah meningkat perkembangan neurite dalam
budaya dan mampu mengatasi myelin penghambatan.
Gambar. 6 implan Nanobiofunctionalized untuk regenerasi sumsum tulang belakang. (I)
Usulan strategi: implan saraf biofunctionalized oleh kitosan / siRNA nanopartikel yang
diambil oleh sel, dan memungkinkan perkembangan neurite. (II) Nanopartikel pada implan
saraf. (A) penyerapan partikel dari implan saraf (filamen) ke dalam sel PC12. Chitosan /
siRNA nanopartikel (NP) yang bergerak pada polydioxanon (PDO) filamen (skala bar kiri
gambar: 10 lm) oleh liofilisasi. Sel PC12 unggulan ke filamen membawa NP dan setelah 48
jam serapan dianalisis dengan mikroskop. PC12 sel tumbuh baik pada filamen dilapisi
(gambar kontras fase) dan menunjukkan penyerapan efisien fluorescently berlabel siRNA
(fluoresensi merah). Skala bar citra yang tepat: 20 lm. (B) Chitosan / fungsi NP siRNA dan
pengurangan mRNA RhoA ditentukan dengan waktu kuantitatif terbalik transkripsi
polymerase chain reaction nyata (QRT PCR). Sel segaris dan mRNA diisolasi dan diproses
menggunakan TaqMan Gene Expression your-to-CT Kit. Tingkat mRNA RhoA
dinormalisasi ke tingkat mRNA GAPDH. RhoA siRNA dimulai degradasi mRNA target
dibandingkan dengan scr siRNA. Berarti nilai tiga percobaan independen. *** P <0,001
dibandingkan scr siRNA pengobatan NP. Transfeksi sel PC12 dengan RhoA nanopartikel
menghasilkan 65-75% pengurangan RhoA mRNA dibandingkan dengan sel transfected
dengan nanopartikel scr. Dimodifikasi dengan izin dari [144]. Hak cipta 2010 American
Chemical Society.
Meskipun urutan kejadian bertanggung jawab atas efek lesi pendingin masih jauh dari
dipahami, efeknya mungkin adalah konsekuensi dari aktivasi mesin regeneratif sebelum lesi
SSP. Peningkatan pertumbuhan negara intrinsik dari neuron prima paling mungkin meliputi
perubahan dalam gen baik
berekspresi dan aksonal transportasi disebabkan oleh PNS lesi awal. Bahkan, telah
menunjukkan bahwa neuron sensorik memiliki kemampuan regeneratif meningkat secepat 1
hari setelah lesi pendingin dan bahwa kemampuan untuk mengekspresikan gen regenerasi
terkait dikenal berlangsung selama 2 bulan menyusul cedera priming. Beberapa molekul telah
diajukan sebagai diperlukan untuk efek pendingin, yaitu faktor transkripsi Smad1 dan ATF3,
sitokin dari keluarga gp130 (faktor leukemia hambat, LIF dan interleukin-6, IL-6) dan
aktivator jaringan plasminogen, antara lain. Namun, tidak satupun dari mereka telah jelas
terbukti cukup dan diperlukan untuk meniru lesi pendingin. Di antara beberapa kandidat
diduga bertanggung jawab untuk keuntungan kapasitas regeneratif mengikuti AC,
peningkatan cAMP di neuron DRG telah diasumsikan peran sentral. Terlepas dari kenyataan
bahwa cAMP saja tidak cukup untuk mereproduksi besarnya pengaruh lesi pengkondisian,
agen yang meningkatkan kadar cAMP mempromosikan regenerasi aksonal di SCI model.
Efek regeneratif cAMP yang ditampilkan untuk transkripsi-dependent dan dimediasi oleh
arginaseI, target gen cAMP yang mengkatalisis langkah membatasi tingkat dalam sintesis
poliamina. Bahkan, pendekatan yang didirikan untuk meningkatkan cAMP dan
mempromosikan regenerasi mengikuti SCI adalah pemberian inhibitor phosphodiesterase
(seperti Rolipram) yang menekan degradasi cAMP. Namun, relevansi klinis inhibitor ini
terbatas karena mereka menginduksi menonaktifkan mual. Untuk mengatasi masalah ini,
layar besar-besaran adalah dilakukan untuk mengidentifikasi regulator lain dari promotor
arginaseI. Daidzein (a isoflavon kedelai) telah diidentifikasi dalam layar ini sebagai molekul
kecil klinis disetujui yang dapat mempromosikan regenerasi aksonal melalui jalur cAMP-
independen. Terlepas dari kenyataan bahwa daidzein lebih kuat daripada analog cAMP dalam
mendorong ekspresi arginaseI, potensinya dalam mempromosikan regenerasi mungkin tidak
cukup untuk menjadi efektif pada manusia. Dengan demikian, pencarian untuk molekul klinis
yang relevan yang meniru lesi AC, serta pembedahan cAMP-independen jalur mampu
meningkatkan kapasitas regeneratif intrinsik neuron SSP, harus dikejar dan kemungkinan
terjemahan ke dalam praktek klinis dieksplorasi.
Kesimpulan
Ulasan ini menyoroti beberapa pendekatan klinis yang paling menjanjikan untuk
mempromosikan regenerasi sumsum tulang belakang yang berada di bawah penyelidikan saat
ini, termasuk yang sudah di uji klinis. Hal ini, bagaimanapun, penting untuk dicatat bahwa
meskipun daftar penelitian memberikan bukti untuk regenerasi aksonal setelah SCI, bahkan
ketika isyarat penghambatan lingkungan dibersihkan dan lingkungan yang lebih permisif
dibuat untuk mendukung regenerasi aksonal, jarak pertumbuhan kembali akson sangat
sederhana khususnya dalam konteks anatomi manusia. Selain itu, pada hewan model,
proporsi akson cedera yang mampu meregenerasi setidaknya dua segmen tulang belakang
umumnya kurang dari 10% dan dalam sebagian besar kasus, proporsi kecil dari akson yang
tumbuh kembali setelah cedera biasanya regenerasi salah arah dan gagal untuk mereformasi
hubungan fungsional. Yang penting, kontribusi aksonal pertumbuhan kembali ke pemulihan
fungsional sebagian besar tidak diketahui. Dengan demikian, penelitian masa depan harus
membedakan pertumbuhan kembali dari akson terluka dari bertunas dari terhindar serat yakni
menciptakan kontribusi plastisitas untuk pemulihan diamati. Jelas, terapi sel akan memiliki
peran penting dalam strategi masa depan untuk mengobati SCI, terlepas dari diskusi yang
mengelilingi lapangan tentang pemilihan sumber sel terbaik. Berdasarkan pengetahuan kita
saat ini semua kandidat, penggunaan MSCs menyajikan keuntungan jelas atas sumber sel
lain, termasuk keselamatan dan ketersediaan mereka. Penggunaan biomaterial juga menerima
perhatian meningkat, baik sebagai kendaraan untuk sel atau sebagai vektor agen terapeutik
(faktor neurothropic, gen, siRNA, antara lain) untuk proses regeneratif sumsum tulang
belakang. Selain itu, keuntungan menggunakan perancah berbasis biomaterial untuk
mempromosikan regenerasi aksonal menjadi lebih jelas dalam pengobatan lesi sumsum
tulang belakang kronis, ketika rongga kistik sudah dikembangkan dan transplantasi sel saja
tidak cukup untuk mempromosikan regenerasi jaringan. Akhirnya, kemungkinan merangsang
aksi molekul dan mekanisme yang dapat meningkatkan kapasitas regeneratif intrinsik dewasa
vertebrata SSP neuron juga dibahas, menjelajahi pengetahuan yang diperoleh dari model lesi
pendingin. Tidak diragukan lagi, pengobatan SCI adalah menuju penggunaan strategi
kombinasi karena seri luas peristiwa yang terjadi setelah jenis lesi yang menyebabkan
kegagalan regenerasi dalam jaringan ini. Salah satu tantangan yang dihadapi saat tim
multidisiplin yang bekerja di bidang ini adalah pengembangan terapi yang aman dan efektif
untuk diterapkan di klinik berdasarkan kemajuan yang dicapai dalam penelitian dasar.