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LA SALUD
EDUARDO HERNANDEZ
BERNAL
TÉCNICAS DE PREPARACIÓN DE
MUESTRAS PARA OBSERVARLAS
AL
MICROSCOPIO .
Al observar una
estructura al
microscopio
óptico o al
electrónico, la
luz o los
electrones
atraviesan la
muestra, dando
lugar a la
formación de
imágenes que
son ampliadas
por las lentes del
microscopio.
En el caso de la
microscopía óptica
las muestras deben
tener un grosor de 5-
8 μm
aproximadamente, y
para microscopía
electrónica, valores
entre 20 y 40 nm. Es
necesario, por tanto,
cortar el material
que ha de ser
estudiado en "lascas"
muy finas.
La preparación del material
biológico muerto, para su estudio al
microscopio óptico o al electrónico,
consta de cuatro pasos
fundamentales.
-1ro. La fijación.
-2do. La inclusión.
-3ro. El corte.
-4to. La coloración.
FIJACIÓN
Se detiene el
proceso de autolisis
FIJACION QUIMICA:
Se utilizan sustancias como el
formol que actúan sobre los
componentes celulares con el
fin de mantener las
estructuras a estudiar lo mas
naturales posibles.
FIJACION FISICA:
Por calor: aplicamos calor de manera que se produce
la coagulación de las proteínas. No es buena ya que las
células se destruyen.
1.-microscopio
estereoscópico
2.-aparato de
iluminación
3.-muestra
4.-centro de
comando
5.-portaobjetos
6.-manivela
COLORACIÓN
Los colorantes que
corrientemente se emplean para
la observación de láminas
histológicas, son sales neutras
que presentan radicales ácidos o
básicos, es decir, colorantes
ácidos y básicos.
Una coloración de uso corriente en histología es la
hematoxilina y eosina (H/E) que emplea ambos tipos de
colorantes. Con esta coloración se observa que el núcleo
se tiñe con el colorante básico (azul), y el citoplasma se
colorea con el colorante ácido (rosado).
fibra
colágena de
tejido
conjuntivo
Impregnación
argénica
En el microscopio electrónico
No se utilizan colorantes, no se
observan colores solo blancos, grises
y negros. Se utilizan sales de metales
pesados para contrastar el tejido.
tejido
Fotografía tomada con microscopio electrónico de los tubos de un
macrofito.