LAMPIRAN

Lampiran 1 Ethical Clearance

Lampiran 2 Formulir Informed consent
FORMULIR INFORMED CONSENT
KOMPARASI EFEKTIVITAS PEMBERIAN SUPLEMEN ANTIOKSIDAN
TERHADAP KADAR MALONDIALDEHID (MDA) SERUM MAHASISWI
EKSTENSI GIZI MASYARAKAT IPB
Setelah memperoleh penjelasan tentang latar belakang, tujuan,
prosedur, kemungkinan manfaat dan risiko serta jawaban atas pertanyaan saya
yang diberikan oleh Tim Peneliti, maka saya
Nama : .........................................................
Umur : .........................................................
Jenis Kelamin : .........................................................
Tlp/HP : .........................................................
Alamat : .........................................................
: .........................................................
Dengan ini menyatakan dengan penuh kesadaran bersedia/tidak
bersedia* untuk berpartisipasi sebagai subjek penelitian. Untuk itu saya
bersedia untuk mengikuti tahapan penelitian: 1) Mengkonsumsi suplemen
antioksidan (vitamin C/vitamin E/multivitamin-mineral), 2) Diambil sampel darah
sebanyak 5 cc untuk analisis kadar MDA serum. Kesediaan tersebut dengan
catatan semua data mengenai diri saya dirahasiakan, dan bila suatu ketika dalam
masa penelitian saya dirugikan dalam bentuk apapun karena penelitian ini saya
berhak membatalkan persetujuan ini.
Bogor, ...................... 2011

Yang membuat pernyataan
Subjek Penelitian



( )

Mengetahui,
Saksi Peneliti


( ) ( )

* Pilih yang sesuai


Lampiran 3 Kuesioner
BIODATA MAHASISWI PROGRAM EKSTENSI IPB
Ketentuan Pengisian:
Mohon di isi dengan keadaan yang sebenar-benarnya, menggunakan huruf KAPITAL
Keterangan: *) di isi dengan tanda silang

1. Nama :
2. Jurusan :
3. Tempat, Tgl lahi :,...
4. Jenis Kelamin*) : Laki-laki Perempuan
5. Agama*) :
6. Tinggi dan Berat Badan : tinggi badan:.cm, berat badan: ..kg
7. Pekerjaan Orangtua*)
- Ayah : PNS/Pegawai BUMN Swasta lainnya, sebutkan
- Ibu : PNS/Pegawai BUMN Swasta lainnya, sebutkan
8. Pendidikan Orangtua*) :
- Ayah : SD SMP SMA Diploma S1/S2/S3
- Ibu : SD SMP SMA Diploma S1/S2/S3
9. Riwayat Kesehatan *)
Asma Magh Thypus lainnya, sebutkan:
10. Riwayat kesehatan keluarga*)
- Ayah : Hipertensi Kolesterol Obese lainnya, sebutkan:
- Ibu : Hipertensi Kolesterol Obese lainnya, sebutkan:
11. Kebiasaan merokok : Tidak Ya, jumlah batang/hari
12. Kebiasaan Konsumsi (dalam 1 bulan terakhir):
a. Supplement*) : Tidak Ya, sebutkan:
b. Obat-obatan dijual bebas*) : Tidak Ya, sebutkan:
No:
c. Makanan sumber vitamin C, vitamin E, Cu, Se, dan Zn
Jenis Makanan
1-2
kali/hari
3
kali/hari
1-2
kali/minggu
3
kali/minggu
Jumlah
1. Jeruk
2. Nenas
3. Rambutan
4. Pepaya
5. Tomat
6. Jambu biji
7. Daun singkong
8. Daun katuk
9. Daun melinjo
10. Sawi
11. Kembang kol
12. Kacang-kacangan
13. Daging sapi
14. Telur
15. Susu
16. Kerang
17. Unggas
18. Coklat
19. Ikan laut
20. Udang
21. Hati

d. Makanan hewani
Jenis Makanan
1-2
kali/hari
3
kali/hari
1-2
kali/minggu
3
kali/minggu
Jumlah
1. Mc.D/ KFC/PH
2. Sosis
3. Nugget
4. Kornet
5. Daging ayam
6. Daging sapi
7. Ayam goreng
8. Ikan bakar
9. Ikan goreng
10. Sate
11.











e. Makanan Nabati
Jenis Makanan
1-2
kali/hari
3
kali/hari
1-2
kali/minggu
3
kali/minggu
Jumlah
1. Tempe goreng
2. Tahu goreng
3. kc tanah
4. kc kedele
5. kc ijo
6. .
7. .

f. Buah dan Sayur
Jenis Makanan
1-2
kali/hari
3
kali/hari
1-2
kali/minggu
3
kali/minggu
Jumlah
1. Apel
2. Jeruk
3. Tomat
4. Pepaya
5. Mangga
6. Semangka
7. Jambu biji
8. Pisang
9. Nenas
10. Anggur
11. Wortel
12. Bayam
13. Sawi
14.

g. Makanan berlemak & berminyak
Jenis Makanan
1-2
kali/hari
3
kali/hari
1-2
kali/minggu
3
kali/minggu
Jumlah
1. Gorengan
2. Mie/nasi goreng
3. Jeroan
4. Soto santan/gulai
5. Cake/ bolu manis
6. Martabak manis
7. Cokelat
8. Bakso
9. Mie ayam
10.




Lampiran 4 Food Record 7x24 jam
KONSUMSI PANGAN SAMPEL
Nama sampel :
Umur : tahun
Berat badan : kg
Tinggi badan : m
Pola konsumsi makan secara kuantitatif
Hari
ke-
Waktu
makan
Menu
Makanan
Bahan makanan URT Gram Keterangan

Pagi






Selingan 1



Siang






Selingan 2



Malam






Selingan 3








Lampiran 5 Prosedur Pembuatan Reagen

Larutan Trichloroacetic acid (TCA) 20%
Bahan :
a. TCA 20 gram
b. Aquades bebas ion 100 ml
Prosedur :
a. Masukkan TCA ke dalam labu ukur, larutkan dengan 100 ml aquades
bebas ion.*
b. Kocok hingga homogen.

Larutan Tiobarbituric acid (TBA) 0.67%
Bahan :
c. TBA 0.67 gram
d. Asam asetat (CH
3
COOH) 100 ml
Prosedur :
e. Masukkan TBA ke dalam erlenmeyer, larutkan dengan 100 ml Asam
asetat (CH
3
COOH) sambil dipanaskan dalam penangas air dan diaduk.**
c. Kocok hingga homogen.










* TCA yang berfungsi untuk mengendapkan protein, karena itu harus hati-hati
dalam melarutkannya, jangan sampai mengenai tangan.
** kerjakan dalam ruang asam




Lampiran 6 Prosedur pembuatan standar dan kurva standar MDA


Larutan standar Tetraetoksipropan (TEP)
Bahan :
a. TEP 12,5 mikro liter
b. Aquades bebas ion 100 ml
Prosedur :
c. Pipet TEP sebanyak 12,5 mikroliter, larutkan dalam 100 ml aquades
bebas ion.**
d. Kocok hingga homogen.

























Prosedur Pembuatan Standar






















Gambar 10 Diagram alir prosedur pembuatan standar MDA





Pipet 10 ml larutan TEP
Larutkan dengan 100 ml aquades
bebas ion dalam erlenmeryer
0 ml 0.1 ml 0.2 ml 0.3 ml 0.4 ml 0.5 ml 1 ml
pipet larutan ke dalam
tabung reaksi sebanyak
tambahkan aquades
bebas ion sebanyak
1 ml 0.9 ml 0.8 ml 0.7 ml 0.6 ml 0.5 ml 0 ml
Masukkan ke penangas mendidih selama 15 menit
Dinginkan
Tambahkan larutan TBA 0,67% sebanyak 2 ml
Baca serapan pada panjang gelombang 532 nm
Lampiran 7 Data kadar MDA
Tabel 11 Kadar malondialdehide plasma awal pada berbagai kelompok
perlakuan intervensi suplemen antioksidan
No.
Kelompok Perlakuan
Kontrol Vitamin C Vitamin E Multivitamin
MDA nmol/mL MDA nmol/mL MDA nmol/mL MDA nmol/mL
1. 15.00 20.00 30.00 32.00
2. 22.00 18.00 26.00 21.00
3. 20.00 32.00 18.00 21.50
4. 30.00 38.00 29.00 26.00
5. 30.00 19.00 32.00 17.00
6. 21.00 32.00 16.50 19.00
X 23.00 26.50 25.25 22.75
SD 5.93 8.53 6.51 5.44

Tabel 12 Kadar malondialdehide plasma akhir pada berbagai kelompok
perlakuan intervensi suplemen antioksidan
No.
Kelompok Perlakuan
Kontrol Vitamin C Vitamin E Multivitamin
MDA nmol/mL MDA nmol/mL MDA nmol/mL MDA nmol/mL
1. 17.00 18.50 14.00 14.50
2. 22.00 17.00 12.50 12.50
3. 18.00 14.50 13.00 14.50
4. 35.00 16.00 7.00 13.50
5. 28.50 9.50 13.00 11.00
6. 24.00 11.00 8.50 9.50
X 24.08 14.42 11.33 12.58
SD 6.785 3.51 2.86 2.01












Lampiran 8 Hasil Uji Statistik
Oneway
Descriptives

N Mean Std. Deviation Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
MDAawal Vitamin E 6 25.25 6.510 2.658 18.42 32.08 16 32
Vitamin C 6 26.50 8.526 3.481 17.55 35.45 18 38
Multivitamin 6 22.75 5.438 2.220 17.04 28.46 17 32
Kontrol 6 23.00 5.933 2.422 16.77 29.23 15 30
Total 24 24.38 6.454 1.317 21.65 27.10 15 38
MDAakhir Vitamin E 6 11.33 2.858 1.167 8.33 14.33 7 14
Vitamin C 6 14.42 3.513 1.434 10.73 18.10 10 18
Multivitamin 6 12.58 2.010 .821 10.47 14.69 10 14
Kontrol 6 24.08 6.785 2.770 16.96 31.20 17 35
Total 24 15.60 6.450 1.317 12.88 18.33 7 35
Perubahan Vitamin E 6 -13.92 6.484 2.647 -20.72 -7.11 -22 -5
Vitamin C 6 -12.08 9.473 3.867 -22.02 -2.14 -22 -1
Multivitamin 6 -10.17 4.239 1.730 -14.61 -5.72 -18 -6
Kontrol 6 1.08 2.728 1.114 -1.78 3.95 -2 5
Total 24 -8.77 8.354 1.705 -12.30 -5.24 -22 5

T-Test

Paired Samples Statistics
Mean N Std. Deviation Std. Error Mean
Pair 1 MDAawal 24.38 24 6.454 1.317
MDAakhir 15.60 24 6.450 1.317




Paired Samples Test
Paired Differences
t df Sig. (2-tailed)

Mean Std. Deviation Std. Error Mean
95% Confidence Interval
of the Difference
Lower Upper
Pair 1 MDAawal MDAakhir 8.771 8.354 1.705 5.243 12.298 5.144 23 .000

Perbedaan Awal-Akhir (Vitamin E)
T-Test







Perbedaan Awal-Akhir (Vitamin C)
T-Test
Paired Samples Test
Paired Differences
t df Sig. (2-tailed)

Mean Std. Deviation Std. Error Mean
95% Confidence Interval
of the Difference
Lower Upper
Pair 1 MDAawal MDAakhir 12.083 9.473 3.867 2.142 22.025 3.124 5 .026





Paired Samples Test
Paired Differences
t df Sig. (2-tailed)

Mean Std. Deviation Std. Error Mean
95% Confidence Interval
of the Difference
Lower Upper
Pair 1 MDAawal MDAakhir 13.917 6.484 2.647 7.112 20.721 5.257 5 .003


Perbedaan Awal-Akhir (Multivitamin)
Paired Samples Test
Paired Differences
t df Sig. (2-tailed)

Mean Std. Deviation Std. Error Mean
95% Confidence Interval
of the Difference
Lower Upper
Pair 1 MDAawal MDAakhir 10.167 4.239 1.730 5.718 14.615 5.875 5 .002

Perbedaan Awal-Akhir (Kontrol)
Paired Samples Test
Paired Differences
t df Sig. (2-tailed)

Mean Std. Deviation Std. Error Mean
95% Confidence Interval
of the Difference
Lower Upper
Pair 1 MDAawal MDAakhir -1.083 2.728 1.114 -3.946 1.779 -.973 5 .375









ANOVA
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
MDAawal Between Groups 58.875 3 19.625 .436 .729
Within Groups 899.250 20 44.962
Total 958.125 23
MDAakhir Between Groups 604.031 3 201.344 11.409 .000
Within Groups 352.958 20 17.648
Total 956.990 23
Perubahan Between Groups 819.031 3 273.010 6.947 .002
Within Groups 785.958 20 39.298
Total 1604.990 23






Multiple Comparisons
LSD
Dependent
Variable (I) Perlk (J) Perlk Mean Difference (I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
MDAawal Vitamin E Vitamin C -1.250 3.871 .750 -9.33 6.83
Multivitamin 2.500 3.871 .526 -5.58 10.58
Kontrol 2.250 3.871 .568 -5.83 10.33
Vitamin C Vitamin E 1.250 3.871 .750 -6.83 9.33
Multivitamin 3.750 3.871 .344 -4.33 11.83
Kontrol 3.500 3.871 .377 -4.58 11.58
Multivitamin Vitamin E -2.500 3.871 .526 -10.58 5.58
Vitamin C -3.750 3.871 .344 -11.83 4.33
Kontrol -.250 3.871 .949 -8.33 7.83
Kontrol Vitamin E -2.250 3.871 .568 -10.33 5.83
Vitamin C -3.500 3.871 .377 -11.58 4.58
Multivitamin .250 3.871 .949 -7.83 8.33
MDAakhir Vitamin E Vitamin C -3.083 2.425 .218 -8.14 1.98
Multivitamin -1.250 2.425 .612 -6.31 3.81
Kontrol -12.750
*
2.425 .000 -17.81 -7.69
Vitamin C Vitamin E 3.083 2.425 .218 -1.98 8.14
Multivitamin 1.833 2.425 .459 -3.23 6.89
Kontrol -9.667
*
2.425 .001 -14.73 -4.61
Multivitamin Vitamin E 1.250 2.425 .612 -3.81 6.31
Vitamin C -1.833 2.425 .459 -6.89 3.23
Kontrol -11.500
*
2.425 .000 -16.56 -6.44
Kontrol Vitamin E 12.750
*
2.425 .000 7.69 17.81
Vitamin C 9.667
*
2.425 .001 4.61 14.73

Multivitamin 11.500
*
2.425 .000 6.44 16.56
Perubahan Vitamin E Vitamin C -1.833 3.619 .618 -9.38 5.72
Multivitamin -3.750 3.619 .313 -11.30 3.80
Kontrol -15.000
*
3.619 .001 -22.55 -7.45
Vitamin C Vitamin E 1.833 3.619 .618 -5.72 9.38
Multivitamin -1.917 3.619 .602 -9.47 5.63
Kontrol -13.167
*
3.619 .002 -20.72 -5.62
Multivitamin Vitamin E 3.750 3.619 .313 -3.80 11.30
Vitamin C 1.917 3.619 .602 -5.63 9.47
Kontrol -11.250
*
3.619 .006 -18.80 -3.70
Kontrol Vitamin E 15.000
*
3.619 .001 7.45 22.55
Vitamin C 13.167
*
3.619 .002 5.62 20.72
Multivitamin 11.250
*
3.619 .006 3.70 18.80
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Duncan
MDAawal
Duncan
Perlk N
Subset for alpha
= 0.05
1
Multivitamin 6 22.7500a
Control 6 23.0000a
vitamin E 6 25.2500a
vitamin C 6 26.5000a
Sig. .386
Means for groups in homogeneous subsets
are displayed.


MDAakhir
Duncan
Perlk N
Subset for alpha = 0.05
1 2
vitamin E 6 11.3333 a
multivitamin 6 12.5833a
vitamin C 6 14.4167a
Control 6 24.0833b
Sig. .243 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are
displayed.



Perubahan
Duncan
Perlk N
Subset for alpha = 0.05
1 2
vitamin E 6 -13.9167
vitamin C 6 -12.0833
multivitamin 6 -10.1667
Control 6 1.0833
Sig. .339 1.000


Konsumsi Pangan
Descriptives

N Mean Std. Deviation Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
Energi Control 6 1.5087E3 366.25437 1.49523E2 1124.3063 1893.0271 1009.00 2122.00
vitamin C 6 1.6505E3 386.78508 1.57904E2 1244.5939 2056.4061 1103.00 2040.00
vitamin E 6 1.4118E3 210.78085 86.05092 1190.6324 1633.0343 1147.00 1665.00
Multivitamin 6 1.5150E3 294.28897 1.20143E2 1206.1627 1823.8373 1080.00 1841.00
Total 24 1.5215E3 312.57319 63.80374 1389.5119 1653.4881 1009.00 2122.00
Protein Control 6 51.6333 12.53390 5.11694 38.4798 64.7869 38.50 74.50
vitamin C 6 56.8833 12.85479 5.24795 43.3931 70.3736 38.10 72.00
vitamin E 6 48.0500 7.75339 3.16531 39.9133 56.1867 35.40 54.70
Multivitamin 6 48.2000 11.16906 4.55975 36.4788 59.9212 28.40 57.50
Total 24 51.1917 11.12087 2.27004 46.4957 55.8876 28.40 74.50
VitE Control 6 3.6167 1.42607 .58219 2.1201 5.1132 2.20 6.10
vitamin C 6 3.5667 1.01522 .41446 2.5013 4.6321 2.70 5.40
vitamin E 6 3.1000 .96540 .39412 2.0869 4.1131 2.10 4.80
Multivitamin 6 3.4500 1.14848 .46886 2.2447 4.6553 1.90 5.30
Total 24 3.4333 1.09452 .22342 2.9712 3.8955 1.90 6.10
VitC Control 6 49.7167 30.91908 12.62266 17.2691 82.1643 14.00 86.90

vitamin C 6 45.1333 18.41604 7.51832 25.8069 64.4598 16.00 71.00
vitamin E 6 39.3667 44.06244 17.98842 -6.8740 85.6074 12.90 126.80
Multivitamin 6 31.9167 13.67676 5.58351 17.5638 46.2695 19.30 51.00
Total 24 41.5333 28.11550 5.73905 29.6612 53.4055 12.90 126.80
Zinc Control 6 5.7667 1.65610 .67610 4.0287 7.5046 3.70 8.70
vitamin C 6 6.5000 1.59750 .65218 4.8235 8.1765 4.00 8.70
vitamin E 6 5.2500 .92682 .37837 4.2774 6.2226 3.70 6.20
Multivitamin 6 5.5333 1.18265 .48282 4.2922 6.7745 3.60 6.70
Total 24 5.7625 1.36599 .27883 5.1857 6.3393 3.60 8.70
Cu Control 6 .8333 .34448 .14063 .4718 1.1948 .50 1.50
vitamin C 6 1.7833 2.41944 .98773 -.7557 4.3224 .50 6.70
vitamin E 6 .7167 .07528 .03073 .6377 .7957 .60 .80
Multivitamin 6 .7167 .17224 .07032 .5359 .8974 .40 .90
Total 24 1.0125 1.23088 .25125 .4927 1.5323 .40 6.70

ANOVA
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Energi Between Groups 173248.333 3 57749.444 .557 .650
Within Groups 2073897.667 20 103694.883
Total 2247146.000 23
Protein Between Groups 308.462 3 102.821 .811 .503
Within Groups 2536.037 20 126.802
Total 2844.498 23
VitE Between Groups .977 3 .326 .245 .864
Within Groups 26.577 20 1.329
Total 27.553 23
VitC Between Groups 1062.610 3 354.203 .414 .745
Within Groups 17118.463 20 855.923
Total 18181.073 23
Zinc Between Groups 5.155 3 1.718 .910 .454
Within Groups 37.762 20 1.888
Total 42.916 23



















Cu Between Groups 4.808 3 1.603 1.067 .385
Within Groups 30.038 20 1.502
Total 34.846 23


Lampiran 9 Dokumentasi Penelitian



















Pengambila darah sampel sebelum
dan setelah intervens
1 ml plasma
Tambahkan Larutan TCA 20%,
dingin sebanyak 1 ml

Divortex

Disentrifuge selama 10 menit (3000
rpm)



























Terbentuk endapan
protein
pipet supernatan 1 ml

Tambahkan 2 ml TBA

Masukkan ke penangas mendidih
selama 15 menit sampai terentuk
warna merah muda

Dinginkan dengan air es

Masukkan dalam kuvet
(blangko dan sampel)

Baca pada panjang
gelombang 532 nm