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Práctica 5 - Urocultivo

Práctica 5 - Urocultivo

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E
Laboratorio de Microbiolog\u00eda
PR\u00c1CTICA NO.5
UROCULTIVO.
OBJETIVO.

El alumno conocer\u00e1 la t\u00e9cnica de urocultivo realiz\u00e1ndola paso a paso. As\u00ed mismo, comprender\u00e1 en qu\u00e9 casos deber\u00e1 tomar mano de \u00e9sta herramienta medica con sus pacientes. Diferenciara la flora normal de la pat\u00f3gena y aprender\u00e1 el manejo correcto de la toma de muestra.

FUNDAMENTO TE\u00d3RICO.
l an\u00e1lisis microbiol\u00f3gico de la orina va
encaminado al diagn\u00f3stico de las

infecciones del aparato urinario, esencialmente cistitis y pielonefritis. Tambi\u00e9n es \u00fatil para ayudar al diagn\u00f3stico de las infecciones no estrictamente urinarias, cuando afectan a tejido renal o se excretan bacterias por orina, como tuberculosis, leptospirosis o fiebre tifoidea.

Es responsabilidad del m\u00e9dico presumir enfermedades infecciosas en sus pacientes e iniciar estudios a fin de confirmar o descartar esta presunci\u00f3n.

RECOLECCI\u00d3N DE MUESTRAS.

La correcta recolecci\u00f3n de muestras biol\u00f3gicas para su cultivo es posiblemente la etapa m\u00e1s importante en el aislamiento de microorganismos responsables de enfermedades infecciosas.

PASOS PARA UNA CORRECTA RECOLECCI\u00d3N
DE MUESTRAS
1. La muestra para cultivo debe ser material del

verdadero sitio de infecci\u00f3n y debe recogerse con un m\u00ednimo de contaminaci\u00f3n de tejidos, \u00f3rganos o secreciones adyacentes.

2. Establecer per\u00edodos \u00f3ptimos para la recolecci\u00f3n de
muestras a fin de tener la mejor oportunidad de aislar
los microorganismos causantes.
3. Obtener suficiente cantidad de muestra para llevar
a cabo las t\u00e9cnicas de cultivo solicitadas.
4. Utilizar dispositivos de recolecci\u00f3n, recipientes
para las muestras y medios de cultivo adecuados para
asegurar el \u00f3ptimo aislamiento de microorganismos.
5. Obtener la muestra de preferencia antes de la
administraci\u00f3n de antibi\u00f3ticos.
6. El envase recolector de la muestra debe estar
correctamente rotulado.
RECOLECCI\u00d3N Y CULTIVO DE MUESTRAS DE
ORINA.

La muestra m\u00e1s adecuada es la primera orina de la ma\u00f1ana. Debe evitarse la contaminaci\u00f3n por la microbiota normal de la uretra o del perineo,

mediante un lavado de los genitales externos, aclarado con abundante agua y secado, si es posible, con gasa est\u00e9ril. Se recoge la porci\u00f3n media de la micci\u00f3n en un frasco est\u00e9ril de boca ancha, desechando los primeros y los \u00faltimos mililitros. La muestra debe analizarse inmediatamente, o refrigerarse a 4\u00b0C hasta un m\u00e1ximo de 24 horas.

.AN\u00c1LISIS MICROBIOL\u00d3GICO PRELIMINAR.

Cuando el n\u00famero de muestras es muy elevado es necesario un m\u00e9todo que permita descartar las negativas sin proceder al cultivo. Algunos de los criterios empleados son los siguientes:

*Depositar una gota de la muestra de orina (que previamente se ha homogeneizado muy bien) sobre el porta, sin extenderla, dejarla secar y fijarla a la llama. *Te\u00f1irla por el m\u00e9todo de Gram. Si se aprecia al menos una bacteria en la mayor\u00eda de los campos observados, la muestra debe cultivarse.

*Considerar los resultados del examen del sedimento
UROCULTIVO CUANTITATIVO.

El recuento de bacterias en orina es, por el momento, el m\u00e9todo aconsejado para distinguir una infecci\u00f3n urinaria de la contaminaci\u00f3n por microbiota normal. Puede hacerse mediante diluciones seriadas o mediante siembra con asa calibrada. Este \u00faltimo m\u00e9todo es m\u00e1s utilizado por su sencillez.

Caso cl\u00ednico
Ni\u00f1a de 8 a\u00f1os que consulta por realizar orinas
dolorosas en las \u00faltimas 24 horas. Fiebre de 39 C.
PREGUNTAS EXPLORATORIAS.
\u00bf Que podr\u00eda sospechar ante \u00e9sta situaci\u00f3n?
___________________________________________
___________________________________________
__
2.- \u00bf Considerar\u00eda usted el caso de realizar un
urocultivo a la paciente? Si o No y \u00bfPor qu\u00e9?
___________________________________________
___________________________________________
__

3.- \u00bfCu\u00e1l cree usted que sea el agente etiol\u00f3gico del que podr\u00eda sospechar en primer caso por tratarse de una ni\u00f1a?

Escuela de Medicina Universidad Xochicalco
Laboratorio de Microbiolog\u00eda
___________________________________________
___________________________________________
__
Material:

\u2022 Muestra de orina problema.
\u2022 Asa calibrada de 1 \u03bcl.
\u2022 Una placa de Agar-sangre y otra de

MacConkey o EMB
T\u00e9cnica:
\ue000
Homogeneizar bien la orina mediante
inversiones del frasco.
\ue000
Sumergir verticalmente el asa y retirarla
asegur\u00e1ndose que lleva una gota de orina
\ue000
Sembrar con el m\u00e9todo de estr\u00eda m\u00faltiple
\ue000
Incubar a 37oC por 24 a 48 horas.
\ue000

Interpretar los resultados , anotando las caracter\u00edsticas morfol\u00f3gicas de cada colonia diferente que haya

crecido.
\ue000
Hacer un frotis de cada colonia diferente, y
te\u00f1irlo con un Gram
INTERPRETACION

Estimar el n\u00famero de colonias y multiplicarlo por mil, para obtener el n\u00famero de bacterias por ml de orina. Un recuento de m\u00e1s de 100.000 bacterias/ml es indicativo de infecci\u00f3n (el n\u00famero no se correlaciona con la gravedad de la misma).

Un recuento de menos de 10.000 bacterias/ml hace sospechar una contaminaci\u00f3n de la muestra, especialmente si hay varios tipos distintos de colonias, pues las infecciones urinarias son casi siempre debidas a un s\u00f3lo microorganismo. Las cifras intermedias son dudosas, y requieren la consulta al cl\u00ednico y la repetici\u00f3n del an\u00e1lisis. Hay que tener presente que las muestras obtenidas por punci\u00f3n

suprap\u00fabica o cateterismo as\u00e9ptico no llevan
contaminaci\u00f3n, y debe considerarse positivo cualquier
recuento.
En caso de infecci\u00f3n se procede siempre a la
identificaci\u00f3n y al antibiograma.
IDENTIFICACION.
Los
microorganismos
responsables
m\u00e1s

frecuentemente de infecci\u00f3n urinaria
var\u00edan seg\u00fan el origen comunitario o nosocomial de la
infecci\u00f3n. En l\u00edneas
generales son:

\u2022 Escherichia coli, y con mucha menor frecuencia
otras enterobacterias, como
Proteus, Klebsiella, Enterobactery Serratia.
\u2022 Entre los cocos Gram-positivos,Sta ph yl o co ccu s
saprophyticus, Enterococcus
faecalisy Staphylococcus aureus.
\u2022 Microorganismos oportunistas, comoPseudomonas
aeruginosa, Alcaligenes spp.
Corynebacterium urealyticum y levaduras, como
Candida albicans.
Bas\u00e1ndose en el aspecto de la colonia y en su tinci\u00f3n,
proceda a identificarla
seg\u00fan las t\u00e9cnicas descritas en la Pr\u00e1ctica 2

El estudio microbiol\u00f3gico de la orina, se hace cuando los signos y s\u00edntomas son sugestivos de infecci\u00f3n de la v\u00edas.

RESULTADOS.
MORFOLOGIA MACROSCOPICA
Caracter\u00edsticas
C O
L
O
N
I
A
S
morfol\u00f3gicas.
AS
MAC CONKEY
CHOCOLATE

Tama\u00f1o
Elevaci\u00f3n
Superficie
Aspecto
Bordes
Densidad
Hem\u00f3lisis
Consistencia
Gram
Morfolog\u00eda

Escuela de Medicina Universidad Xochicalco
FLORA NORMAL
FLORA PAT\u00d3GENA

Staphylococcocus spp.(coagulasa -)
Streptococcus viridans
Lactobacillus spp.

Difteroides

Neisseria spp (no pat\u00f3gena).
Cocos anaer\u00f3bicos.
Levaduras (algunas).

Otros
Enterobacterias.
Enterococos.
Staphylococcus saprophyticus.

Pseudomona aeruginosa.
Candida albicans.
Staphylococcus aureus.
Streptocuccus Beta-hemol\u00edtico.
Neisseria gonorrhoeae.

Laboratorio de Microbiolog\u00eda
microsc\u00f3pica.
Agrupaci\u00f3n.
CUESTIONARIO.
1. Explique cual es el papel de la flora normal del cuerpo humano.
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
____
2. \u00bfPor qu\u00e9 es recomendable cultivar las muestras para determinar el microorganismo causal de la enfermedad?
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______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
____
3. \u00bfCu\u00e1l es el paso m\u00e1s importante del examen de la muestras para cultivo microbiol\u00f3gico?
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______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
____
4. \u00bfPor qu\u00e9 se debe tomar la muestra antes de la administraci\u00f3n de antibi\u00f3ticos?
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______________________________________________________________________________________________
____
5.- La presencia de bacterias Gram (-) en orina es natural? Si o no y \u00bfPor qu\u00e9? \u00bfQu\u00e9 podemos esperar con este
resultado?
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______________________________________________________________________________________________
__
OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES.
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
INSTRUCCIONES: Marque con una paloma para indicar que el alumno realiz\u00f3 la actividad y con una X
que no la realiz\u00f3.
Participaci\u00f3n individual
Nombre
A B C D E
A)Al realizar la pr\u00e1ctica toma en cuenta las medidas de seguridad.
Escuela de Medicina Universidad Xochicalco

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