FARMACOGENOMICA

EN ONCOLOGIA

Dr. Luis M. Zetina Toache

Oncomédica-Multimédica
 “ It is much more important to know
what kind of patient has a disease,
than to know what kind of disease a
patient has”
Caleb Parry. 18th Century physician, Bath.

“We used to think our fate was in our stars.

Now we know, in large measure, our fate is
in our genes”
J.D Watson. Time Magazine 20 March 1989
 De la Biotecnologia
Antigua a la Doble Hélice
y a la Medicina Genómica

Nuevas fronteras
Terapéuticas
Historia de Biotecnologia
50 ANIVERSARIO DE DNA

Farmacogenómica
 Gregor Mendel.
1866
Leyes y “factores“ de la
herencia.

Versuche über Pflanzen-Hybriden

von Gregor Mendel. Brun.4,3-47, 1866
Experimentos en hibridizacion con plantas
Freidrich Miescher. 1871
F. Miescher:
Trabajo con esperma de
salmón y describió un
componente no protéico
del núcleo que denominó
NUCLEINA.

A. Kosell : Carbohidratos en
forma de Purinas y
Pirimidinas

P.Levin : Ribosa (ARN) o

deoxyribona (DNA)
Walter Fleming
(1887)

Establece estructuras
Intranucleares estudiadas por
Tinción de Feulgen llamadas
CROMOSOMAS
 Hugo de Vries
(1900)
Confirma los datos planteados por
Gregor A. Mendel

De Vries *Footnote: C. R., 1900, March 26; 'Ber. deut. Bot. Ges.,'
 Paul Erlich
Premio Nobel . 1908
“Magic Bullet”
 Camino
al DNA

Walter Sutton. 1902 A. Levine. 1929

(Estudio cromosonas Papel de CH.
En meiosis) En DNA y RNA

T. Morgan.1933
W. Johannsen. 1909 Premio Nobel por
Establece termino Relaciòn entre G. Beadle.1941
GENES Genes y cromosomas Premio Nobel relación
Entre genes y enzimas
 Oswald Avery
Material genético y DNA (1944)

(transforming principle)
 Estructura del DNA
Watson y Crick. 1953
Cristalografía
Rx. Rosalind
Franklin. 1950
 Doble Hélice
Ceremonia de Premios Nobel. Suecia. 1962

EXPLICA FACILMENTE

• MUTACION, VARIACION
• CAMBIOS, EVOLUCION
• DIVERSIDAD DE ESPECIES
• HERENCIA
Ingenieria Genética y DNA recombinante

Stanley Cohen
Premio Nobel. 1986

Cesar Mielstein
Premio
) Nobel. 1984
 Polimerasa Chain Reaction 1990
PCR

1. Amplifica secuencia de DNA y

RNA
2. Identifica mutaciones puntuales
en genes específicos
3. Análisis pequeñas muestras
4. Util en medicina forense ,
Karry. Mullis. 1993. Premio Nobel genética e infecciosa
Anticuerpos Monoclonales
(desarrollo histórico)

Dr. Luis Miguel Zetina Toache

Unidad de Hemato-Oncología
Hospital Roosevelt
Guatemala
 Anticuerpos monoclonales
(historia)
 1800. Papel del sistema inmune se basó en
la observación de ciertos tumores tenían
regresiones cuando un pte. con cáncer
adquiría alguna infección bacteriana.
 1892-1936. W. Coley. NY, pasó su vida tx.
ptes. con lisados bacterianos para obtener
respuestas antineoplásicas. Impredecibles?
 1960-1970 . Lewis Thomas y Mac Farlane
Burnett. introdujeron concepto de
“Inmunovigilancia”.

Metzger, Ann Rev Inm 12:337-366;1994

 Anticuerpos Monoclonales
(historia)
 1970. Uso de “estimulantes del sistema
inmune”. BCG. Tx Ca. Superficial de vejiga
y melanoma.
 1970-1980. Uso de citoquinas . Interferones,
interleucinas y TNF. Pocos pacientes
beneficiados como tx. Único.
 Antígenos neoplásicos. La inmunoterapia
debe ser capaz de distinguir las célula
normal de la neoplásica
 Una forma es reconocer las diferencias es
através de antígenos expresados en el
tumor y no en las células normales
 Diferenciación cel. B
Cel.tronco
Cel.troncopre-pre y marcadores de sup.
pre-pre
cel.
cel.BB
pre-B
pre-Bcell
cell cel
pre-B
pre-B cel
pre-B
pre-Bcel
cel immad.
immad.
BBcell
cell madura
madura
BBcel
cel activada
activada
TDT
BBcell
cell plasma
plasmacell
cell
CD 19

CD 20 CD 22

CD 21

CD 38

Cel.precursoras Linfomas cel. B mieloma

leucemias múltiple
rituximab Cel. B
CD20

Casi 1 mill x cel

Unión de rituximab a CD20 causa

destrucción de cel. B cel

Lisis Citotoxicidad
dependiente dependiente
Apoptosis
de de
complemento Anticuerpos
 Anticuerpos Monoclonales
(historia)
1939. Identificación de
Inmunoglobulinas.
George F. Köhler y César Milstein (1975),
desarrollan técnica de hibridomas. Premio
Nobel
Nadler y col, (1979), tratan los primeros
pacientes con Aps Monoclonales

Metzer Ann Rev Inm. 12:337;1994

 Production of anti-HER2
monoclonal antibodies

Spleen

Myeloma cells
B cells

Cell fusion Immortal

hybridoma
Assay for Production of
antibody production, monoclonal
selection of a single cell, antibodies
multiplication
Anticuerpos monoclonales
(tipos)

Desnudos
Conjugados
Inmunotoxinas
 Anticuerpos Monoclonales
Terminología

• MURINO: “monomab”
• QUIMERICO: “ximab”
• HUMANIZADO: “zumab”
 Aps Monoclonales
tipos

• Murino: Aps de ratón. Móléculas extrañas.

Reacciones alérgicas serias. Aps
neutralizantes. HAMA Human Anti Mouse
Antibodies.

• Quiméricos: (Tifón y equidna: cabeza de

león, cuerpo de cabra y cola de serpiente).
Mantiene regiones variables murinas,
acopladas a regiones constantes humanas.

• Humanizados: Contiene sólo regiones

hipervariables de Ap. Murino original.
 Herceptin® (trastuzumab):
Anticuerpo monoclonal humanizado
anti-HER2

• Alta afinidad (Kd=0.1nM) y

especificidad
• 95% humano, 5% murino
– potencial de
inmunogenicidad
disminuído
Fabricacion de Aps. Monoclonales
Hipoxantina Guanina
fosforibosil transferasa

HER-2 PEG
EGRF
VEGF Linfos B ( HGPRT+ )
Hipoxantina
Aminopterina
Timidina

HIBRIDOMA
Antigen

Ovarian cancer
ascitic fluid
 Tipos de Aps Monoclonales
1) Suprimen sistema inmune
• Muromonab-CD3 (Orthoclone® OKT3)
Enfermedad Injerto-Huesped
• Infliximab-TNFα (Remicade®)
Artritis Reumatoidea
• Omalizumab- IgE mast cell (Xolair®)
Asma Alergica
• Daclixumab-IL-2 linfos T (Xenapax®)
Enfermedad Injerto-Huesped
Linfoma T
 Tipos de Aps. Monoclonales
2) Inhibicion celulas Malignas
• Rituximab-CD20 (Mabthera®)
Linfomas B CD 20+
• Ibritumomab (Zebalin®)
Linfomas B CD 20+ (111In ) (90Y)
• Tositumomab (Bexxar®)
Linfomas B CD 20+ (131I)
• Alentuzumab (Campath®)
LLC CD 52+
 Tipos de Aps. Monoclonales

2) Inhibicion de celulas malignas

• Gemtuzumab CD-33 (Mylotarg®)
LMC
• Lym-1 HLA-DR10 (Oncolym®) (131 I)
Linfoma non-Hodgkin
• EpratuzumabCD 22 (Lymphocide®)
Leucemias B
Human genoma
HUMAN project
GENOME PROJECT
“ To him who devotes his life to sciencie,
nothing can give more happiness than
increasing the number of discoveries, but
his cup of joy is full when the results of his
studies inmediately find practical
applications”
Louis Pasteur
 Oncology Technology Trends

Acute Chronic
IV Oral
Shotgun approach Targeted therapy
Many side effects Few side effects
Immune Immune augmentation
suppression
Reactive treatment Prevention / Susceptibility
of Disease
Source : Research Acquisition, Product Teams
 Farmacogenetica
Farmacogenomica
Genética: estudia un gen en forma aislada, tratando de
identificar una anormalidad puntual

Genómica: estudia los genes en forma integral y

relacionada al si mismo y al medio ambiente
(genómica estructural y funcional)

Farmacogenómica: combinada ciencias farmacéutica

convencionales como la bioquímica, con el conocimiento
de genes, proteínas y SNP

Medicamentos en base a GENOTIPO

American Medical Association.

AMA Sciencie. April. 2003
 Farmacogenómica

1. MEDICAMENTOS MAS POTENTES

2. MEDICAMENTOS MENOS TOXICOS
3. METODOS APROPIADOS PARA MEDIR
DOSIS DE DROGAS
4. MEJORES VACUNAS
 Three corresponding forms of
Pharmacogenomics

Pharmacogenetics
Via DNA – Using genetic approaches

Expression Pharmacogenomics
Via RNA – Expression profiling

Proteins Proteomic Pharmacogenomics

– Proteomics
 DNA GENOMA
46 CROMOSONAS
3 289 000 000 BASES
31 000 GENES CODIFICANTES

RNA TRANSCRIPTOMA
90 000 TRANSCRITOS CODIFICANTES
300 000 MOLÈCULAS

PROTEINAS PROTEOMA
90 000 TIPOS BASICOS
106 DIFERENTES

Hidalgo, Rev Inv Cln 2001; 53(5): 430-443

 Cancer y genomica
Todos los tipos de càncer son causados por
anormalidades en la sequencia del DNA, que
son expuestos a mutàgenos.
Ocacionalmente estos alteraciones afectan la
funciòn critica de un gen, produciendo una clona
expandida.
El cancer es la enfermedad genètica mas
comun
Mas de 100 oncogenes han sido identificados
 Inhibidores
“Blanco”
Medicamento citostáticos tradicionales
están dirijidos al DNA o la tubulina

Nuevos fármacos su blanco molecular es:

- Apoptosis
- Señales de membrana o transducion
- Ciclo celular
- Neo angiogénesis
 HER2 receptor dimer transmembrane
signal transduction pathway
Growth factor

Binding site

Plasma
membrane
Tyrosine
Signal kinase activity
transduction
to nucleus

Cytoplasm Nucleus

CELL
Gene activation DIVISION
 muMAb 4D5 binds specifically to the
HER2 receptor

CVN HER HER

1 2  Specifically
immunoprecipitates HER2
40.10H1

40.1.H1

40.1.H1
4D5

4D5

4D5
108

108

108
 Does not cross-react with
1 2 3 4 5 6 7 8
9 EGF receptor (HER1)
185kD (HER2)
170kD (HER2)

CVN = control cell line; HER1 = HER1-overexpressing cell line; HER2 = HER2-overexpressing cell line
40.1.H1 = control MAb; 108 = anti-HER1 MAb
Hudziak RM et al. Mol Cell Biol 1989;9:1165–72
 Production of anti-HER2
monoclonal antibodies

Spleen

Myeloma cells
B cells

Cell fusion Immortal

hybridoma
Assay for Production of
antibody production, monoclonal
selection of a single cell, antibodies
multiplication
 Herceptin (trastuzumab):
®

humanised anti-HER2 monoclonal

antibody

 High affinity
(Kd=0.1nM) and
specificity
 95% human, 5%
murine
– decreased potential
for immunogenicity
Inhibidor de tirosis Kinasa
Especifico
IRRESA

ERLOTINIB
TARCEVA

GLIVEC

AVASTIN
 Gene or locus
identification

Disease pathogenesis Drug action

Efficacy Safety/toxcity
Multifactorial disease

Patient number for each Pharmacokinetics

genetic background Pharmacodynamics

Define drug target

 Vision futurística
Retos de Investigación genómica
1. Establecer estructura y función de los genes
2. Dilucidar la organización de las vías protéicas
3. Entender la variación de la herencia en el genoma
humano
4. Establecer la variación inter-especies y sus
mecanismos
5. Desarrollar políticas para el uso de la información
genómica en investigación y práctica clínica
6. PROPONER COMO SUB ESPECIALIZACION A LA
FARMACOGENOMICA