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Urocultivo

Urocultivo

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Departamento de Patolog\u00eda Cl\u00ednica, 4\u00b0 A\u00f1o de Medicina, Apuntes de Pr\u00e1cticas de Laboratorio
Infecciones de v\u00edas urinarias
Urocultivo
Anatom\u00eda y flora normal.

El tracto urinario esta formado por los ri\u00f1ones, ur\u00e9teres, vejiga y la uretra. Todas las \u00e1reas del tracto urinario de un ser humano son normalmente est\u00e9riles con excepci\u00f3n de la uretra en su porci\u00f3n distal que alberga una microflora residente que coloniza su epitelio de transici\u00f3n y consiste en: Staphylococcus saprophyticus,

Staphylococcus epidermidis, Corynebacterium sp, bacilos Gram negativos y ocasionalmente levaduras.
Infecci\u00f3n del tracto urinario.

La infecci\u00f3n del tracto urinario (I.T.U.) es una de las infecciones bacterianas m\u00e1s frecuentes en la poblaci\u00f3n general (especialmente en mujeres) y el urocultivo es el m\u00e9todo que a\u00edsla a los agentes etiol\u00f3gicos responsables. El microorganismo mas com\u00fanmente aislado en pacientes ambulatorios con ITU esE sche rich ia

coli.
Al recolectar una muestra para sembrar un urocultivo debe de evitarse la contaminaci\u00f3n con flora vaginal, perineal y
de uretra anterior. Por lo que se deben de seguir las siguientes indicaciones:
Ni\u00f1os y adultos que controlan esf\u00ednteres.
La muestra de elecci\u00f3n es el chorro medio de la micci\u00f3n. Lo ideal es que la orina sea la primera de la ma\u00f1ana, ya
que esta es la m\u00e1s concentrada. De no ser posible el tiempo de retenci\u00f3n deseado es de, por lo menos,
3 horas.

Mujeres: se debe asear la zona genital con agua y jab\u00f3n, de adelante hacia atr\u00e1s, secar con toalla. Se elimina el primer chorro (10 ml) y se recolecta en frasco est\u00e9ril la fracci\u00f3n siguiente (10-20 ml). Se recomienda orinar separando los labios mayores.

Hombres: se debe retraer el prepucio e higienizar el glande y surco balanoprepucial con agua y jab\u00f3n, y secar con toalla limpia. Se elimina el primer chorro (10 ml) y se recolecta en frasco est\u00e9ril la fracci\u00f3n siguiente (10-20 ml). Se desaconseja el uso de antis\u00e9pticos, ya que pueden afectar el resultado del urocultivo, provocando un descenso en el recuento de colonias.

Ni\u00f1os y adultos que no controlan esf\u00ednteres.
Utilizar bolsas colectoras para el estudio de urocultivo.

Punci\u00f3n suprap\u00fabica: Primeramente se verifica que el paciente presente globo vesical palpable, se desinfecta zona pubiana con alcohol yodado y se deja actuar 1 min., se limpia con alcohol 70% y se punza con aguja adecuada en la zona ubicada 1 o 2 cm encima del pubis. Se aspira la orina y se vuelca en frasco est\u00e9ril.

Cateterizaci\u00f3n: se utiliza en pacientes en los que habitualmente se practica el cateterismo intermitente (enfermos con vejiga neurog\u00e9nica). Sin embargo, presenta el riesgo de producir el ascenso de los microorganismos desde la uretra a la vejiga y generar as\u00ed una IU iatrog\u00e9nica. Para efectuar este m\u00e9todo se desinfecta la zona perineal, se introduce la sonda por la uretra y se recoge la porci\u00f3n media del chorro de orina que sale por la sonda. Del mismo modo pueden obtenerse muestras a partir de ureterostom\u00edas, nefrostom\u00edas o vesicostom\u00edas.

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Departamento de Patolog\u00eda Cl\u00ednica, 4\u00b0 A\u00f1o de Medicina, Apuntes de Pr\u00e1cticas de Laboratorio

Se recibir\u00e1n las muestras en la ventanilla del laboratorio de bacteriolog\u00eda. Las muestras deben de ir acompa\u00f1adas de la solicitud de cultivo especial para bacteriolog\u00eda con los siguientes datos: nombre completo del paciente, n\u00famero de registro, diagnostico probable, tipo de muestra, en caso de recibir tratamiento mencionar el nombre de \u00e9ste. Las muestras recibidas ser\u00e1n rotuladas con el nombre del paciente y ser\u00e1n guardadas en refrigeraci\u00f3n a una temperatura de 4- 8 \u00baC hasta el momento de procesarlas, no deben de pasar m\u00e1s de 24 horas.

Las muestras se cultivaran en los siguientes medios de cultivo.

\ue000Agar sangre azida
\ue000Agar EMB (eosina azul de metileno)
\ue000Agar Brolacin (Muestra en diluci\u00f3n 1:1000) En este medio se realiza la cuenta de Kass.

Las muestras ya cultivadas se dejaran incubando a un temperatura de 37\u00b0C y se revisar\u00e1n cada 24 horas hasta
completar un total de 48 horas.
Todos los cultivos se dejaran en incubaci\u00f3n por 48 horas antes de descartarlos como negativos. La primera
lectura se realizara despu\u00e9s de las 24 horas de incubaci\u00f3n.
Criterios de Kass
\ue001Las muestras con Cuenta de Kass igual o mayor de 100.000 UFC/ ml y con presencia de Leucocitos se
reportaran como positivas.
\ue001Muestras sin importar fresco y con m\u00e1s de tres tipos de bacterias se reportar\u00e1n como muestra contaminada.
\ue001En pacientes inmunodeprimidos o que provengan de consultas de oncolog\u00eda, urolog\u00eda se consideran cuenta de
Kass de 60.000 UFC/ml. Otras salas se consideran si la cuenta de Kass es igual o mayor a 100.000 UFC/ml.
Lectura de Cultivos

Al sembrar en el Agar sangre azida se espera que crezcan bacterias Gram positivas ya sea cocos o bacilos. Estas colonias pueden ser grises o blancas, adem\u00e1s pueden producir alg\u00fan tipo de hem\u00f3lisis o tener ausencia de la misma. Si hay crecimiento se realizan pruebas m\u00e1s espec\u00edficas para identificar la bacteria.

Al sembrar en el Agar EMB se espera que crezcan bacilos Gram negativos, estas colonias pueden ser fermentadoras lentas, no fermentadoras o colonias rosas secas. Posterior a ello se realizan pruebas m\u00e1s especificas para saber de que bacteria se trata, como un sistema bioqu\u00edmico, el cual consiste en distintos medios como TSI, SIM, rojo de metilo, entre otros, estos medios no sirven para ver caracter\u00edsticas de las bacterias tales como movilidad, producci\u00f3n de acido sulfh\u00eddrico entre otras, dichas caracter\u00edsticas se comparan con una tabla para identificar el agente causal. Despu\u00e9s de observar las caracter\u00edsticas e identificar el agente causal, se toma una colonia, se hace una diluci\u00f3n y se siembra en una placa con Agar Muller Hilton para realizar un antibiograma.

En esta prueba una vez sembrada la colonia, se colocan en el agar, sensidiscos impregnados con antibi\u00f3ticos a los
cuales puede ser susceptible la bacteria. Se incuba a 37\u00baC por 24 horas.
El antibiograma es una prueba que nos indica la sensibilidad o la resistencia de una bacteria hacia un antibi\u00f3tico.
En el Agar brolacin se deben contar el n\u00famero de colonias y multiplicar por 1000 y reportar CK: UFC/ml
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Departamento de Patolog\u00eda Cl\u00ednica, 4\u00b0 A\u00f1o de Medicina, Apuntes de Pr\u00e1cticas de Laboratorio
Cuadro cl\u00ednico
Las formas de presentaci\u00f3n cl\u00ednica de los pacientes con I.T.U. pueden ser muy variables:
1. Bacteriuria asintom\u00e1tica.

2. Infecci\u00f3n urinaria baja o cistitis.
3. Infecci\u00f3n urinaria alta o pielonefritis aguda.
4. S\u00edndrome uretral agudo

5. Sepsis urinaria
6. Infecciones urinarias recurrentes
Estudios realizados para las ITU
Sedimento

El sedimento de orina, realizado con una muestra correctamente recolectada, es una herramienta fundamental para la interpretaci\u00f3n del urocultivo. Sin embargo, su sensibilidad y especificidad depende de ciertos factores, como el tipo de muestra, el tiempo de retenci\u00f3n, el sexo y la edad del paciente y la presencia de otras patolog\u00edas. Se considera que un sedimento de orina no es normal cuando una gota del centrifugado de 10 ml (10 min. a 2.000 rpm) contiene m\u00e1s de 5 leucocitos por campo de 400X.

Coloraci\u00f3n de Gram

Es bien conocido que la presencia de 1 microorganismo/campo de 1000X en la coloraci\u00f3n de Gram de una gota de orina se correlaciona con un cultivo de m\u00e1s de 105 UFC/ml. Sin embargo, este procedimiento carece de sensibilidad, puesto que se est\u00e1 trabajando en el l\u00edmite de detecci\u00f3n del microscopio \u00f3ptico (1000X) y del m\u00e9todo, ya que la observaci\u00f3n de una sola bacteria se correlaciona con recuentos >105.

Adem\u00e1s de lo tedioso que resulta recorrer muchos campos antes de descartar una muestra como negativa, actualmente se sabe que muchas infecciones vesicales cursan con recuentos \u00ed1000 UFC/ml. Por otra parte, la presencia de g\u00e9rmenes contaminantes no puede inferirse en todos los casos mediante esta metodolog\u00eda

Cultivo

La siembra debe realizarse de la orina sin centrifugar con un asa calibrada, lo que permitir\u00e1 obtener una estimaci\u00f3n semicuantitativa del desarrollo microbiano. Existen numerosos medios de cultivo para sembrar una muestra de orina. La elecci\u00f3n del medio de cultivo debe contemplar la relaci\u00f3n costo-beneficio, de modo de elegir la opci\u00f3n que permita la recuperaci\u00f3n de la mayor\u00eda de los pat\u00f3genos con el menor costo posible.

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