Mg. Helda C. Del Castillo C.

Filial Norte
2
Repaso de clases anteriores
Destino de la glucosa?
Piruvato
Gluclisis

Destino del piruvato?
Anaerobios vas fermentativas
Aerobios CO
2
+ H
2
0 + energa

Respiracin celular

Liberacin de la energa de CHOs, AA y Ac grasos mediante reacciones
bioqumicas

Fases

A- La oxidacin de cidos grasos, glucosa y algunos aminocidos produce Acetil-
CoA
B- El Acetil-CoA se oxida a CO
2
en una va cclica con produccin de coenzimas
reducidas y energa
C- Oxidacin de las coenzimas en la cadena de transferencia de electrones y
generacin de ATP
Ciclo de Krebs
PROCEDENCIAS DE PIRUVATO
Fuente exgena
(Glucosa, fructosa,
VIA GLICOLITICA galactosa, Manosa)
Fuente endgena
(glucgeno almidn)


Por transaminacin
(alanina)
AMINOACIDOS Por Degradacin
(serina, triptfano)
DESTINO DE PIRUVATO EN AEROBIOSIS
Ingresa a la mitocondria, por un transportador
especfico.
Dentro de la mitocondria por descarboxilacin
oxidativa se transforma en Acetil-CoA.
Interviene un complejo multienzimtico:
piruvato deshidrogenasa.
Degradacin del piruvato

DESTINO DEL PIRUVATO EN
CONDICIONES ANAERBICAS:
FERMENTACIONES
En ausencia de O2, y en
algunas clulas, el
piruvato se metaboliza
hacia compuestos mas
reducidos para recuperar
el NAD+, necesario para
que siga actuando la va
glucoltica; manteniendo
as constante la relacin
NAD+/NADH
citoplasmtica.
FERMENTACIN LCTICA
La fermentacin es la degradacin de glucosa en
ausencia de oxgeno; comprende las reacciones
glucolticas y otras reacciones de reduccin finales.
Algunos microorganismos y las clulas musculares,
en anaerobiosis, reducen el piruvato a lactato. As
pueden regenerar el NAD+ necesario para continuar
la glucolisis.
8
SITUACIN INICIAL
Piruvato en el
citosol..
Se ha de continuar la
RESPIRACIN
CELULAR: conjunto
de etapas que
terminan la
oxidacin del
piruvato hasta CO2 y
agua generando
poder reductor para
la sntesis de ATP.
9
PASOS PREVIOS AL CAT
Paso del piruvato al
interior de la matriz
mitocondrial.
Membrana
mitocondrial
externa:
permeable
Membrana mit.
interna:
selectiva.
Pasan:
ADP y ATP
cido pirvico
10
ETAPAS DE LA RESPIRACIN
CELULAR
Oxidacin del cido pirvico.
Ciclo de Krebs
Ciclo del cido ctrico o Ciclo de los cidos
tricarboxlicos
Cadena respiratoria
11
OXIDACIN DEL PIRUVATO
Piruvato deshidrogenasa. Complejo
multienzimtico.
Se forma NADH+H
+
(en realidad 2 por
glucosa)
Producto: ACETIL COENZIMA A
COMPLEJO DE PIRUVATO
DESHIDROGENASA
Se encuentra en la matriz
mitocondrial
No forma parte del Ciclo de
Krebs
Sintetiza Acetil-CoA
3 enzimas distintas y cinco
coenzimas.
E1: Piruvato
deshidrogenasa
E2: Dihidrolipoamida
transacetilasa
E3: Dihidrolipoamida
deshidrogenasa
5 Coenzimas: TPP,
Acido lipoico, FAD,
NAD, CoA-SH
Las cadenas de E1 contienen
TPP ( pirofosfato de tiamina),
E2: c. Lipoico unido
covalentemente

E3 : FAD fuertemente unido
REGULACIN
La actividad de la
PDH est regulada
alostricamente por
varios metabolitos,
como se aprecia en
la siguiente figura.
Los metabolitos que
indican alta energa
celular la inhiben y el
AMP la activa.
16
Ciclo de los cidos tricarboxlicos
(Ciclo de Krebs).
LOCALIZACION: Mitocondria
FUNCION: catablica, oxidacin de glcidos, cidos
grasos y protenas para obtener ENERGIA
VISION GENERAL: es una serie cclica de 8 reacciones que oxidan el Acetil- CoA a CO
2
y con
obtencin de: ATP, NADH+H y FADH2

PROCESO AEROBICO: la ausencia de O2 inhibe el ciclo
CICLO DE KREBS
Definicin :

Es un conjunto de
reacciones
bioqumicas que
utilizan los organismo
aerobios para liberar
la energa qumica
almacenada en el
grupo acetilo de los
carbonos de la acetil-
CoA.



PAPEL CENTRAL DEL CICLO DEL CIDO CTRICO
EN EL METABOLISMO

La degradacin de los componentes
celulares, glucgeno, protenas o cidos
grasos, y de los nutrientes termina
produciendo Acetil-CoA, molcula en la
que convergen muchas rutas
degradativas.
El Acetil-CoA se degrada en el ciclo de
Krebs para producir energa cuando las
necesidades celulares as lo demanden.
A este ciclo metablico tambin se le
denomina como ciclo del cido ctrico o
ciclo de los cidos tricarboxlicos (C.A.T.)
Este ciclo se genera en
condiciones aerobias
Cuando no hay oxigeno
disponible en la clula, la
velocidad del ciclo
disminuye o se inhibe
completamente
Se lleva a cabo en la matriz
mitocondrial de todas las
clulas del organismo (
excepto eritrocitos)

CICLO DE KREBS
Durante una vuelta del
ciclo de Krebs, a partir de
una molcula de acetil-
CoA, se producen:

A. Tres molculas de NADH
B. Una molcula de FADH2
C. Dos molculas de CO2
D. Una molcula de GTP (
ATP),el ATP se forma por
la catalizacion de La
nuclesido difosfato
quinasa
CICLO DE KREBS
Funciones :
( va anfibolica (es
decir, catablica y
anablica al mismo
tiempo)

1. Produccin de
energa (oxidacin
de la acetil-CoA )
2. Sus intermediarios
son sustratos de
diversas reacciones
de sntesis
CiCLO DE KREBS
Reacciones;

Esta formado por ocho reacciones que tienen lugar
en dos fases:

1. El grupo acetilo de dos carbonos de la acetil-CoA
entran en el ciclo al reaccionar con el compuesto
de cuatro carbonos oxaloacetato ( reacciones 1-4)

2. El oxaloacetato se regenera de forma que pueda
reaccionar con otra acetil-CoA ( reacciones 5-8)

CICLO DE KREBS
1. Introduccin de dos carbonos como acetil-CoA.
El ciclo del cido ctrico comienza con la
condensacin del la acetil-CoA para formar
citrato, catalizado por la enzima citrato sintasa
CICLO DE KREBS
2. El citrato se convierte de forma reversible en
isocitrato por la aconitasa
3. El isocitrato se oxida para formar NADH y CO2.
la descarboxilacion oxidativa del isocitrato se produce en dos
pasos:

a. El isocitrato se oxida para formar oxalsuccinato
b. El oxalsuccinato se descarboxila para formar alfa-cetoglutarato

c. Enzima: isocitrato dehidrogenasa

4. El alfa-cetoglutarato se oxida para formar una segunda
molcula de NADH.
La conversin del alfa-cetoglutarato en succinil-Coa esta
catalizado por la actividad enzimtico del complejo alfa-
cetoglutarato deshidrogenasa
5. La ruptura de la succinil-CoA esta acoplada a una
fosforilacin a nivel de sustrato.
ruptura del enlace tioester de energa elevada de la
succinil-CoA para formar succinato, catalizado por La
enzima succinil CoA sintetasa
6. La molcula de cuatro carbonos succinato se
oxida para formar fumarato y FADH
2
la succinato deshidrogenasa (unida a la
membrana mitocondrial interna) cataliza la
oxidacin del succinato para formar fumarato
7. Hidratacin del fumarato.
el fumarato se convierte en L- malato en una
hidratacin reversible catalizada por la fumarasa
( fumarato hidratasa )
8. El malato se oxida para formar oxalacetato y un
tercer NADH
cataliza la enzima malato deshidrogenasa
Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + H
2
O ---
------->2 CO
2
+ CoA-SH + 3 NADH + FADH
2
+ GTP
+ 3 H+
Balance qumico del CAT:

34
Regulacin del Ciclo de Krebs


Regulacin alostrica de enzimas claves

Citrato sintasa
Inhibidores: NADH, Succinil-CoA, Citrato, ATP
Activadores: ADP

Isocitrato deshidrogenasa
Inhibidores: ATP
Activadores: Ca
+2
(msculo), ADP

Alfacetoglutarato deshidrogenasa
Inhibidores: Succinil-CoA, NADH
Activadores: Ca
+2
(msculo)


Regulador clave: relacin mitocondrial de
[NAD+] / [ NADH]
Cadena de transporte electrnico y
fosforilacin oxidativa..
LA MITOCONDRIA
FBRICA DE ENERGA CELULAR


ES EL SITIO DONDE TIENEN LUGAR


EL TRANSPORTE ELECTRNICO Y
LA FOSFORILACIN OXIDATIVA

Localizacin
30ATP
32ATP
La cadena transportadora de
electrones
El NADH+H y el FADH
2
, obtenidos en el
ciclo de Krebs, van a entrar en una
cadena transportadora de electrones o
cadena respiratoria, donde pasan los
electrones, de una molcula reducida a
otra oxidada, hasta el aceptor final que
ser el oxgeno molecular, que al
reducirse formar agua.
Reacciones de la cadena de transporte de
electrones

Con excepcin de la coenzima Q, todos los
miembros de esta cadena son protenas.

Pueden funcionar como enzimas como en el
caso de varias deshidrogenasas.

Pueden contener hierro como parte de su
centro hierro-azufre .

Los citocromos a y a3 contienen cobre.
Componentes de la cadena respiratoria

Transportadores de electrones
-Coenzimas hidrosolubles:

NAD+ coenzimas de las deshidrogenasas
NADP+

FMN se unen covalentemente a flavoprotenas
FAD (grupo prosttico), transportan 2 e- y 2 H
+

- Quinonas: Coenzima Q Ubiquinona, transportadores en medio no
acuoso (membrana), transporta 1 e- y libera 2 H
+
a la matriz

- Citocromos b, c, c
1
, a y a
3
: protenas con grupo prosttico hemo,
transportan 1 e-

- Protenas ferro-sulfuradas: protenas con Fe asociado a tomos de
S, transfieren 1 e- por oxidacin o reduccin del Fe

Grupos prosteVcos de
Los citocromos
Estructura
De los centros
Fe--S
Reacciones que proveen de NADH
a la cadena respiratoria
Piruvato deshidrogenasa

Isocitrato deshidrogenasa

Malato deshidrogenasa

a-cetoglutarato deshidrogenasa
CICLO DE KREBS
Sustrato + NAD
+
Producto + NADH + H
CR
Componentes de la Cadena de transporte
electrnico
Complejo enzimtico Grupos prostticos

Complejo I (NADH deshidrogenasa o FMN, FeS
NADH CoQ oxidorreductasa)
Complejo II ( succinato deshidrogenasa) FAD, FeS
o Succinato CoQreductasa)
Complejo III (citocromo bc
1
) Hemo, FeS
o Ubiquinol citocromo c oxidorreductasa)
Citocromo c Hemo

Complejo IV (citocromo oxidasa) Hemo, Cu

Complejo V (ATP sintasa)

La Cadena de Transporte de Electrones comprende
dos procesos:

1.- Los electrones son transportados a lo largo de la
membrana, de un complejo de protenas
transportadoras a otro.

2. Los protones son translocados a travs de la
membrana, desde el interior o matriz hacia el espacio
intermembrana de la mitocondria.

Esto constituye un gradiente de protones

El oxgeno es el aceptor terminal del electrn,
combinndose con electrones e iones H
+
para
producir agua.
La transferencia de electrones desde el NADH a travs
de la cadena respiratoria hasta el O
2
es un proceso
altamente exergnico.

La mayor parte de esa energa se emplea para bombear
protones fuera de la matriz.

Por cada par de electrones transferidos al O
2
los
complejos I y III bombean 4 H
+
y 2 el complejo IV.

El complejo II no transfiere H
+
ya que no atraviesa la
membrana interna como los dems.

As esta energa electroqumica generada por el
gradiente protnico impulsa la sntesis de ATP.
Flujo de electrones y protones a travs de los cuatro complejos
que forman la cadena respiratoria
El oxgeno es el aceptor terminal del electrn, combinndose con
electrones e iones H+ para producir agua.
COMPLEJO V :ATP sintasa
F
1
: 9 subunidades: a
3
b
3
g d
e y 3 sitios catalticos
Fo: Protena integral , canal
transmembrana para
protones con 3
subunidades: a, b
2
y c
12
Esta enzima es la que
transforma la energa
cintica del ATP en energa
qumica.
El Dr. Boyer (1964) recibi
el Premio Nobel al describir
la ATP sintasa.


INHIBICION DEL TRANSPORTE ELECTRNICO
Inhibidores del transporte electrnico
Inhiben solamente el transporte de e
-


Inhibidores de la fosforilacin
Inhiben la sntesis de ATP, indirectamente el transporte
de e
-


Desacoplantes
Impiden la sntesis de ATP pero no inhiben el transporte
de electrones. Actan como ionforos eliminando el
gradiente de protones.

Inhibidores de la translocasa
Inhiben la entrada de ADP y la salida de ATP desde la
mitocondria
ACCIN DE INHIBIDORES
Inhibidores de la fosforilacin
Oligomicina:
Bloquea el flujo de protones a travs de F
0
, impidiendo la
fosforilacin.
Se inhibe la sntesis de ATP
Se acumulan protones y se produce una fuerza inversa
detenindose el transporte de electrones.

Desacoplantes:
Compuestos que impiden la sntesis de ATP, pero no bloquean el
flujo de electrones, de esa manera desacoplan la cadena
respiratoria de la fosforilacin oxidativa.
El 2,3-dinitrofenol (DNF) transfiere iones hidrgeno desde el lado
externo hacia la matriz y anula el gradiente de protones creado por
la cadena respiratoria.
POSTULADOS DE LA TEORIA QUIMIOSMOTICA
Pasaje de H
+
durante la transferencia de electrones desde la
matriz al espacio intermembrana.

Generacin de un gradiente electroqumico : flujo electrnico
acompaado de la transferencia de protones.

Los protones acumulados en el espacio intermembrana crean
una fuerza: protn-motriz, por la tendencia de volver a pasar
al interior para igualar el pH a ambos lados de la membrana.

Esa fuerza es utilizada para el pasaje de los H
+
a travs de Fo y
as activan la ATP sintasa

Sistemas de lanzaderas
Surgen de la necesidad de recuperar el NAD+ citoslico, dado que la
membrana mitocondrial es impermeable a este compuesto
Mas activa en hgado y corazn
REACCIONES ANAPLERTICAS Y
OTRAS FUNCIONES DEL CICLO
Para que el ciclo sea funcional es necesario que haya cierta concentracin de
oxalacetato, el cebador del ciclo. La degradacin de algunos aminocidos
proporciona metabolitos intermediarios del C.A.T. que pueden alimentar al
ciclo. Otra reaccin que puede suministrar oxalacetato es la de carboxilacin
del piruvato:
Piruvato + CO2 + ATP + H2O oxalacetato + ADP + Pi + 2 H+
A estas reacciones, que procuran
intermediarios al C.A.T., se les
denomina anaplerticas.
68
Interrelaciones del ciclo de Krebs con otras vas
metablicas

Va anfiblica



vas metablicas con roles anablicos y catablicos a la
vez
69
Degradacin de aminocidos
Los carbonos de los AA entran al ciclo en diferentes puntos
70
Degradacin de cidos grasos (Beta oxidacin)
71
Rol del ciclo de Krebs en el anabolismo
Reacciones anaplerticas: en rojo
72
Reposicin de intermediarios por reacciones anaplerticas
A estas reacciones, que procuran
intermediarios al C.A.T., se les
denomina anaplerticas.
73
Ciclo de Krebs, conclusiones globales
En eucariotes transcurre en la mitocondria.
Va central del metabolismo aerobio: es la va oxidativa final
en el catabolismo de los carbohidratos, cidos grasos y
aminocidos.
La accin acoplada del ciclo del cido ctrico y la cadena de
transporte de electrones son responsables de la mayora de la
energa producida.
Fuente importante de intermediarios de vas biosintticas.
BALANCE ENERGTICO DE LA
DEGRADACIN DE LA GLUCOSA
En clulas con metabolismo
aerbico, los NADH
formados en las reacciones
de oxidacin biolgica - en la
glucolisis, descarboxilacin
oxidativa del piruvato o en el
CAT- descargan sus
electrones en la cadena
respiratoria mitocondrial,
donde con la fosforilacin
oxidativa acoplada al
transporte electrnico se va
a generar abundante ATP.