PEMBUATAN PREPARAT MIKROSKOPIS DAN AWETAN
Mikroteknik
nTujuan: membuat sediaan yang dapatmendukung berbagai disiplin ilmu(histologi, fisiologi, embriologi,dsb).
n
Bahan kimia
à
padat, cair, gas dengansifat yang berbeda-beda (sangat toksik,toksik, tidak toksik)nAlat-alat:
-
alat gelas (staining jar, beker glass, gelasukur, dll)
-
Alat bukan gelas (hot plate, oven,mikrotom, pinset, dll)
Istilah-istilah dalam pembutan preparat
nFiksasinDehidrasinClearing
Fiksasi
adalah usaha untuk mempertahankan elemen-elemen sel atau jaringan agar tetap padatempatnya dan tidak mengalami perubahanbentuk atau jaringan.
Tujuan: diperleh gambaran struktursel/jaringan seperti pada aslinya
Macam fiksatif :- Sederhana (tunggal): alkohol,formalin- Majemuk (campuran): larutan Bouin(asampikrat, formalin, acidium aceticumglaciale/AAG)
Dehidrasi
Adalah penarikan molekul air dari jaringan
Tujuan : agar jaringan bebas air,sehingga jaringan lebih terawetkan
Dehidrasi dilakukan secara bertahap
Macam dehidrant : ethyl alkohol, aseton
Clearing
Adalah proses penarikan molekul dehidrasidari jaringan.
Clearing agent : xylol, toluol, minyakcengkeh, dll
Macam-macam sediaan
nSediaan sementara : supravital stainingnSediaan permanen
-
Sediaan utuh ( whole mount)
-
Sediaan irisan (beku, seloidin, parafin)
-
Sediaan untuk jaringan tipis (rentang)
-
Sediaan jaringan cair (apus untuk darah,limfe)
-
Sediaan untuk jaringan keras
Sediaan Utuh (wholemount)
nTujuan: melihat struktur internal suatuorganisme.
n
Cara : Fiksasi
à
dehidrasi
à
staining
à
clearing
à
mounting
à
labellingnContoh: pembuatan preparat wholemountembrio ayamnBahan: telur dengan umur tertentu,garam fisiologis, pewarna:hematoxylin&eosin, alkohol, formalinnAlat: gunting, pinset, gelas timbang(Ex: Whole mount embrio ayam)
SEDIAAN BEKU
Metode Parafin Tujuan : melihat struktur selCara : narkose
à
pengambilan bahan
à
fiksasi
à
washing
à
dehidrasi
à
toluol
à
infiltrasiparafin
à
penanaman (embedding)
à
pengirisan
à
affiksing
à
deparafinasi
à
staining
à
mounting
à
labellingPewarnaan (staining):
-
Zat warna asam : acid fuchsin, eosin
-
Zat warna basa : hematoxylin