Welcome to Scribd, the world's digital library. Read, publish, and share books and documents. See more ➡
Download
Standard view
Full view
of .
Add note
Save to My Library
Sync to mobile
Look up keyword
Like this
131Activity
×
0 of .
Results for:
No results containing your search query
P. 1
Uji Kualitatif Protein Dan Asam Amino

Uji Kualitatif Protein Dan Asam Amino

Ratings: (0)|Views: 16,997|Likes:
Published by Fery Afrianto

More info:

Categories:Types, Research, Science
Published by: Fery Afrianto on Jan 30, 2010
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PDF, DOC, TXT or read online from Scribd
See More
See less

05/18/2013

pdf

text

original

 
Uji Kualitatif Protein dan AsamAmino
Asam amino merupakan unit pembangunprotein yang dihubungkan melalui ikatanpeptida pada setiap ujungnya. Proteintersusun dari atom C, H, O, dan N, sertakadang-kadang P dan S. Dari keseluruhanasam amino yang terdapat di alam hanya 20asam amino yang yang biasa dijumpai padaprotein.
Gambar 1.
Struktur molekul asam aminoDari struktur umumnya, asam aminomempunyai dua gugus pada tiap molekulnya,yaitu gugus amino dan gugus karboksil, yangdigambarkan sebagai struktur ion dipolar.Gugus amino dan gugus karboksil pada asamamino menunjukkan sifat-sifat spesifiknya.Karena asam amino mengandung keduagugus tersebut, senyawa ini akanmemberikan reaksi kimia yang yangmencirikan gugus-gugusnya. Sebagai contohadalah reaksi asetilasi dan esterifikasi. Asamamino juga bersifat amfoter, yaitu dapatbersifat sebagai asam dan memberikanproton kepada basa kuat, atau dapat bersifatsebagai basa dan menerima proton dari basakuat.Semua asam amino yang ditemukan padaprotein mempunyai ciri yang sama, guguskarboksil dan amino diikat pada atom karbonyang sama. Masing-masing berbeda satudengan yang lain pada gugus R-nya, yangbervariasi dalam struktur, ukuran, muatanlistrik, dan kelarutan dalam air. Beberapaasam amino mempunyai reaksi yang spesifikyang melibatkan gugus R-nya.Melalui reaksi hidrolisis protein telahdidapatkan 20 macam asam amino yangdibagi berdasarkan gugus R-nya, berikutdijabarkan penggolongan tersebut : asamamino non-polar dengan gugus R yanghidrofobik, antara lain Alanin, Valin,Leusin, Isoleusin, Prolin, Fenilalanin, Triptofan dan Metionin. Golongan keduayaitu asam amino polar tanpa muatanpada gugus R yang beranggotakan Lisin,Serin, Treonin, Sistein, Tirosin, Asparagindan Glutamin. Golongan ketiga yaitu asamamino yang bermuatan positif pada gugusR dan golongan keempat yaitu asamamino yang bermuatan negatif padagugus R. Dari ke-20 asam amino yangada, dijumpai delapan macam asamamino esensial yaitu valin, leusin,Isoleusin, metionin, Fenilalanin, Triptofan, Treonin, dan Lisin. Asam amino essensialini tidak bisa disintesis sendiri oleh tubuhmanusia sehingga harus didapatkan dariluar seperti makanan dan zat nutrisilainnya.
Tujuan Percobaan
Percobaan ini bertujuan untukmempelajari beberapa reaksi uji terhadapasam amino dan protein.
Bahan dan Alat
Alat-alat yang digunakan adalah tabungreaksi, gelas piala, pipet tetes, pipet Mohr,kertas saring, corong, dan penangas air.Sementara bahan-bahan yang digunakanadalah albumin, gelatin, kasain, pepton,fenol, pereaksi millon, pereaksi Hopkinscole, pereaksi biuret, ninhidrin, H2SO4,NaOH, HNO3, CuSO4, HgCl2, AgNO3,(NH4)2SO4, HCl, Pb-asetat, etanol, asamasetat, dan buffer asetat pH 4,7.
Prosedur Percobaan
Uji Millon. Sebanyak 5 tetes pereaksiMillon ditambahkan ke dalam 3 mL larutan
 
protein, dipanaskan. Uji dilakukan terhadaplarutan albumin 2%, gelatin 2%, kasein 2%,pepton 2%, dan fenol 2%.Uji Hopkins-Cole. Sebanyak 2 mL larutanprotein dicampur dengan pereaksi Hopkins-Cole dalam tabung reaksi. Ditambahkan 3 mLH2SO4 pekat melalui dinding tabungsehingga membentuk lapisan dari cairan.Didiamkan, setelah beberapadetikakanterbentuk cincin violet (ungu) padapertemuan kedua lapisan cairan, apabilapositif mengandung triptofan. Uji dilakukanterhadap larutan albumin 2%, gelatin 2%,kasein 2%, dan pepton 2%.Uji Ninhidrin. Sebanyak 0.5 mL larutanninhidrin 0.1% ditambahkan ke dalam 3 mLlarutan protein. Dipanaskan selama 10 menit,diamati perubahan warna yang terjadi. Ujidilakukan terhadap larutan albumin 0.02%,gelatin 0.02%, kasein 0.02%, dan pepton0.02%.Uji belerang. Sebanyak 2 mL larutan proteinditambah 5 mL NaOH 10%, dipanaskanselama 5 menit. Kemudian ditambah 2 teteslarutan Pb-asetat 5%, pemanasandilanjutkan, diamati warna yang terjadi. Ujidilakukan terhadap larutan albumin 0.02%,gelatin 0.02%, kasein 0.02%, dan pepton0.02%.Uji Xanthoproteat. Sebanyak 2 mL larutanprotein ditambahkan 1 mL HNO3 pekat,dicampur, kemudian dipanaskan, diamatitimbulnya warna kuning tua. Didinginkan,ditambahkan tetes demi tetes larutan NaOHpekat sampai larutan menjadi basa. Diamatiperubahan yang terjadi. Uji dilakukanterhadap larutan albumin 2%, gelatin 2%,kasein 2%, pepton 2%, dan fenol 2%.Uji Biuret. Sebanyak 3 mL larutan proteinditambah 1 mL NaOH 10% dan dikocok.Ditambahkan 1-3 tetes larutan CuSO4 0.1%.Diamati timbulnya warna.Pada pengendapan protein oleh logam,oleh garam, oleh alkohol, uji koagulasi dandenaturasi protein. Kedalam 3 ml albuminditambahkan 5 tetes larutan HgCl2 2%,percobaan diulangi dengan larutan Pb-asetat 5%, dan AgNO3 5%. Sepuluh mllarutan protein dijenuhkan denganamonium sulfat yang ditambahkan sedikitdemi sedikit, kemudian diaduk hinggamencapai titik jenuh dan disaring. Laludiuji kelarutann-nya dengan ditambahkanair, untuk endapan diuji dengan pereaksiMillon dan filtrat dengan pereaksi biuret.Ditambahkan 2 tetes asam asetat 1 M kedalam tabung yang berisi 5 ml larutanprotein, kemudian tabung tersebutdiletakkan dalam air mendidih selama 5menit. Lalu diambil endapan denganbatang pengaduk, untuk endapan diujikelarutannya dengan air , sementaraendapan dengan pereaksi Millon.Disiapkan 3 tabung reaksi, tabungpertama diisi campuran sebagai berikut ;5 ml larutan albumin, 1 ml HCl 0,1 M dan 6ml etanol 95%. Ke dalam tabung keduadimasukkan5 ml larutan albumin, 1 mlNaOH 0,1 M dan 6 ml etanol 95%. Kedalam tabung ketiga 5 ml larutan albumin,1 ml buffer asetat ph 4,7 dan 6 ml etanol95%.Pada percobaan denaturasi proteinsiapkan 3 tabung reaksi, tabung reaksipertama diisi 9 ml larutan albumin dan1ml HCl 0,1 M, tabung reaksi kedua 9 mllarutan albumin dan 1 ml NaOH 0,1 M dankedalam tabung reaksi ketigaditambahkan hanya 1 ml buffer asetat pH4,7.
Data dan Hasil Pengamatan
 Tabel 1. berbagai uji kualitatif padabeberapa larutan protein
 
Keterangan:(-) = uji negative(+) = uji positf (Millon: larutan berwarnamerah, terbentuk garam merkuri dari tirosinyang ternitrasi; Hopkins-Cole: terbentukcincin violet, adanya triptofan; Ninhidrin:terbentuk warna biru, khusus untuk prolindan hidroksiprolin berwarna kuning;Belerang: terbentuk garam PbS berwarnahitam; Xanthoproteat: terbentuk warnakuning tua, adanya gugus benzena; danBiuret: terbentuk warna violet). Tabel 2. Pengaruh penambahan logam beratpada albuminKeterangan: (+) = terbentuk endapan Tabel 3. Pengendapan protein oleh garam(NH4)2SO4 Tabel 4. Uji Koagulasi pada protein Tabel 5. Pengendapan protein oleh alkoholKeterangan:
tabung I berisi 5 ml albumin, 1 mlHCl 0,1 M dan 6 ml etanol 95 %
tabung II berisi 5 ml albumin, 1 mlNaOH 0,1 M dan 6 ml etanol 95%
tabung III berisi 5 ml albumin, 1 mlbuffer asetat pH 4,7 dan 6 ml etanol95%
(+): Terbentuk endapan
(-): Tidak terbentuk endapan Tabel 6. Denaturasi protein olehpenambahan berbagai senyawaKeterangan:
tabung I berisi 9 ml albumin, 1 mlHCl 0,1 M
tabung II berisi 9 ml albumin, 1 mlNaOH 0,1 M
tabung III berisi 1 ml buffer asetatpH 4,7
(+): Terbentuk endapan
(-): Tidak terbentuk endapan
Pembahasan
Pada berbagai uji kualitatif yang dilakukanterhadap beberapa macam protein,semuanya mengacu pada reaksi yangterjadi antara pereaksi dan komponenprotein, yaitu asam amino tentunya.Beberapa asam amino mempunyai reaksiyang spesifik pada gugus R-nya, sehinggadari reaksi tersebut dapat diketahuikomponen asam amino suatu protein.Prinsip dari uji millon adalah pembentukangaram merkuri dari tirosin yang ternitrasi. Tirosin merupakan asam amino yangmempunyai molekul fenol pada gugus R-nya, yang akan mem-bentuk garammerkuri dengan pereaksi millon. Dari hasilper-cobaan, diketahui bahwa protein

Activity (131)

You've already reviewed this. Edit your review.
1 hundred reads
1 thousand reads
Land Situmeang liked this
mbakdi liked this
Tuti Bee liked this
Gustina Nuzula liked this
Edison Manik liked this
Masita Ntuw Itha liked this

You're Reading a Free Preview

Download
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->