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Manual de Laboratorio
APENDICE “A”
COMPOSICION Y PREPARACION DE MEDIOS
DE CULTIVO
171
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Fórmula:
Extracto de carne............................3 g
Peptona...........................................5 g
Agar...............................................15 g
Método de preparación:
Fórmula:
Extracto de carne............................3 g
Peptona...........................................5 g
Método de preparación:
172
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Fórmula:
Carbohidrato deseado........................... 5 g
Método de preparación:
Base de Caldo Rojo de Fenol. Bacto Phenol Red Broth Base. (Difco).
Fórmula:
Extracto de carne...........................3 g
173
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Método de preparación:
Fórmula:
Extracto de carne....................... 3 g
Peptona...................................... 5 g
Gelatina.................................. 120 g
Método de preparación:
Fórmula:
Extracto de carne......................... 3g
Peptona........................................ 5g
174
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Nitrato de Potasio........................ 1g
Método de preparación:
Fórmula:
Extracto de Levadura..................................0.1 g
Fosfato de Potasio, Monobásico.................9.1 g
Fosfato de Potasio, Dibásico.......................9.5 g
Urea, Difco...................................................20 g
Rojo de Fenol............................................0.01 g
Método de preparación:
Fórmula:
Extracto de carne...........................3 g
Extracto de Levadura.....................3 g
175
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Peptona........................................ 15 g
Peptona Proteosa, Difco.............. 5 g
Dextrosa....................................... 1 g
Lactosa........................................ 10 g
Sacarosa...................................... 10 g
Sulfato Ferroso............................ 0.2 g
Cloruro de Sodio............................ 5 g
Tiosulfato de Sodio...................... 0.3 g
Agar............................................. 12 g
Rojo de Fenol.......................... 0.024 g
Método de preparación:
Fórmula:
Extracto de carne...........................3 g
Peptona........................................30 g
Hierro peptonizado, Difco............0.2 g
Tiosulfato de Sodio..................0.025 g
Agar................................................3 g
176
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Método de preparación:
Fórmula:
Sulfato de Magnesio..............................0.2 g
Difosfato de Amonio..................................1 g
Fosfato Dipotásico....................................1 g
Citrato de Sodio........................................2 g
Cloruro de Sodio.......................................5 g
Agar........................................................15 g
Azul de Bromotimol..............................0.08 g
Método de preparación:
Fórmula:
177
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Peptona amortiguada............................. 7 g
Fosfato Dipotásico.................................. 5 g
Dextrosa................................................. 5g
Método de preparación:
Fórmula:
Casitona.................................................. 20 g
Cloruro de Sodio..................................... 5 g
Dextrosa.................................................. 10 g
Agar........................................................ 20 g
Tioglicolato de Sodio, Difco...................... 2 g
Sulfoxilato Formaldehído de Sodio........... 1 g
Azul de Metileno................................ 0.002 g
Método de preparación:
Fórmula:
Extracto de Levadura................................5 g
178
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Casitona.................................................. 15 g
Dextrosa................................................. 5.5 g
Cloruro de Sodio.................................... 2.5 g
L-Cisteína, Difco.................................... 0.5 g
Tioglicolato de Sodio.............................. 0.5 g
Agar..................................................... 0.75 g
Resarzurina........................................ 0.001 g
Método de preparación:
Fórmula:
Neopeptona, Difco..................................10 g
Dextrosa..................................................40 g
Agar........................................................15 g
Método de preparación:
179
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Fórmula:
Triptona.....................................................5 g
Extracto de Levadura.............................2.5 g
Dextrosa (Glucosa)...................................1 g
Agar........................................................15 g
Método de preparación:
Fórmula:
Extracto de carne.............................. 3g
Peptona............................................. 5g
Lactosa.............................................. 5g
Método de preparación:
180
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Fórmula:
Peptona...................................................10 g
Bilis de Buey......................................... .20 g
Lactosa...................................................10 g
Verde Brillante.................................0.0133 g
Método de preparación:
Fórmula:
Triptosa............................................... 20 g
Lactosa................................................. 5 g
Sales Biliares No. 3........................... 1.5 g
Fosfato Dipotásico................................ 4 g
Fosfato Monopotásico....................... 1.5 g
Cloruro de Sodio................................... 5 g
Método de preparación:
181
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Fórmula:
Peptona...................................................10 g
Lactosa...................................................10 g
Fosfato Dipotásico.................................3.5 g
Agar........................................................15 g
Fucsina Básica...................................... 0.5 g
Sulfito de Sodio..................................... 2.5 g
Método de preparación:
Si el Agar Endo es inoculado el mismo día, puede ser usado sin esterilizar en
autoclave. Bajo estas condiciones el medio necesita ser calentado solamente a
ebullición para disolver completamente antes de vaciarlo en las placas.
Fórmula:
Extracto de Levadura............................1.2 g
182
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Peptona de Caseína.............................3.7 g
Tiopeptona............................................3.7 g
Triptosa.................................................7.5 g
Lactosa.................................................9.4 g
Fosfato de Potasio, Dibásico...............3.3 g
Fosfato de Potasio, Monobásico.........1.0 g
Cloruro de Sodio..................................3.7 g
Desoxicolato de Sodio........................ 0.1 g
Lauril Sulfato de Sodio........................0.05 g
Sulfito de Sodio...................................1.6 g
Fucsina Básica................................... 0.8 g
Agar..................................................... 15 g
Método de preparación:
NOTAS:
Si se usan cajas Petri más grandes distribuir suficiente medio para dar una
profundidad equivalente a las de las cajas de 60 mm.
Fórmula:
Triptosa...................................................10 g
Extracto de Levadura...............................3 g
Peptona Proteosa No. 3, Difco.................5 g
Lactosa................................................12.5 g
Sales Biliares No. 3.............................. 1.5 g
Cloruro de Sodio......................................5 g
Agar........................................................15 g
183
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Azul de Anilina........................................0.1 g
Método de preparación:
Fórmula:
Método de preparación:
184
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Fórmula:
Triptona............................................ 15 g
Extracto de Levadura....................... 10 g
Citrato Férrico...................................0.5 g
Sulfito de Sodio.................................0.5 g
Tioglicolato de Sodio.........................0.1 g
Monooleato Sorbitán.......................0.05 g
Sulfadiazina....................................0.12 g
Sulfato de Polimixina B...................0.01 g
Agar.................................................. 15 g
Método de preparación:
Fórmula:
Infusión de cerebro........................12.5 g
Infusión de corazón...........................5 g
Peptona Proteosa............................10 g
Glucosa.............................................2 g
Cloruro de Sodio...............................5 g
Fosfato de Sodio, Monobásico........2.5 g
Agar.................................................15 g
185
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Método de preparación:
25. AGAR DE BILIS Y ESCULINA (BEA). BACTO BILE ESCULIN AGAR. (Difco)
Fórmula:
Extracto de carne.................................3 g
Peptona............................................... 5 g
Bilis de Buey......................................40 g
Esculina................................................1 g
Citrato Férrico...................................0.5 g
Agar...................................................15 g
Método de preparación:
Fórmula:
186
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Extracto de carne.................................3 g
Triptona...............................................5 g
Dextrosa (Glucosa)..............................1 g
Agar...................................................15 g
Método de preparación:
Fórmula:
Peptona Bacteriológica......................20 g
Glucosa................................................5 g
Cloruro de Sodio..................................5 g
Fosfato Monobásico de Sodio..........2.7 g
Fosfato Dibásico de Sodio................2.7 g
Azida de Sodio..................................0.2 g
Método de preparación:
Fórmula:
187
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Peptona Bacteriológica......................................20 g
Glucosa...............................................................5 g
Cloruro de Sodio..................................................5 g
Fosfato de Sodio, Monobásico.........................2.7 g
Fosfato de Sodio, Dibásico...............................2.7 g
Azida de Sodio................................................. 0.3 g
Solución Acuosa de Etil-Violeta 0.01% (P/V).... 5 mL
Método de preparación:
Fórmula:
Casitona (Difco).................................20 g
Suero de Ternera o Caballo.............100 mL
Penicilina...................................500,000 U
Estreptomicina.............................50,000 µg
Agua Bidestilada...............................900 mL
Método de preparación:
Fórmula:
188
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Casitona (Difco).................................20 g
Acido Fólico........................................ 2 mg
Glucosa...............................................1 g
Suero Fetal de Ternera (Fluido)....... 50 mL
Penicilina..................................500,000 U
Estreptomicina............................50,000 µg
Agua Bidestilada..............................950 mL
Método de preparación:
NOTA:
Fórmula:
Casitona (Difco).......................................20 g
Cloruro de Sodio........................................5 g
Glucosa.....................................................1 g
Acido Fólico............................................. 2 mg
Biotina.....................................................20 µg
Penicilina...................................... 500,000 U
Estreptomicina............................... 50,000 µg
Agua Bidestilada.................................1000 mL
189
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Método de preparación:
Fórmula:
Recomendado para algas de agua dulce, especialmente: Chlorella sp., Volvox sp.
y Scenedesmus sp.
Fórmula:
Nitrato de Sodio.................................. 10 g
Cloruro de Calcio Dihidratado............... 1 g
Sulfato de Magnesio Heptahidratado... 3 g
Fosfato de Potasio, dibásico................. 7 g
Fosfato de Potasio, monobásico............3 g
Cloruro de Sodio....................................1 g
Método de preparación:
Etilendiamintetracético........................50 g
Hidróxido de Potasio...........................31 g
Agua...............................................1000 mL
190
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
* Acido Bórico................................11.42 g
Agua destilada...............................1000 mL
Método de preparación:
Fórmula:
* Solución Basal
Nitrato de Sodio........................................................... 3.4 mg
Fosfato de sodio, dibásico Dodecahidratado.......... 0.925 mg
Cloruro de Manganeso Tetrahidratado..................... 14.4 µg
Silicato de Sodio Nonahidratado............................. 10.14 mg
Sulfato Ferroso Heptahidratado................................ 60.0 µg
Etilendiamintetracético de Sodio Dihidratado........ 0.803 mg
Vitamina B12 *................................................................1 mL
Biotina *..........................................................................1 mL
Tiamina HCl *................................................................ 1 mL
Agua Destilada........................................................ 1000 mL
*(0.5 mg en 100 mL de agua)
191
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Método de preparación:
Fórmula:
pH final 7.2
Fórmula:
192
MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio
Método de preparación:
193