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celulas LE

celulas LE

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Tecnica para búsqueda de celulas LE
materiales:
tubos de macro-hematocritoportasfrasquito con 4-8 perlas de vidrio y 1 gota de hepaerina jeringa con aguja gruesa, de 15 cm de largoembudo
Introduccion:
El Lupus Eritematoso Sistemico es una enfermedad autoinmune,que afecta a muchos tejidos y organos como articulaciones, piel,sistema nervioso, riñon, corazon, pulmon, sangre, higado, bazo y ojos.Las celulas LE son polimorfonucleares que fagocitaron restosnucleares alterado, proveniente de la destruccion del nucleo de otrosleucocitos, por el llamado
Factor LE
(factor nuclear). Este es
Ig G-anti ADN
que se fija a la superficie del nucleo y determinaalteraciones en la cromatina; y entonces al ser recubierto poranticuerpos, es fagocitado por los neutrofilos.El objetivo es hallar neutrofilos que tengan adherido an susuperficie restos nucleares, o bien que los restos esten en su interior.Existen 2 metodos (entre otros)
 A) Metodo sin coágulo:
1- Sacar sangre al paciente, y colocar en frasquito con las perlasque posean 1 gota de heparina.2- Dejarlo rotar en el agitador por 30 minutos, o bien agitarvigorosamente por 5 a 10 minutos para generar la lisis deleucocitos.3- Llevar la muestra a estufa de 37 ºC entre 1 a 4 horas, para darletiempo a los leucocitos enteros a fagocitar los restos de loslisados y que decanten los globulos del plasma.4- Con la jeringa de aguja larga aspirar la capa de leucocitos, en lainterface plasma-globulos rojos y descargar dentro de 2 a 4tubos de macrohematocrito.5- Centrifugar a muy baja velocidad (500-1000 rpm), por 5minutos.6- Aspirar nuevamente con la jeringa la capa de leucocitosde lostubos, y descargar en los portas, y realizar los extendido conextensor.7- Colorear por el metodo de May Grunwald - Giemsa y ver con
 
objetivo de inmersion. 
B) Método con coágulo:
1- Se sacan unos 5 a 10 ml de sangre y se la deja coagular durante2 horas a 37 ºC.2- Centrifufar a 3500 rpm por 10 minutos.3- Eliminar el suero y depositar el coagulo sobre varias capas degasa, y éstas sobre un embudo.4- Aplastar el coagulo con una varilla y recojer el producto en untubo de ensayo.5- Pasar el liquido obtenido a un tubo de macrohematocrito con la jeringa con aguja larga, y centrifugar 15minutos a 2000 rpm.6- Usando la misma jeringa, eliminar primero el suero, y luegotomar la capa de leucocitos y depositar en portas para hacerextendidos.7- Colorear por el metodo de May Grunwald - Giemsa y ver conobjetivo de inmersion.
Observacion e interpretacion:
Buscar los campos bien coloreados y con las celulas bienseparadas, evitando lo observacion de celulas "pegoteadas" por efectode la lisis y la extension.La prueba es positiva cuando se hallan leucocitos que fagocitaronrestos nucleares de los lisados, o bien los tenga adheridos en susuperficie, que se notara por la diferencia de color entre el restonuclear y el nucleo de leucocito entero, y se informara "Se observancelulas LE"El "Fenomeno de Roseta" se debe a la adhesion de 2 o masneutrofilos a un resto nuclear. Es raro de observar, y se debediferenciar de las celulas "pegoteadas" propias de extendido.La presencia de leucocitos vacuolados no indica necesariamentela presencia de celulas LE, ya que fagocitaron cualquier resto celular.La prueba no es totalmente especifica, debido a queenfermedades autoinmunes tambien generan celulas LE, y no tienegran sensibilidad, ya que es negativa en 30% de pacientes con lupus.Esto se explica por el tratamiento con corticoides en estos enfermos,que inhibe la formacion de este fenomeno, por lo actualmente no tienevalor diagostico y es necesario realizar otras pruebas, tal como a
 
busqueda de anticuerpos, que son mas sensibles y especificas.Algunos laboratorios sugieren que se confirme la presencia deanticuerpos antinucleares (FAN/ANA) antes de buscar e informar lascelulas LE, ya que es una tecnica con alto error. Ademas no esespecifica para Lupus, y esta cayendo en desuso. Sin embargo, paradiagnosticar LES, es uno de los 10-15 parametros a considerar paraconfirmar la enfermedad.
Imagenes de Celulas LE:

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