Polimorfismo no Gene da Cadeia

Pesada β da Miosina (CPβM)

 Polimorfismo
 Variação numa sequência do genoma;

 Normalmente não é patogénico nem tem expressão

fenotípica;

 Exemplos comuns de expressão fenotípica:

• Esquerdino/destro

• Grupos sanguíneos
 Miosina
 Proteína que, com a actina e em presença de ATP,
é responsável pela contracção muscular;

 Principal componente dos microfilamentos;

 Constituída por duas cadeias pesadas e duas leves.

Miocardiopatia Hipertrófica
Familiar
 O que é?
 Mutação no gene que codifica a cadeia pesada da
isoforma β na miosina.
 O que é?
• Doença hereditária

• Dominante autossómica (≈50%)

 Riscos
 Arritmia

 Paragem cardíaca

 Morte súbita

 Adultos jovens

 Desportistas
 Como ocorre?
 Desorganização das células do músculo cardíaco;

 Aumento da espessura da parede do coração;

 Hipertrofia ventricular.
 Sintomas
 Intolerância ao exercício físico;

 Desmaio.

 Dor no peito;
 Sintomas

 Ritmo cardíaco aumentado (taquiarritmias);

 Ritmo cardíaco irregular (arritmias);

 Sopro cardíaco.
 Enzima BamHI
 Enzima de Restrição;

 Sequência de reconhecimento GGATCC;

 Catalisa a quebra de ligações fosfodiéster.

 RFLP
RFLP é uma técnica em que os organismos podem ser
diferenciados através da análise de padrões
provenientes da clivagem de DNA.

Os fragmentos de DNA obtidos são separados

por electroforese em gel de agarose.

Técnica usada na determinação de doenças genéticas, na

determinação do risco de determinadas doenças e em
testes de paternidades.
 A – Indivíduo homozigótico para
o polimorfismo, sem local de
restrição

B – Indivíduo homozigótico
para o polimorfismo, com local
de restrição

Figura 1 – Análise de Restrição

C – Indivíduo heterozigótico
 PCR / RFLP
O isolamento de DNA suficiente para se realizar a
RFLP é demorado e complicado, por isso é usada a
técnica de PCR para amplificar quantidades específicas
de DNA (2-3h) nas quantidades necessárias para se
analisar em RFLP.

Deste modo é analisada uma quantidade maior de amostras

em menos tempo.
 Protocolo
1. Isolamento de DNA de núcleos de leucócitos

2. Quantificação do DNA isolado

3. Amplificação por PCR de um fragmento de 248pb do

gene da CPβM

4. Análise de restrição

5. Electroforese em gel de agarose do fragmento de DNA

amplificado por PCR e digerido com BamHI