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CARBOHIDRATOS Y ÁCIDOS
ORGÁNICOS
Introducción
CARBOHIDRATOS
Grupo de compuestos formado por carbono (C), hidrógeno (H) y
oxígeno (O).
- Monosacáridos (1 a 6 carbonos)
- Polisacáridos (2 monosacáridos)
- Alcoholes polihídricos (reducción de monosacárido)
Metabolismo
Fermentación.
Respiración
Fotosíntesis
Fermentación
MR: VP:
Añadir 5 gotas de rojo Añadir 6 gotas de α-
de metilo naftol y 2 gotas de KOH-
creatina (dejarlo reposar
de 20 a 30 min)
4. Utilización de ácidos orgánicos
Incubar a
37°C por 24 h
Sembrar el tubo
con caldo
malonato con una
asada
INTERPRETACIÓN DE
RESULTADOS
Fermentación de carbohidratos en tubos de Durham
Principio
Diferenciación de enterobacterias.
Composición
Extracto de carne 1 g
Proteosa peptona No. 3 10 g
Cloruro de sodio 5g
Rojo fenol 0.018g
Agua 1000 ml
pH a 7.4
Fermentación de carbohidratos en tubos de Durham
Positivo (+):
a) Producción de ácido: color
amarillo, pH= 6.8
b) Producción de gas: burbuja de
gas presente en el tubo de
Durham
Negativo (-):
a) Producción de ácido: el
indicador no vira. Color rosa
rojizo
b) Producción de gas: ausencia de
burbuja
2. Fermentación de carbohidratos en medio de Kligler
Principio
Kligler Iron Agar (KIA), ademas de caseina y peptonas de carne, contiene lactosa y dextrosa, que permiten la
diferenciacion de las especies de bacilos entericos según el cambio de color del indicador de pH rojo fenol
como respuesta al acido producido durante la fermentacion de estos azucares.
Galactosidasa
Lactosa ————————> Glucosa + galactosa
Ciclo de Krebs
Glucosa o galactosa ———————> CO 2 + H2O + energía
Composición
Extracto de carne (de vaca)
Extracto de levadura.
Peptona
Peptona proteosa
Lactosa
Glucosa (dextrosa)
Sulfato ferroso, FeSO4 • 7H2
Citrato de amonio férrico (50/50)
O Citrato férrico, FeC6H5O7
Citrato de amonio [(NH4)3C6H5O7]
Cloruro de sodio, NaCl
Tiosulfato de sodio, Na 2S2O3 • 5H2O
Rojo fenol
Agar
Agua desionizada
2. Fermentación de carbohidratos en medio de Kligler
Principio
La prueba de rojo de metilo (MR) es una prueba cualitativa basada en el uso de
un indicador de pH, el rojo de metilo, para determinar la concentración de ion
hidrógeno (pH) cuando un microorganismo fermenta la glucosa.
La concentración de ion hidrógeno depende de la relación de gases (CO 2 y H2)
Los diferentes patrones de fermentación se deben a las variaciones en las
enzimas relacionadas con el metabolismo del ácido pirúvico en el microorganismo
Composición
Polipeptona o peptona de carne
tamponada
o digerido pancreático de caseína
y digerido péptico de tejidos
animales
Glucosa (dextrosa)
Agua desionizada
3. Fermentación de carbohidratos
Prueba rojo de metilo
Principio
La prueba de Voges-Proskauer (VP)
se basa en la detección de acetoína,
un producto final neutro derivado del
metabolismo de la glucosa. La glucosa
es metabolizada a ácido pirúvico, el
principal intermediario en la glucólisis.
A partir del ácido pirúvico, las
bacterias pueden seguir muchos
caminos metabólicos; la producción de
acetoína es una de las vías
metabólicas de la degradación de la
glucosa en las bacterias
Composición
Polipeptona o peptona de carne
tamponada
o digerido pancreático de caseína
y digerido péptico de tejidos
animales
Glucosa (dextrosa)
Agua desionizada
3. Fermentación de carbohidratos
Prueba de Voges-Proskauer
Principio
Agar-citrato de Simmons
Positivo (+):
Crecimiento con un intenso color azul
en el pico de flauta.
pH= 7.6
Negativo (-):
Ausencia de crecimiento y ningún
cambio en el color (verde).
pH= 6.8
Caldo Malonato
Principio
Sulfato de amonio 2g
Fosfato dipotásico 0.6g
Fosfato monopotásico 0.4g
Cloruro de sodio 2g
Malonato de sodio 3g
Agua 1000ml
pH= 6.7
Caldo Malonato
Positivo (+):
a) Reacción alcalina. pH 7.6
b) Color azul pálido a color azul
Prusia en todo el medio.
Ácido - + + + + + + +
Glucosa
Gas + + - + - - - -
Ácido - - + + - + - +
Sacarosa
Durham
Gas + + - + - - - -
Ácido - + - + + + - -
Manitol
Gas + - - + - - - -
Glucosa + - + + + + - +
Lactosa - - - - - + + +
Kligler
Gas + + - - - - - -
H2S - - - + + - - +
RM - + - + + + - +
VP + - + - - - - -
Otras
Citrato + - - + - - + +
Malonato + - - - - - + -