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DEGRADACIÓN DE PETRÓLEO POR BACTERIAS HIDROCARBUROCLÁSTICAS

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PRACTICA N°5DEGRADACION DE PETROLEO POR BACTERIAS HIDROCARBUROCLASTICAS
I.
 
INTRODUCCIÓN
La industria petroquímica es importante en una sociedad moderna, no obstante la falta de unprograma de protección ambiental, hace que el medio ambiente se contamine al producirsederrames de petróleo, principalmente de crudo, por un deterioro de los oleoductos,descargas de efluentes contaminados, afloramientos naturales a través de fisuras de lacorteza terrestre y debido a la producción, transporte y almacenamiento de este recursonatural (3).El petróleo crudo es una mezcla extremadamente compleja y variable de compuestosorgánicos, donde la mayoría de los ellos son hidrocarburos, que varían en peso moleculardesde el gas metano hasta los altos pesos moleculares de alquitranes y bitúmenes. Estoshidrocarburos pueden presentarse en un amplio rango de estructuras moleculares: cadenaslineales y ramificadas, anillos sencillos, condensados o aromáticos. Los dos grupos principalesde hidrocarburos aromáticos son los monocíclicos, el benceno, tolueno y xileno (BTEX) y loshidrocarburos policíclicos (PAHs) tales como el naftaleno, antraceno y fenantreno (2).Los dispersantes químicos utilizados para favorecer la biorremediación de los ambientescontaminados pueden causar un mayor impacto ecológico que el mismo derrame, por sutoxicidad y recalcitrancia a la biodegradación. Por tanto, una mejor alternativa de solución esel proceso de biorremediación, que es el tratamiento biológico del suelo, aire y agua,mediante la biodegradación de compuestos tóxicos para transformarlos en compuestos demenor o ningún impacto ambiental. Así en la biodegradación de hidrocarburos, se utilizanbacterias con alta capacidad degradativa, entre estas:
Brevibacterium, Spirillum, Xanthomonas, Alcaligenes, Arthrobacter, Nocardia, Flavobacterium, Vibrio, Achromobacter, Acinetobacter, Micrococcus, Pseudomonas aeruginosa, Serratia rubidae, Bacillus sp.,Pseudomonas mendocina, Pseudomonas aureofasciens,
etc., las cuales disminuyen laconcentración de hidrocarburos presentes en el ambiente y al mismo tiempo son inocuaspara la salud y el medio ambiente. Estas bacterias producen bioemulsificantes ybiosurfactantes que disminuyen la tensión superficial entre el petróleo y el medio acuosofacilitando el acceso microbiano a la fuente de carbono insoluble para su degradación (1).Es por ello que el presente trabajo tiene como objetivo fundamental evaluar el potencial debiodegradación de hidrocarburos que tiene un consorcio bacteriano recientemente aislado,determinando la biomasa inicial y final en el biorreactor, y que sirva como una alternativapara la solución de los problemas generados por estos compuestos en la industria petroleraperuana.
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II.
 
MATERIALESMaterial biológico:
 
Cepas mixtas de BacteriasHidrocraburoclásticas
 
Equipo
:
 
Balanza analítica
 
Incubadora
 
Biorreactor burbujeado.
Cristalería:
 
Matraz Erlenmeyer de 500 y 1000mL
 
Pipetas de 5 y 10 mL
 
Vaso de precipitados de 250 y 1000mL
 
Tubos de Ensayo 18 x 150
 
Tubos de Ensayo 18 x 150
 
Placas petri
 
Frasco Schott
Utensilios
:
 
Asa y porta-asa microbiológica
 
Mechero
 
Pinzas de disección
 
Perlas de vidrio
Varios
:
 
Algodón
 
Papel Craff 
 
Papel aluminio
 
Ligas
 
Cinta de pH.
Insumos y Reactivos:
 
Caldo Petróleo al 5%
 
Agar Nutritivo
 
Agar Plate Count
 
NaCl
 
Agua destilada
III.
 
PROCEDIMIENTOa)
 
REACTIVACIÓN DE LA CEPA
Se repicó por estría dos cultivos mixtos de bacterias hidrocarburoclásticas aisladas entubos con agar nutritivo. Incubar a 37ºC por 18 a 24 horas.
b)
 
PREPARACIÓN DEL INÓCULOProliferación celular:
Se sembró en toda la superficie de 2 placas con agar nutritivo e incubó a 37ºC por 24horas.
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