LINFOCITOS T

inmunología básica,
2010

Sunday, May 30, 2010

 Reconocimiento Ag
por Tc exhibe
restricción mediada
por MHC.
Zinkernagel & Doherty, (1975) J Exp
Med 141:502
P.N 1996

Sunday, May 30, 2010

Sunday, May 30, 2010
 Evidencia en apoyo
al modelo de MHC
“alterado”
Kappler & Marrack (1981), J Exp Med
153:1198

Sunday, May 30, 2010

 TCR unido a membrana
No hay TCR soluble
TCR específico para MHC:péptido
TCR:CD3

TCR alfa:beta
TCR gamma:delta

Sunday, May 30, 2010

 TCR:CD3

ITAM = immunoreceptor tyrosine-based activation motif

ITIM = immunoreceptor tyrosine-based inhibition motif

Sunday, May 30, 2010

Sunday, May 30, 2010
Sunday, May 30, 2010
 Moléculas accesorias de T y sus ligandos.
Algunas fortalecen interacciónT:APC, o T:blanco; otras
actúan en señales de transducción, algunas en ambas.

Sunday, May 30, 2010

 sinapsis inmunológica
La sinapsis describe el
B agrupamiento de
CLA+ CD2 LFA-3 Antigen- pares específicos de
T cell presenting ligandos y receptores
cell en la interfase entre
CD4 T: APC
a
Tcr b HLA-D
CD3
CD28 CD80
CD28 CD86
Ciertos estímulos, como
TNF-alfa, aumentan la
LFA-1 ICAM-2 expresión de moléculas
MHC y de CD80 y CD86
LFA-1 ICAM-1 en CDs, muy potentes
APC [adalimumab,
infliximab, etanercept,
golimumab, certolizumab].

Sunday, May 30, 2010

 Timo

Sunday, May 30, 2010

 Timo no tiene linfáticos aferentes ni HEVs

Sunday, May 30, 2010

 Nidos en corteza tímica.
Maduración secuencial expresada por TCR
y co-receptores CD4 y CD8

Sunday, May 30, 2010

 linfos T se “educan” en dos sitios:

• INTRA- TIMO • EXTRA- TIMO

• Tolerancia • Tolerancia
central: DCs periférica: T naives,
eliminan T que mueren o sufren
reconocen Ag anergia, por falla
propios en cruzar TCR o
abundantes por falta en co-
estimulación

Sunday, May 30, 2010

 La diversidad Ag potencial se reduce en la maduración,
mecanismos de selección clonal (+) y (-).
Maduración solo de clonas restringidas por MHC, no reactivas contra
lo propio

Sunday, May 30, 2010

 Selección (+) para restricción MHC

células
examinadoras

supervivencia de T cuyo TCR sí reconoce MHC propio:

repertorio sujeto a restricción por moléculas MHC.
¿Acaso poseo moléculas MHC “ajenas?
Restricción tiene que ver con atención: T debe enfocarse en péptidos presentados
en contexto de MHC.

Sunday, May 30, 2010

 selección (+)
• ¿Reconoce
moléculas MHC Células epiteliales están
propias cargadas de péptidos, de modo
que TCR tiene especificidad dual
expresadas en (T doble positivos)
la superficie de
Los péptidos son muestras de
células proteínas hechas por epiteliales
epiteliales de la (Clase I) o de proteínas
corteza tímica? presentes en microambiente del
timo (Clase II)

• Default: sííí (o
apoptosis)
Sunday, May 30, 2010
 Selección (-) para MHC:péptido propio

células
examinadoras

Elimina clonas T que reaccionan en exceso con MHC propias o con minicomplejos
MHC:péptido propio; repertorio de clonas T auto-tolerantes.
¿Lógica?
Control de autoinmunidad

Sunday, May 30, 2010

 Inducción de tolerancia central: selección (-)

• ¿Reconoce Linfos T que reconocen

moléculas MHC mueren por apoptosis.
y péptidos
propios? DCs provenientes de médula
ósea, residentes en médula
• ¡no way! del timo.

TCD4:B fabricarían Ac vs. moléculas propias “leídas” como

peligrosas (autoAg’s).
CTLs o T-CD8 atacarían y destruirían células propias.

Sunday, May 30, 2010

Sunday, May 30, 2010
 • Linfos T con receptores que no reaccionan
vs Ag propios presentados en contexto
MHC por DCs del timo, pero que sí
reconocen minicomplejos MHC:péptido
presentados por células epiteliales del timo
• T “graduadas”: cada día, el timo de un joven
prueba +/- 60 millones de linfos T doble
positivos, se gradúan solo 2 a 3 millones
(+/- 3%).

Sunday, May 30, 2010

Sunday, May 30, 2010
Sunday, May 30, 2010
 • TCR alfa:beta • TCR gamma:delta
• 95% de linfos T • epitelio intestinal, útero,
circulantes lengua
• gran diversidad, • poca diversidad, afinidad
reconocen para ciertos invasores de
minicomplejos sitios particulares
• T-CD8+ reconocen • no poseen CD4 ni CD8
MHC Clase I

• T-CD4+ reconocen
MHC Clase II

Sunday, May 30, 2010

 Citometría de flujo (FACS)

Sunday, May 30, 2010

 Co-receptores

Sunday, May 30, 2010

 Afinidad de unión aumenta
hasta 100 veces cuando hay
co-receptor

Davis & van der Merwe, (1996) Immunol Today 17:181

Sunday, May 30, 2010

 Accesorias: ICAMs, CD45R, CD2, LFA-1...
Co-estimulación: CD28:B7

Sunday, May 30, 2010

 ¿cómo trabaja TCR?

Sunday, May 30, 2010

 Interacción MHC:péptido:TCR
produce 3 resultados muy
diferentes:

selección positiva
selección negativa
activación

Sunday, May 30, 2010

 activación de T

CD3, ZZ y TCR,
activación de
Fyn,
Lck,
ZAP-70

Sunday, May 30, 2010

 ZAP-70 amplifica activación y generación de
segundos mensajeros
Sunday, May 30, 2010
Sunday, May 30, 2010
 CD28:B7
aumenta producción de IL-2
y proliferación de T

presencia o ausencia de
señal co-estimuladora
determina si ocurre
expansión clonal o anergia

ANERGIA: estado “activo” de

inactivación, incapacidad de
proliferar en respuesta a
MHC:péptido

i-CTLA-4R: abatacept

Sunday, May 30, 2010

 anergia y tolerancia periférica

Sunday, May 30, 2010

 Does our current understanding of the molecular basis of immune
tolerance predict new therapies for autoimmune disease?
Nat Clin Pract Rheumatol (2006) 2:491-499

W
/clinicalpractice/rheum

Lysosomal processing

MHC
class II
DC

TCR Naive T cell

Specific
antigen
DEC205

TREG

Initial expansion
Apoptosis
Figure 1 Modification of dendritic cells by targeted antigen presentation leads to induction of T-cell
Sunday, May 30, 2010
 ¿qué aprendimos hoy?

• Maduración de T progresa en estadios que se

distinguen por la expresión de genes para el
receptor Ag, moléculas co-receptoras CD4 y
CD8 y localización intratímica.
•
• El linaje más temprano de T no expresa TCRs ni
CDA ni CD8. Estos timocitos “desnudos” se
localizan en la zona externa de la corteza, donde
proliferan, reordenan genes de TCR y expresan
moléculas de superficie CD3, TCR, CD4 o CD8.
Al madurar, se mueven de la corteza hacia la
médula del timo.

Sunday, May 30, 2010

 • Timocitos muy inmaduros (células pro-T) son CD4-CD8- (doble
negativos), y sus genes para TCR se hallan en configuración
germinal.

• En estadio pre-T, permanecen doble negativos pero empieza la

recombinación V-D-J en el locus de la cadena TCR β. Se
expresan transcriptos de cadena primarios que se procesan
para atraer un segmento Cβ adyacente al complejo VDJ,
produciéndose polipéptidos de cadena β. La cadena β se
asocia con la proteína invariante pre-Tα para formar un pre-
TCR.

• El pre-TCR transduce señales que inhiben reordenación del

otro alelo de la cadena β (exclusión alélica) y promueve
expresión de CD4 y CD8 así como mayor proliferación de
timocitos inmaduros.

• En el estadio CD4+CD8+ (doble-positivo) del desarrollo de T,

hay recombinaciones V-J en el locus α, se genera un
polipéptido de cadena α, y se expresan niveles bajos de TCRs
sobre la superficie celular.

Sunday, May 30, 2010

 • Procesos de selección dirigen maduración de timocitos doble
positivos con TCR, el repertorio de T, hacia mecanismos de restricción
por el Complejo Mayor de Histocompatibilidad y de autotolerancia.

• Selección positiva de timocitos CD4+CD8+ TCRαβ requiere

reconocimiento de baja avidez de complejos péptido:MHC en células
tímicas epiteliales, conduce a rescate de las programadas para
apoptosis.

• Selección negativa de timocitos CD4+CD8+ TCRαβ doble-positivos,

cuando estas células reconocen, con alta avidez, Ag presentes en altas
concentraciones en el timo. Este proceso es responsable de
tolerancia a muchos auto-Ag. Muchos de los timocitos corticales no
sobreviven estos procesos de selección.

• Timocitos sobrevivientes TCRαβ que maduran, migran hacia el interior

de la médula tímica y se convierten en T CD4+CD8- o en T CD8+CD4-.

• Timocitos medulares adquieren la capacidad de diferenciarse en

células efectoras de ayuda (CD4) o efectoras citolíticas (CD8) que
finalmente emigran hacia tejidos linfoides periféricos.

Sunday, May 30, 2010

 próxima clase:

• proceso y
presentación
antigénica
• MHC

Sunday, May 30, 2010