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INTRODUCCIÓN
Para el estudio de las sustancias se deben ocupardiversas técnicas, que han ido evolucionando con elpaso de los años. Una de las técnicas más básicas esla cromatografía, en sus múltiples variantes. Estatécnica se da desde siempre en la naturaleza, comoen lo que efectúan las piedras, que permiten purificarel agua.La cromatografía como tal adquiere importanciacuando en 1850 el químico F.F.Runge, que trabajabacon tintas, descubrió que los cationes orgánicos seseparaban por migración cuando se depositaba unadisolución que los contenía sobre un material poroso,como papel. ElbotánicorusoMijaíl Tswettempleó por
primera vez en 1906 el término "cromatografía" (que
proviene del griego χρομα y γραφω qu
e significanrespectivamente chroma "color" y graphos "escribir").Según la definición dada por Keulemans lacromatografía es un método de separación en el quelos componentes a desglosar se distribuyen entre dosfases, una de las cuales constituye un lechoestacionario de amplio desarrollo superficial y la otraes un fluido que pasa a través o a lo largo del lechoestacionario. Recientemente la I.U.P.A.C define lacromatografía de forma más amplia como
(1)
: Métodousado principalmente para la separación de loscomponentes de una muestra, en el cual loscomponentes son distribuidos entre dos fases, una delas cuales es estacionaria, mientras que la otra esmóvil. La fase estacionaria puede ser un sólido o unlíquido soportado en un sólido o en un gel (matriz). Lafase estacionaria puede ser empaquetada en unacolumna, extendida en una capa, distribuida comouna película, etc.Se basa en el principio de retención selectiva, cuyoobjetivo es separar los distintos componentes de unamezcla, permitiendo identificar y determinar lascantidades de dichos componentes. Las retencionesmencionadas pueden tener su origen en dosfenómenos de interacción que se dan entre las dosfases y que pueden ser:1.
La adsorción,
que es la retención de unaespecie química por parte de los puntos activosde la superficie de un sólido quedando delimitadoel fenómeno a la superficie que separa las faseso superficie interfacial.2.
La absorción,
que es la retención de unaespecie química por parte de una masa, y debidoa la tendencia que esta tiene a formar mezclacon la primera, absorción pura, o a reaccionarquímicamente con la misma, absorción conreacción química, considerando ambas como unfenómeno másico y no superficial.A comienzos del año 1903, Mijail Tsvet usó columnasde adsorción de líquidos para separar pigmentosvegetales (por ejemplo,clorofilas). Las disolucionesse hacían pasar a través de una columna de vidriorellena de carbonato de calcio, que finamente divididode un material poroso que interacciona de formadiferente con los componentes de la mezcla, de formaque éstos se separaban en distintas bandascoloreadas a lo largo de la columna.
Imagen 1.
Separación de clorofilas mediante cromatografía en papel.
La cromatografía puede cumplir dos funcionesbásicas, como son el de separar los componentes dela mezcla, para así purificarlos, o para medir lasproporciones de los componentes.Existen múltiples tipos de cromatografía, que sepueden separar en dos grandes grupos:a)
Cromatografía plana.
Cromatografía en columna.
La faseestacionaria se sitúa dentro de una columna.