FASES DEL ANÁLISIS

Etapa PRE-analítica:

Objetivos → Obtención de una muestra representativa

cualitativa y cuantitativamente del material biológico.

• Solicitud analítica e información del laboratorio

La solicitud debe ser realizada por el médico. En ella debe

constar la identificación completa del paciente y del
médico.
El tipo de material biológico debe especificar la fecha en
que se tomó la muestra. El carácter infeccioso conocido o
sospechoso de la muestra debe estar claramente indicado.
Estudios microbiológicos o parasicológicos requieren
información suplementaria.
La muestra debe tomarse bajo las condiciones más
favorables.
Es esencial la correcta identificación del paciente.
Etiquetar cada muestra inmediatamente en presencia del
paciente.

• Preparación del paciente

El paciente debe ser bien recibido, bien informado y debe dársele

las instrucciones impresas.
Los factores relacionados con el paciente que pueden afectar los
resultados se clasifican en:
Factores no modificables → edad, sexo, origen étnico, embarazo,
fase del ciclo menstrual.
Factores controlables

La tensión mental produce aumento en la concentración

plasmática de somatotropina, prolactina, cortisol, catecolaminas,
glucosa.
El trabajo muscular intenso afecta la concentración de CPK
(creatin kinasa), LDH (láctico deshidrogenasa), iones potasio, etc.
Situación dietética: no ayunar produce elevada concentración de
triglicéridos.
La ingestión de alcohol altera la concentración de enzimas
hepáticas, acido úrico, etc.
Fumar afecta lipasa, amilasa, colesterol, glucosa.
Masaje prostático afecta PSA.
Cirugía o inyección intramuscular afecta CPK.
Anticonceptivos orales afecta la actividad estrogénica, eleva la
concentración de hormonas sexuales y del cortisol.
Medicamentos hay que registrarlos al llenar la solicitud o al tomar
la muestra ya que pueden hacer variar los resultados.
La cafeína y bebida cola producen variación en los triglicéridos,
cortisol y colesterol.

• Obtención de la muestra

Tiempo de muestreo: en los sistemas biológicos los cambios

ocurren frecuentemente siguiendo ritmos biológicos bien
definidos. Los más comunes son:
Ritmo de frecuencia baja: ritmo menstrual, con una
periodicidad aproximada de 28 días. Hay variaciones en la
concentraron de progesterona, estrógenos, etc.
Rimo de frecuencia alta: ritmo cardiaco y respiratorio: de 0 a
30 min. (No es el más aplicable en el laboratorio).
Ritmo de frecuencia media: ritmo circadiano, entre 30 min. Y 2
días y medio. Variaciones en corticosteroides, hormona de
crecimiento, aldosterona, etc. Ej.: la enzima creatin Kinasa,
debe tomarse una muestra de sangre dentro de las 6 a 30 horas
después del infarto de miocardio, para obtener información
diagnóstica confiable.
 TIPOS DE MUESTRAS

Sangre: puede ser de origen arterial, venoso o capilar.

Orina: la muestra puede ser aleatoria, primer chorro, chorro
medio o con horario.
Exudado vaginal: Se toma en el lugar adecuado según lo que se
quiera investigar.
Heridas profundas o fístulas: se deben tomar muestras de las
zonas profundas, en busca de los agentes que están causando la
infección.
Esputo: expectoración profunda.
LCR: se extrae por punción lumbar.
Liquido amniótico: baña el feto durante su desarrollo. Su
estudio se denomina amniocentesis y se obtiene información
del feto.
Materia fecal: para realizar análisis microbiológicos y
parasicológicos.
Otras muestras: vaginal, uretral, cervical, faríngea, fluidos
cerosos, de superficies cutáneas y mucosas. Líquido pleural,
liquido sinovial, líquido ascítico, etc.

EXTRACCIÓN DE SANGRE

La sala de espera debe permitir al paciente al menos 15 min.

De reposo sentado, si es posible con medios para su
entretenimiento.
La sala de extracciones debe ser higiénica y tener el
equipamiento adecuado. Los materiales para la extracción
deben ser de buena calidad, el personal debe estar bien
adiestrado y tener la vestimenta adecuada (batas, guantes.)

Material necesario: Agujas 19G para extracción de más de

10ml. 20-21G para extracción de volúmenes hasta 10ml. 21-
23G para muestras pediátricas. Alcohol 70%. Torunda de
algodón. Ligadura. Gradilla. Tubos secos sin anticoagulante.
Tubos con anticoagulante.
Lavarse las manos, colocarse los guantes, descubrir el brazo
del paciente y ponerlo en posición declive, si es necesario
colocar la ligadura 7,5 o 10cm por encima del sitio de punción.
Los pacientes que se van a extraer sangre están generalmente
tensos, intentar tranquilizarlos, evitar que observen el
procedimiento de extracción de sangre.
Hacer abrir y cerrar la mano al paciente. No ligar más de un
minuto. Desinfectar la piel con alcohol 70%, dejar secar.
Probar las jeringas y agujas antes de hacer la punción.
Introducir la aguja superficialmente y en el mismo sentido de
la vena. El ángulo entre la aguja y el plano de la piel debe ser
menor a 45º. Extraer volúmenes de sangre para los diferentes
análisis, en lo posible no más 20ml. Retirar la ligadura cuando
la sangre fluya en la jeringa. Asegurarse que la mano del
paciente esté abierta. Retirar con rapidez la aguja ejerciendo
presión sobre el lugar de punción. Indicar al paciente que
presione la zona de punción de 5 a 10 min. Desechar la aguja
y la jeringa en recipientes adecuados.
Repartir la sangre primero en los tubos con anticoagulante
dejando caer esta suavemente por las paredes del tubo.
Preferentemente se puncionan las venas cubitales y media
cefálica, pero cualquier vena accesible de buen calibre puede
servir.
No puncionar las venas de miembros inferiores.
No extraer sangre de circuitos, Vías, fístulas, cánulas, prótesis
vasculares.
Si a la paciente se le ha practicado una mastectomía, debe
evitarse el brazo de ese lado, si esta es bilateral tomarlo del
lado en que primero se realizó la cirugía.
No extraer sangre de zonas laceradas o con hematomas.
Si el paciente tuviera vía i/v se debe sacar del brazo opuesto. Si
tuviera i/v en los dos brazos se cierra la vía por dos minutos, se
coloca una ligadura por debajo de la vía y se punciona una
vena diferente a la que está colocada la vía. Se descartan los
primeros 5ml de sangre y luego con otra jeringa se obtiene la
sangre para los test de laboratorio.
Medidas para evitar accidentes, reacciones, complicaciones,
errores por procedimiento de extracción de sangre

Realizar correcta desinfección, evitar lesiones en los vasos y en

los nervios. Ante desmayos, náuseas, sudoración o
enfriamiento, acostar al paciente con las piernas en alto y
avisar aun médico.
PUNCIÓN ARTERIRAL
La arteria debe ser bastante grande, superficial, ofrecer fácil
acceso y debe ser compensada por circulación colateral. Las
arterias preferidas son la radial, la braquial y la femoral.
La arteria se identifica por sus pulsaciones. El principal uso de
la sangre arterial es el estudio de gases en sangre y de ph.

SANGRE CAPILAR

Se la utiliza en lactantes, en los adultos en quemados en

obesos, en pacientes que no tengan venas accesibles, en los que
se encuentran bajo tratamiento que requiera preservar la vía
venosa para inyectables, en los niños con venas muy finas y
frágiles y cuando el volumen requerido no justifique la punción
venosa. Se usa en los programas de investigación neonatal de
enfermedades congénitas y en el POC. También en las
gasometrías en niños. Los sitios para realizar la punción
cutánea son: planta del pie, dedo gordo del pie, dedo medio o
anular, lóbulo de la oreja o el talón en menores de 1 año.

TIPO DE MUESTRA: ORINA

Para muestras aisladas solicitar siempre la primera orina del a

mañana para el examen de orina completo.
Para muestras seriadas tener en cuenta la creatininuria con
marcador de recogida correcta, debe ser similar en todas las
muestras.
Para muestras de 24hs vaciar la vejiga al comienzo del día y
luego recoger todas las muestras del día siguiente.
El recipiente donde se recoge la orina conviene que sea
desechable, de plástico traslúcido, con tapa de rosca.
Para las pruebas de orina que requieran un tratamiento
especial, el laboratorio debe preparar el recipiente y se le dará
al paciente con las instrucciones escritas.
Controlar el cumplimiento de las indicaciones.

TIPO DE MUESTRA: LCR

El liquido cefalorraquídeo se produce por filtración del plasma

a través de la barrera hematoencefálica, prácticamente todas las
proteínas del plasma las podemos encontrar en el LCR.
La muestra ideal son 5ml. Se recoge en dos tubos estériles, el
primero se deja para el examen cito químico y el segundo para
microbiología.
La muestra debe ser trasladada al laboratorio y procesada lo
antes posible.

TIPO DE MUESTRA: SALIVA

La saliva es una alternativa de las muestras de sangre para

algunos metabolitos que tienen baja variabilidad de la relación
plasma/saliva, como las hormonas y las drogas. Ej.: cortisol,
progesterona, testosterona, paracetamol, etanol, cafeína,
diazepan.
Para la extracción de la muestra de saliva indicar al
paciente no lavarse dientes ni boca desde tres horas
antes. Estimular la secreción salival por el masticado de
material inerte. No ingerir la droga que se va a medir en
el período previo a la recolección de la muestra. La
muestra se toma por succión del piso de la boca con
jeringa. Se aconseja congelar enseguida para
desnaturalizar la mucina y eliminar la espuma, luego de
descongelar se centrifuga y se obtiene un sobrenadante
claro y adecuado para trabajar.
Mucina: lubricante que protege las superficies corporales de la fricción
o erosión.

IDENTIFICACIÓN Y TRAZABILIDA DE MUESTRAS

PRIMARIAS Y SECUNDARIAS

La identificación de las muestras es una de las tareas que

requiere mayor atención, ya que de ella depende la fiabilidad
de los exámenes a realizar. Para ello se debe identificar la
solicitud, analítica y todos los recipientes para muestras con el
número o código asignado al paciente.
Una muestra puede ser procesada en el tubo original o muestra
primaria. También puede ser tratada o alicuotada en otros tubos
o muestras secundarias.
Frente a una emergencia (resultado inesperado, rotura, vertido
o contaminación de una muestra en la etapa analítica) se puede
recurrir a otra alícuota de la misma o una nueva de modo que
se pueda confirmar un resultado o repetir un análisis.

MANIPULACIÓN, TRANSPORTE Y
CONSERVACIÓN

Las muestras se deben procesar tan pronto como se a posible.

Se deben normalizar qué muestras se deben procesar
inmediatamente y cómo hacerlo.
Los tubos deben permanecer en posición vertical hasta su
centrifugación, convenientemente tapados.
Los medios de transporte como el Stuart, Amies o Cary Blair
son sustancias que ayudan a conservar las muestras reduciendo
la actividad metabólica de los microorganismos y evitando la
proliferación de otros ajenos a la muestra.
Para almacenar se puede utilizar el congelamiento: hielo seco
(co2 sólido).
RECEPCION, PREPARACION Y DISTRIBUCION

Cada laboratorio deberá establecer el procedimiento para la

recepción, preparación y distribución de las muestras que
reciba.
FASE ANALÍTICA

Es la etapa en donde transcurren los procesos de observación y

medición y un proceso de control.

Existen tres tipos de errores en esta etapa:

Errores burdos o equivocaciones → son errores evitables, se

corrigen por medio de normas. Ej.: rotulación errónea,
contaminación de la muestra, mala extracción de la muestra.

Errores aleatorios o indeterminados → son errores inevitables,

dependen del azar. No es constante, se detectan por medio de
un control de calidad intralaboratorio (CCI). Cambio de equipo
o instrumental, no guardar las mismas condiciones de trabajo
en los puntos críticos.

Errores sistemáticos → son evitables, se pueden determinar y

corregir, tienen valor constante y signo determinado. Se
detectan y evalúan por medio de un control de calidad
extralaboratorio (CCE). Ej.: el método, el equipo, desarrollo
deficiente o alterado en los pasos críticos, instrumental…

No existen reglas fijas para todos los procedimientos por eso

existen programas de control de calidad, tampoco existe un
valor verdadero a causa de las variaciones propias de los
métodos de medida, del operador. Etc. Si existe un valor más
probable dentro de un error máximo tolerable.

La selección de los procedimientos se basa en los criterios de

practicabilidad y confiabilidad.
Los aspectos de practicabilidad incluyen la educación y el
entrenamiento requerido, disponibilidad de reactivos, los
requerimientos de instrumentales, el tiempo de ejecución, el
costo y la seguridad.
Los criterios de confiabilidad describen la ejecución analítica
del método cuando se utiliza en condiciones rutinarias y son las
siguientes: exactitud, precisión, especificidad analítica,
interferencia analítica, límite de detección, error total.

Exactitud: es el grado de proximidad entre la cantidad

mensurable estimada y el valor verdadero y no tiene ningún
valor numérico.
Precisión: es el grado de acuerdo entre valores cuando se
analiza la misma muestra estable repetidamente.
Algunos factores que producen imprecisión son:
• Errores en la medición,
• Evaporación de la muestra,
• Variación de la temperatura,
• Variación electrónica del aparato utilizado, etc.
Veracidad: es la concordancia más cercana entre el valor
promedio y el valor verdadero.
Especificidad analítica: determinación de una sustancia a pesar
de la presencia de otras en la muestra.
Interferencia analítica: se produce por factores químicos o
físicos que pueden influir sobre el valor de la cantidad
investigada. (Hemólisis, lipemia, icteria.)
Error total: Error sistemático + error aleatorio. Este error debe
ser menor a EMT.
Error máximo tolerable: establece un intervalo de error
permisible para que los resultados sean de utilidad clínica.

Factores que afectan a la fase analítica y que dependen del

laboratorio en que se realiza el análisis:
• Origen del agua
• Disponibilidad de balanzas adecuadamente calibradas
• Calibración de los dispositivos de medidas de volúmenes
• Estabilidad de la corriente eléctrica
• Verificación de la temperatura de los baños, congeladores y
refrigeradores
• Control de la velocidad de las centrífugas
• Mantenimiento y ajuste de los equipos analíticos.
CONTROL DE CALIDAD INTERNO (CCI)

Forma parte del sistema de calidad del laboratorio y permite la

validación de los resultados analíticos. Permite monitorear la
ejecución de procedimientos con finalidad correctiva. Se
deberá especificar la naturaleza de la muestra de control
utilizada, la frecuencia de su empleo, los valores o límites
aceptables, la conducta a seguir en los casos en que estos
queden afuera, así como el modo de gestión del CCI.

EVALUACIÓN EXTERNA DE CALIDAD (EEC)

Permite un estudio analítico retrospectivo y objetivo de los

resultados analíticos del laboratorio.
El procedimiento debe tener en cuenta:
• Las diferentes evaluaciones externas en las que el
laboratorio participa y sus pruebas
• El método que emplea el laboratorio y la evaluación de los
resultados
• El archivo de los resultados, los dictámenes de las
evaluaciones realizadas, así como las evaluaciones
implantadas como consecuencia de éstas.
FASE POST-ANÁLITICA

Incluye la revisión sistemática, la confirmación de resultados,

el informe analítico y el almacenamiento de las muestras
examinadas.
El sistema de calidad del laboratorio debe contar con los
medios y procedimientos para:
• La adjudicación de cada resultado a su paciente
• La configuración y distribución de un informe útil y veraz
• El adecuado registro y archivo de muestras y de la totalidad
de la documentación generada durante todos los procesos
para asegurar la trazabilidad
• Ágil acceso a los archivos para asegurar una consultoría
eficaz.

La información clínicamente útil es la que permite al clínico

responder a interrogantes específicas, para que pueda tomar
decisiones médicas correctas de acuerdo a la situación médica
del paciente.
El médico clínico necesita de la participación de un profesional
en el laboratorio o un analista clínico actualizado para u
manejo óptimo del paciente.
Es fundamental la formación en el uso de la informática
médica para la explotación biodiagnóstica del banco de datos
personales, clínicos y analíticos de los pacientes.

INFORME ANALÍTICO

Documento por el que se comunica los resultados. Contiene la

información solicitada por el médico, paciente, entidad, etc.,
las magnitudes biológicas, los valores de referencia y los
comentarios que proceden.
Los resultados serán legibles, sin errores de trascripción y
reportados en la nomenclatura en que se describen las
magnitudes biológicas, espécimen y tipo de muestra; deben ser
claros, de modo que no haya ambigüedad de interpretación. Si
existe nomenclatura oficial se aconseja su utilización.

El nombre de cada magnitud biológica y descripción de los

análisis o pruebas ejecutadas y sus resultados seguirán la
sintaxis recomendada por la Federación Internacional de
Química Clínica y Medicina de Laboratorio (IFCC), la unión
Internacional de Química Pura y Aplicada (UIPAC) y seguirá
la nomenclatura recomendada por la Unión Internacional de
Bioquímica y Biología Molecular (UIBMB) y la Organización
Mundial de la Salud (WHO).

VALIDACIÓN DEL INFORME DE LABORATORIO

Es el acto profesional por el que un experto, especialista en

análisis clínicos, se responsabiliza de que los procesos previos
a la entrega del informe se han cumplido de acuerdo a un
sistema de calidad. Que la utilidad y limitaciones de
información emitida están documentadas y que los medios para
cualquier consulta o comprobación están disponibles con un
nivel de trazabilidad fiable.
Todos los resultados inesperados requieren confirmación, esta
puede realizarse por repetición de la medición realizada, si este
método no confirma se recomienda usar uno alternativo a partir
de la misma muestra. Si existe duda debe procesarse una nueva
muestra.

CONFIDENCIALIDAD

La dirección debe cuidar de los medios de protección de la

confidencialidad y de la formación adecuada de todo el
personal para que cumpla las normas dedicadas a este fin.
La mecánica de distribución de los informes de laboratorio a
los distintos puntos de entrega debe estar protocolarizada con
normas que aseguren la confidencialidad.
INDICADORES DE CALIDAD

El laboratorio debe definir, calcular y seguir el

comportamiento de los valores de los indicadores de calidad de
los procesos de la etapa post-analítica. Ej.:
Tiempo de respuesta del laboratorio para las solicitudes
urgentes: es el tiempo de entrega para las solicitudes de
realización urgente, expresado en minutos.
Proporción de reediciones diarias de informes ya entregados:
número de informes reclamados/número total de informes.
Proporción de informes reclamados por demoras: Número de
informes reclamados/ número total de informes.