DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

Microscopia:
 Tinción de Gram de las muestras de esputo constituye un
método rápido de diagnosticar una neumonía y meningitis
neumococica. Esto se puede confirmar con quellung(hinchazón);
en esta prueba se mezclan anticuerpos anticapsulares
polivalentes con las bacterias para después examinarlas al
microscopio. La presencia de mayor refringencia alrededor de
las bacterias se interpreta como una reacción positiva para
S.pneumoniae.
• Detección de Antígenos
▫ El polisacárido C del neumococo se excreta en la
orina y se puede detectar por medio de un
inmunoanalisis comercializado.
• Pruebas basadas en los ácidos nucleicos
 Se han desarrollado sondas de acidos nucleicos y pruebas de
PCR para la identificacion de S.pneumoniae en cultivo
• Cultivo
 El cultivo requiere la utilización de medios
enriquecidos con nutrientes (p.ejem agar
de sangre de cordero); el microorganismo
es muy sensible a un gran número de
antibióticos, por lo que el cultivo puede
arrojar resultados negativos en los pacientes
sometidos a un tratamiento parcial
 Identificación de Streptococcus pneumoniae

CULTIVO

Incubación
35°C/20-24h
y 5% CO2
Inoculación de
la muestra

Revisión de cultivos
 MÉTODOS MICROBIOLÓGICOS
Identificación de Streptococcus pneumoniae

PRIMOAISLAMIENTO

Colonias alfa hemoliticas

Reaislamiento
 Streptococcus pneumoniae
Prueba de Optoquina
(5 µg/mL de etilhidrocupreina)

6mm
5μg

10mm
5μg

Incubación 20-24 hs
35°C y 5% CO2
Incubación 20-24 hs
35°C y 5% CO2

Se usa el disco de optoquina para diferenciar entre S. pneumoniae (sensibles) y otras especies
de estreptococos a hemolíticos (resistentes). La sensibilidad a la optoquina es una medida de
la fragilidad de la membrana celular bacteriana.
Prueba de Optoquina

INTERPRETACIÓN

DISCO 6 mm
Prueba de Optoquina

S: ≥ 14 mm = S. pn
9-13 mm= P. Solubilidad
DISCO 10mm
Interpretación: Sensible, cuando hay inhibición
alrededor del disco. Se considera como punto de
corte 16 mm. (discos de 10 mm) o 14 mm (discos S: ≥ 16 mm = S. pn
de 6 mm). Resistente, cuando el crecimiento no es < 16 mm = P. Solubilidad
inhibido alrededor del disco. Los casos de halos
intermedios deben resolverse por acumulación de
pruebas a favor o en contra.
 Identificación de S. pneumoniae

Solubilidad en bilis

0.25 mL
Cultivo puro

0.5 McFarland

INCUBACIÓN
Se utiliza esta prueba para diferenciar
entre S. pneumoniae, soluble, en bilis y 35°C/ 2h
otras especies de estreptococos alfa
hemolíticos, “insolubles” en bilis. Esta 0.25mLSS 0.25 mL
prueba controla la capacidad de las células desoxicolato
bacterianas de producir lisis en presencia sodio 2%
de sales biliares, en un tiempo y a una
temperatura específica.
 Identificación de Streptococcus pneumoniae
Solubilidad en bilis
INTERPRETACIÓN

1 gota desoxicolato al 10%

10 min

Desaparición de la colonia

INHIBICIÓN DE LA TURBIDEZ S. pneumoniae

Positiva cuando se observa un aclaramiento del tubo con desoxicolato respecto al de solución Sensibilidad: 98%
fisiológica. Negativo, cuando no hay diferencia de turbidez entre ambos tubos. Especificidad: 100%