FORMULA LEUCOCITARA

1. Examenul microscopic al sangelui :

o Picatura groasa
o Frotiul de sange

In vederea unui examen microscopic sangele este recoltat prin inteparea pulpei
unui deget dupa prealabila dezinfectare.

o Picatura groasa

Reprezinta o metoda de cercetare a parazitilor / bacterii spiralate din sange (plasmodiul

malariei, Borrelia recurentis, etc.), din acest motiv acest subiect va fi tratat pe larg la capitolul
corespunzator. Prin aceast mod de examinare a sangelui hematiile sunt lizate, preparatul este
colorat Giemsa, observandu-se numai leucocitele si microorganismele.

o Frotiul de sange

Definitia
Reprezinta modalitatea de studiere a morfologiei elementelor sangvine si totodata
orienteaza asupra numarului de leucocite, si trombocite din sange.

Picatura de sange obtinuta la inteparea pulpei degetului este depusa pe o lama de

sticla curata si degresata, si apoi este intinsa cu ajutorul unei alte lame mentinute la un unghi
de aproximativ 45° fata de prima. Preparatul astfel obtinut este uscat si colorat prin tehnica
May Grunwald Giemsa, denumita si coloratie panoptica, deoarece permite evidentierea
tuturor elementelor figurate sangvine.

Examinarea frotiului de sange se efectueaza cu obiectivul cu imersie in ordinea

urmatoare: eritrocit, trombocit, leucocit cu realizarea formulei leucocitare. Frotiul de sange
 2
reprezinta componenta esentiala a unei hemograme, deoarece orienteaza medicul asupra
tuturor elementelor figurate.
2. Morfologia elementelor normale din sange

Elementele figurate ale sangelui:

o
Eritrocite 4-5 milioane / mm3
o
Leucocite 4000 – 8000 / mm3
o
Trombocite 150.000 – 300.000 / mm3
Eritrocitele: au forma unui disc biconcav cu diametrul de ~ 7,2μm, de culoare roz
portocalie cu centrul mai putin colorat.

Trombocitele : cele mai mici elemente figurate cu diametrul cuprins intre 2-4 μm, cu
forma sferica si ovoidala, albastre cu granulatii rosii. De obicei se gasesc in grupuri suprapuse
pe eritrocite.

Leucocitele se coloreaza diferit in functie de tipul lor

o Granulocite (prezinta granulatii in citoplasma)
o Nesegmentate – reprezinta neutrofilele tinere
 Nucleu in banda sau in forma literei “S”
o Segmentate
 Polimorfonucleare neutrofile
 Nucleu bi- sau polilobat , situat central, violet
 Citoplasma roz, cu granulatii fine, brune
 PMN eozinofile
 Nucleu bilobat
 Citoplasma plina de granulatii mari, portocalii, care nu se
suprapun peste nucleu
 PMN bazofile
 Nucleul nu este net lobulat, situat central
 Citoplasma contine granulatii rare, dar mari, care nu
respecta limitele nucleului peste care se suprapun.
 3
o Monocite (fara granulatii) :
 nucleu reniform, usor excentric, aspect “pieptanat”
 citoplasma albastra cenusie
o Limfocite (fara granulatii) :
 nucleu rotund, violet cu condensari ale cromatinei
 citoplasma – bleu, apare ca o zona ingusta, semilunara, nu
are granulatii.

3. Formula leucocitara

Definitie
Reprezinta exprimarea procentuala a diferitelor tipuri de leucocite in urma examinarii a
cel putin 100 de leucocite pe un frotiu sange.

Tehnica
Se parcurge frotiul cu obiectivul cu imersie, intr-un singur sens si in zig-zag deoarece
limfocitele au tendinta sa se grupeze spre centru, in timp ce polimorfonuclearele stau mai mult
la marginea frotiului (conform figurii de mai jos), mai intai pe o latura a lamei pana se intalnesc
primele 50 de leucocite si pe latura opusa pentru celelate 50 de leucocite.

Figura 1. Examenul microscopic pentru stabilirea formulei

leucocitare

Cu cat sunt examinate un numar mai mare de leucocite (200-400) exactitatea

rezultatului creste. La o examinare a unui numar de leucocite mai mic de 100, valoarea testului
este practic nula.
 4

Valori normale – adult

Numar leucocite 4000 – 8000 / mm3

PMN- polimorfonucleare Nesegmentate neutrofile 1–4%

Segmentate neutrofile 60 – 70 %
Eozinofile 1–4%
Bazofile 0–1%
Limfocite 20 – 30 %
Monocite 4–8%

Modificari cantitative ale formulei leucocitare :

Crestere ↑
o Neutrofilie
 Normal – sarcina, efort muscular
 Patologic – infectii generale si locale, intoxicatii, leucemie granulocitara
o Eozinofilia
 Alergii, parazitoze
o Bazofilia
 Leucemie, intoxicatie cu plumb
o Limfocitoza
 Tuberculoza
o Monocitoza
 Mononucleoza infectioasa, febra tifoida, malarie
Scadere ↓
o Neutropenie
 Normal – inanitie
 Patologic – febra tifoida, infectii virale, agranulocitoza
o Eozinopenie
 Faza de debut boli infectioase, intoxicatii, dupa corticoterapie
o Limfopenie
 Infectii supraacute, postcorticoterapie
 5
4. Dozarea complementului seric

Complementul seric (Cseric ) reprezinta un important factor umoral al apararii nespecifice.

Fractia C3b a complementului poate fi dozata prin tehnica Mancini. Metoda are la baza o
reactie antigen – anticorp de precipitare prin imunodifuzie radiara simpla in geloza (I.D.R.S).
Anticorpii anti-Cseric sunt incorporati in gel. Serul pacientului, din care se urmareste
dozarea Cseric (Ag), este introdus intr-un godeu perforat in geloza, actiune urmata de difuzia
radiara a acestuia in mediu. Prin legarea specifica a Ac la Ag, in zona de echilibru, rezulta
complexe Ag – Ac insolubile ce formeaza un inel de precipitare. Diametrul inelului de
precipitare se masoara cu rigla, fiind direct proportional cu cantitatea de Ag (C seric ) existent in
proba, a carei valoare se afla prin consultarea unor tabele de interpretare.

5. Fagocitoza – inflamatia acuta – examinarea unor frotiuri din puroi si secretii

vaginale

Frotiul este fixat pe masuta microscopului si este examinat cu obiectivul cu imersie de

90X. Se observa fagocite (PMN neutrofile , ± macrofage) surprinse in diferite etape ale
fagocitozei : emiterea de pseudopode, formarea fagozomilor prin includerea bacteriilor in
interiorul celulei.

6. Foliculul tuberculos - inflamatia cronica – examinarea unor preparate

histopatologice

Preparatul histopatologic este examinat cu obiectivul cu imersie de 90 X, observandu-

se aspectul microscopic al folicului TBC , de la interior la exterior:
o celula giganta multinucleata Langhans, rezultata din fuzionarea mai multor
macrofage, ce contine bacili Koch fagocitati dar care continua sa se multiplice ,
inconjurata de o :
o coroana de limfocite.
6