Determinación Cuantitativa de Glucosa

PRINCIPIO DEL METODO

La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidación de glucosa a ácido glucónico. El

peróxido de hidrogeno (H2O2) producido se detecta mediante en aceptor
cromogénico de oxígeno, fenol, 4-aminofenazona (4-AF) en presencia de la
peroxidasa (POD):

COOH
GOD + H2O2
HCOH
+O2 + H2O
OHCH

HCOH

HCOH
Β-D-
CH2OH
Glucosa

Acido
Glucónico

OH
POD
H2O2 4-AF
+
H2O
Feno
l Quinon
a

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de glucosa

presente en la muestra ensayada.
Significado Clínico

La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo

celular. Se obtiene fundamentalmente a través de la alimentación, y
se almacena principalmente en el hígado, el cual tiene un papel
primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre
(glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento
en el hígado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina,
sustancia producida por el páncreas. Cuando la insulina es
insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situación se
mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos
órganos. Esta es la razón principal por la que se produce aumento de
glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que
también la provocan.

La insulina es una hormona "anabólica" por excelencia: permite

disponer a las células del aporte necesario de glucosa para los
procesos de síntesis con gasto de energía. De esta glucosa, mediante
glucólisis y respiración celular se obtendrá la energía necesaria en
forma de ATP. Su función es la de favorecer la incorporación de
glucosa de la sangre hacia las células

La diabetes mellitus que es una enfermedad metabólica

ampliamente distribuida que se debe a una deficiencia absoluta o
relativa de la insulina. La falta de esta hormona peptidica se
manifiesta sobre todo en el metabolismo de los carbohidratos.

Este examen se utiliza para evaluar los niveles de glucosa en la

sangre y se puede usar para diagnosticar o detectar diabetes y
monitorear el control en pacientes con esta enfermedad. El
diagnostico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos
clínicos y de laboratorio.

Material:

• Reactivos del kit

• Espectrofotómetro
• Cubetas de 1.0cm de paso de luz
• Equipamiento habitual en el laboratorio

Muestra:
Suero o plasma, libre de hemolisis

El suero debe separarse lo antes posible del coágulo

Estabilidad de la muestra: el suero o plasma es estable 3 días a 2-3°C.

Procedimiento:

Pipetear:

Reactivo Patron Muestra

Blanco 1ml - -
Patrón 1ml 10µl -
Muestra 1ml - 10µl

Mezclar e incubar 10 min a 37°C ó 30 min. A temperatura ambiente (15-25°C)

Leer la absorbancia (A) del patrón y la muestra frente al blanco de reactivo, el color
es estable como mínimo 30 min.

Cálculos:

Patrón: .883 A

Muestra: .628A

.628 X 100 = 71.121 mg/dl de glucosa en la muestra

.883

Conclusión:

Los resultados obtenidos fueron de 71.121 mg/dl esto quiere decir

que es un valor dentro de lo normal, ya que si presenta por debajo de
70 mg/dl indica una hipoglucemia, y si es por arriba de 120 mg/dl
indica una hiperglucemia y podemos concluir que esta prueba es de
suma importancia porque se pueden evitar enfermedades como la
diabetes.
Bibliografía:

Bioquímica: texto y atlas, Koolman y Rohm, 3 edición

 UNIVERSIDAD VERACRUZANA

Determinación Cuantitativa de Glucosa

Anabel Ávalos Gómez

Fecha de la práctica
16/03/2010

Fecha de entrega
25/03/2010

VoBo:____________________________

Q.F.B Guadalupe Alvarado Castro