Professional Documents
Culture Documents
I. Prinsip
rendah ( pada umumnya < 20 p.s.i. ) digunakan sebagai kekuatan bagi elusi bahan
pelarut melalui suatu ruangan atau kolom yang lebih cepat. Ini menghasilkan
Pemisahan ini tidak sesuai untuk pemisahan suatu campuran yang terdiri dari
macam-macam zat, tetapi sangat baik untuk memisahkan sedikit reaktan dari
komponen utama dalam sintesa organik. Tergantung dari ukuran kolom, berapa
gram sample dapat dilapisi dalam satu waktu. Metode ini dikembangkan oleh
Still, W.C., Khan, M., dan Mitra, A. (J. Org. Chem., 43 (14), 2923, 1987).
Terdapat suatu pengaturan umum untuk tekanan-tekanan yang lebih kecil dari 20
p.s.i dengan control ( pengawasan ) manual pada aliran dan terdapat pengaturan
tekanan-takanan yang lebih besar 50 p.s.i dengan suatu ukuran tekanan yang
perubahan persediaan dari 250 ml ke 3000 ml dan untuk unit-unit dengan telanan
yang lebih besar disediakan martel epoksi untuk keselamatan. Pembungkus kolom
biasanya silica gel. Komponen-komponen ini biasanya dijaga oleh pengapit atau
dibelakang pelindung keselamatan. Gelas atau kaca frits tidak digunakan pada alas
kolom karena terlalu banyak volume yang macet di bawahnya. Serat kaca dan
PEMBUNGKUS KOLOM
ukuran partikel terbaik yaitu 40-63 mata jala. Pemisahan diberi tanda sebagai
Metode dari Still untuk sebuah kolom dengan diameter 2 cm. Penambahan
40-63 mata jala silica gel untuk suatu kedalaman 14-15 dalam sebuah
perlahan-lahan ditepuk dengan tegak lurus pada suatu puncak untuk mengatur
letak puncak. Penambahan 2 mm pada 50-100 mata jala pasir pada puncak pada
alas flat gel. Kolom tersebut diapit untuk memekan pembungkus dan pengelusian.
Bahan pelarut secara hati-hati dituangkan di atas pasir untuk mengisi kolom
tersebut dengan penuh. Katup jarum pengontrol arus tersebut dubuka semua pada
jarak tersebut, disesuaikan dengan kerapatan pada puncak kolom dan dilindungi
dengan karet penyambung yang kuat. Klep garis udara yang utama yang
mendorong kearah pengontrol arus dibuka sedikit dan sebuah jari yang
ditempatkan secara tepat diatas karet tersebut. Ini akan menyebabkan tekanan di
atas alas adsorben menaikkan dengan cepat dan menekan silica gel tersebut
sebagai solven dipaksa dengan cepat membungkus kolom tersebut. Hal ini penting
untuk menjaga tekanan sampai semua yang ada di udara dilepas dan bagian yang
lebih rendah dari kolom tersebut diam, dengan cara lain kolom tersebut akan
PEMBUNGKUS BASAH
Dalam metode ini silica gel dibuat dalam suatu noda dan dituangkan ke
dalam kolom dengan cara membuka jalan keluar. Tekanan dipasang untuk
mempertahankan bahan pelarut yang keluar lewat bagian bawah dan juga
POMPA
digunakan, dan suatu pompa tidaklah diperlukkan. Ini mingkin dari sebuah
silinder udara. Bagaimanapun, untuk tujuan pemisahan yang hanya memiliki dana
yang minim, dua pelengkap penekan rendah telah diuji. Tekanan pompa yang
lebih rendah adlah suatu pengaturan balon ganda. Suatu balon besar di tempatkan
di dalam balon lain, ditutup dan dikaitkan dengan puncak kolom. Tekanan-
tekanan pada 2-3 p.s.i dicapai. Tekanan tersebut tetap bagus karena volume balon
tersebut lebih besar dari pada volume bahan pelarut yang digunakan. Untuk
tekanan yang lebih tinggi, tergantung dari luas dan bahkan lebih dari suatu laju
arus.
PENEKAN GAS/UDARA
ditekan oleh pompa yang mempunyai segel minyak, sehingga gas selalu berisi uap
air minyak dalam jumlah yang kecil. Sebuah perangkap antara persediaan dan
sesederhana mungkin.
PENAMBAHAN SAMPEL
sample, dimana sebuah corong dengan tangkai panjang dan teratur, dengan
disamping bagian bawah dinding kolom. Agar ketika sample mencapai puncak
KONTROL ARUS
berikutnya yang diperlukan adalah laju arus bahan yang sesuai dan untuk
membebaskan gas yang berlebih keluar melalui suatu lubang angina. Pengontrol
komersil memberikan lima pengontrol kendali dan dapat bergantian sesuai dengan
keperluan untuk perbedaan luas-luas kolom dan brrubah-ubah dalam viskositas
diinginkan komponen yang mempunyai suatu Rf 0.35 pada suatu silica gel lapis
tipis dan tidak murni pada kurang lebih 0.15 Rf ml. system bahan pelarut yang
telah ditemukan untuk bekerja dengan baik meliputi 10-50 % campuran etil asetat
Sampel lewat dengan sedemikian cepat sehingga harus ditemukan sebuah cara
yang mudah untuk mengumpulkan fraksi-fraksi yang ada. Tabel 18-1 memberikan
target yang telah diperoleh. Yang telah terbukti berhasil adalah penggunaan rak
tabung uji yang memuat beberapa tabung uji berukuran 20×150 mm dan
pengumpulan satu fraksi ke dalam setiap tabung tersebut. Perhatikan Gambar 18-6
untuk melihat metode deteksi yang mudah. Sampel kasar ditotolkan di sepanjang
satu sisi plat TLC, 5 µL dari setiap fraksi, lalu ditotolkan di sepanjang tepi plat.
Ketika dilakukan kromatografi, fraksi-fraksi yang mengandung senyawa yang
diinginkan akan teridentifikasi dan derajat pemisahan yang dicapai pun diketahui.
Peralatan yang diilustrasikan dalam Gbr 18-7 adalah contoh yang bagus tentang
sampel atau kurang, dengan batas maksimal 25-30 mg, dan jika peralatan tersebut
sudah siap, pemisahan dapat dilakukan dalam waktu kurang dari satu jam. Sebuah
pipet 5.5 inci sekali pakai dipasang pada tempatnya dengan menggunakan sebuah
tabung uji 10×75 mm dalam sebuah rak tabung uji ditempatkan di bawah outlet
dengan satu tabung tepat menghadap ujung outlet. Jalan udara ditempatkan sesuai
CHROMATOGRAPHY)
pemisahan yang baik dan cepat. Modifikasi yang dilakukan pada prinsipnya
memikirkan bahan yang lebih murah, peralatan yang lebih sederhana dan lebih
praktis. Ada dua perbedaan yang mendasar, pertama tehnik ini menggunakan
penekanan dengan gas. Oleh karena itu proses ini sering disebut dengan
organik, para ahli kimia membuat suau tipe dengan menambahkan fase gerak
tersedia untuk flash kromatografi agar lebih efisien dalam pemisahan pada pKa
tinggi dari senyawa organik. Contoh dari kolom Teledyne ISCO antara lain :
− RediSep Amine,
kualitas baik dari kolom ini dapat ditunjukkan dari kemurnian bahan yang