Validación de limpieza de equipos de producción en

la Industria Farmacéutica
De la web Jenck.com

El objetivo de esta nota es hacer una comparación de los métodos de

muestreo y de los métodos analíticos usados actualmente para este
propósito. Los métodos de muestreo son básicamente dos:

• Muestreo del agua del enjuague final del equipo

• Muestreo de superficies por hisopado

El primero, si bien muy sencillo, no permite evaluar residuos insolubles.

Es adecuado para validación de CIP (“cleaning in place”) y monitoreo de
rutina, y se usa en áreas de producción de inyectables.
El método más aconsejable es el de muestreo directo de las
superficies de los equipos con hisopos húmedos, según la Guía de
Inspección y Procesos de Validación de Limpieza de la FDA.
Este método permite evaluar residuos solubles e insolubles, y es
adaptable a cualquier tipo de producto.
Respecto de los métodos analíticos, los podemos clasificar en:

• Métodos específicos

• Métodos generales o de amplio espectro

Los primeros apuntan a compuestos objetivos determinados. Se suele

usar HPLC, TLC, ELISA, etc.

Los métodos de amplio espectro apuntan a la determinación de

cualquier residuo que pudiera quedar luego de la limpieza del equipo.
Los métodos más recomendables son:
• TOC (carbono orgánico total) para todas las sustancias orgánicas

• Conductimetría para todas las sustancias iónicas

Ambos pueden ser utilizados para cualquiera de los tipos de muestreo

mencionados.
En el caso de muestreo por hisopado – medición de TOC, hay dos
alternativas:

Extracción con agua y medición de TOC

Este método es más simple y rápido que hisopado - extracción con

solvente – HPLC.
Es de amplio espectro: detecta todos los residuos orgánicos como TOC o
todos los compuestos de carbono como TC (carbono total). Permite
determinar compuestos solubles o dispersos en agua, con un nivel de
detección muy bajo. Como material de hisopado se puede usar algodón
prelavado, lavado con metanol y secado.

Medición directa de TOC por combustión del hisopo

Este ensayo es el más sencillo y rápido, ya que no requiere extracción y

llevar a volumen. Permite evaluar en sólo 3 minutos todos los residuos
que contengan carbono, solubles e insolubles, con un nivel de detección
de 10mgC/hisopo.
 Para el hisopado se utiliza un “papel” de filtro de microfibra de cuarzo de
45mm de diámetro, humedecido con 0.4 ml de agua pura. El equipo de
medición es el mismo aparato TOC-5000A usado para medición de
líquidos, con un accesorio especial para muestras sólidas, el SSM-
5000A. El TOC-5000A usa el método de combustión catalítica y
medición del CO2 generado por IR no dispersivo.

Cant. teórica de Recuperación Desviación

agente de promedio (N=3) estándar
limpieza

5.084 ppm C 96.5 % 3.3 %

1.015 ppm C 98.3 % 3.3 %

0.5081 ppm C 95.7 % 11.1 %

El cuadro anterior resume los resultados de un ensayo de recuperación de un agente de limpieza
alcalino, realizado según este método.

Ensayo de recuperación (1)

Se rociaron sobre acero inoxidable electropulido soluciones de diferentes
sustancias. Luego de evaporado el solvente se procedió al hisopado y se
realizaron las mediciones.

Compues Teóric Medid Recuperació

to o o n

DBS-Na 1000 1039 103.9 %

ugC ugC

Tiourea 500 501.6 100.3 %

ugC ugC

Acido 1000 1011 101.1 %

Nicotínico ugC ugC

Cafeína 1000 1009 100.9 %

ugC ugC

Antipirina 1000 1031 103.1 %

ugC ugC

Ensayo de recuperación (2)

 Se utilizó glucosa en etanol como muestra soluble, y un ungüento en
cloroformo como muestra insoluble.

Muestra Residu Recupera Recuperació

o do n
Glucosa 20.0 20.9 ugC 104 %
ugC
Ungüent 26.7 22.7 ugC 85 %
o ugC

Ventajas del TOC en validación de limpieza

El TOC detecta TODOS los compuestos orgánicos, identificados o no,
contenidos en reactivos, productos y sub-productos, a diferencia de lo
que ocurre en el análisis de componentes individuales. El método TOC
implica mucho menos trabajo y ofrece más aplicaciones generales que
los otros métodos. Al ser una medición sencilla y rápida el número de
muestras y la frecuencia de uso se puede incrementar, obteniendo una
validación de alta confiabilidad. También permite rastrear rápidamente
la causa de un problema o monitorear inmediatamente después de una
acción correctiva.
Se puede usar todo tipo de muestras, la ausencia de interferencias y la
sensibilidad inherente lo hacen conveniente en el desarrollo y diseño de
procesos de limpieza para los cuales es necesario un gran número de
muestras en varios puntos y distintas condiciones. Puede ser aplicado a
la validación de limpieza para la producción de drogas experimentales