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CROMOSOMAS POLITENICOS

CROMOSOMAS POLITENICOS

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CARACTERIZACIÓN, COMPARACIÓN DE CROMOSOMAS POLITÉCNICOS YUBICACIÓN DE MARCADORES CROMOSÓMICOS EN
Gigantodax basinflatus Y Gigantodax sp.
(DIPTERA: SIMULIIDAE) BOGOTÁ-COLOMBIA
.
Edison Arvey Alfonso Niño. Slendy Julieth Rodríguez Alarcón. Andrea JohanaLópez Moreno. Leidy Alejandra Rodríguez Aldana.
11
Estudiantes de Licenciatura en Biología. Universidad Distrital Francisco José deCaldas. Citogenética.RESUMEN
:Los cromosomas politénicos son producidos por repetidos ciclos de ADN sin divisióncelular cuyas copias se organizan de manera continua formando un único cromosomagigante, manteniendo un permanente estado interfásico. Han sido encontrados en lasglándulas salivales de dípteros, ya que el patrón de bandeo de estos cromosomas permiteconstruir un mapa citogenético para un mejor análisis de especies de importanciaeconómica, clínica y veterinaria, como los de la familia simuliidae. Se colectaron larvas de
Gigantodax sp
de la Quebrada la Vieja Bogotá-Colombia, identificando sus principalesmarcadores cromosómicos para compararlos con los registrados de
Gigantodax basinflatus
. Los cromosomas politénicos de
Gigantodax sp
se caracterizaron por presentar inversiones en los cromosomas II, diferenciándose así las hembras de losmachos. Cada cromosoma posee un marcador que le identifica de forma más conspicua,siendo este en el cromosoma I la región NOR, en el cromosoma II doble burbuja y en elcromosoma III el telómero festoneado. 
Palabras Clave
: Cromosomas politénicos larvales, interfase, marcadores cromosómicos.
ABSTRACT
:Polytene chromosomes are produced by repeated cycles of DNA without cell division,copies of which are arranged to form a continuous single giant chromosome, maintaining apermanent interphase state. Has been found in the salivary glands of Diptera, as thepattern banding of these chromosomes can build a cytogenetic map for better analysis of economically important species, clinical and veterinary as the family Simuliidae. Larvae of Gigantodax sp, were collected from Quebrada la Vieja Bogota-Colombia, identifying keymarkers chromosome for comparison with basinflatus Gigantodax registered. Gigantodaxpolytene chromosomes were characterized by sp investment in chromosomes II, differingand females of males. Each chromosome has a marker that identifies more conspicuousand this in chromosome I NOR region on chromosome II double bubble and the telomereon chromosome III scalloped.
Key Words
: Larval polytene chromosomes, interphase chromosome markers.
 
INTRODUCCION
.Los cromosomas politénicos soncromosomas gigantes que estánpresentes en algunos ciliados, plantassuperiores y principalmente en glándulassalivares de Dípteros. Este tipo decromosomas debe su tamaño, a unfenómeno especifico en el cual los ciclosde replicación del ADN se repitencontinuamente sin que haya una divisiónde célula, en consecuencia estoscromosomas aumentan de tamaño y sonmuy fáciles de observar al microscopiopor la gran cantidad de detalles que ellospresentan (Karp, 2005). Fuerondescubiertos en 1881 por Balbiani,siendo comprendido hasta medio siglomás tarde “(Kostoff, 1930; Painter,1933,1934; Heitz and Bauer, 1933; Kingand Beams, 1934; Bridges, 1935) dondefueron analizados en las glándulassalivales de larvas de los dípteros(
Drosophila, Chironomus, Bibio
)”(Lacadena, 1996), siendo estosindividuos de gran aporte para este tipode estudios.Los simuliidae son una familia dedípteros con distribución cosmopolita,encontrándose en Colombia los géneros
Simulium
de la subfamilia simiuliini, y
Gigantodax 
de la subfamilia prosimuliini.Ambos parecen idénticos, pero
Simulium
presenta escotadura gular, esclerito analcon un anillo incompleto que rodea loscercos dispuestos allí, branquias analescon varias ramificaciones e histoblastocon cuatro filamentos cortos, gruesos ybien definidos (Needham, P.R, 1982).Mientras que
Gigantodax 
no tieneescotadura gular, presenta el anillocompleto del esclerito anal, branquiasanales con tres ramificaciones biendefinidas e histoblasto con ramificacionesmuy delgadas y largas (branquiales lamitad largos y la otra mitad cortos)(Roldán, 2003). Estos simulidos tienegran importancia tanto médica comoveterinaria más que todo las hembras yaque estas son hematófagas y transmitenla filaria
Onchocerca volvulus
, losprincipales transmisores de
O. volvulus
son complejos de especies como
S.damnosum, S. guianense, S.oyapockense, S. ochraceum, S.metallicum y S. exiguum,
siendo elprincipal transmisor para América Latina
S. ochraceum
s.l (Rodríguez & Pérez,2005).Wygondzinsky y Coscaron reconocenocho grupos de especies entre
Gigantodax,
el
G. brophyi, G. cilicinus,G. cormonsi, G, cortesi, G, igniculus, G,minor, G, multifilis y G. wrightik 
loscuales contienen 17,11,10, 4, 2, 4,1 y 15especies respectivamente (Moulton,1996).Rothfels (1981) encontró evidenciascitológicas que soportan la hipótesis quedice que estos dípteros retornan a suscursos de agua natales para ovopositar en especies como Prosimulium mixtum,en tres riachuelos cerrados yencontrando que los riachueloscontienen larvas de esta especie dedípteros, con inversiones especificaspara esta población en el brazo delcromosoma IIL y IS. Además loscromosomas paternos de estaspoblaciones específicas se repiten añotras año. (Lualon, 2006)Los estudios de los cromosomas de lasgandulas salivales han sido de granimportancia en la taxonomía del númerode dípteros en el mundo. Las diferenciasobservadas en los patrones de bandeopermiten el reconocimiento de especieshermanas biológicamente distintas locual es útil para establecer la identidadde especies y sus relacionesfilogenéticas (Coscarón, 1998). Por locual, el propósito de este estudio fuecaracterizar y comparar los cromosomaspoliténicos de
Gigantodax 
sp. de laQuebrada la Vieja Bogotá-Colombia y
Gigantodax basinflatus
(Vargas, 2002).
 
MATERIALES Y MÉTODOS:
Las larvas de
Gigantodax sp
. con elhistoblasto negro o gris fueroncolectadas en la quebrada de la vieja,ubicada a una altura de 2722 metros, a4 grados, 39 horas y 23 minutos delatitud norte; y a 74 grados, 2 horas y 47minutos de longitud oeste, en Bogotá. Sesiguió la metodología de Arteaga yMuñoz (1999) donde las larvas fueronpreservadas en Carnoy (tres partes deetanol al 90% por una de acido acético) yrefrigeradas hasta empezar el estudiocitogenético. Pasa a diferenciarse losgéneros
Simulium
y
Gigantodax 
,basados en el esclerito anal (completo en
Gigantodax 
e incompleto en
Simulium
),luego las larvas se abren ventralmentecon un corte del sexto al novenosegmento abdominal y se extraen lasglándulas salivares que están al lado delintestino. Estas glándulas se pasan a unalamina con acido acético al 60%, yposteriormente se aplica una gota deOLA (orecina lactoacetica), se dejaactuar 10 minutos y se realiza un“squash” con la laminilla; el acido lácticofluidifica el montaje y facilita el squash, yla orceina es un colorante del grupo delas oxazinas, que tiñe específicamente lacromatina generando patrones negros enlas zonas donde se une conheterocromatina (constitutiva yfacultativa), por ello se hace más fácil laidentificación de los marcadorescromosómicos principales y específicosdel genero
Simulium
.Posteriormente se identificaron ycompararon los marcadores universalesencontrados en
Gigantodax 
sp. y de
Gigantodax basinflatus
(familiaSimuliidae), con ayuda de la siguientetabla (Muñoz de Hoyos, 1990):Además de construir el idiograma de
Gigantodax 
sp.IS: 3” basales (basal“3”)IL: marcador mayo“3” subterminalesPatrón del telómero(“marker”)(“subterminal 3”)IIS: anillo de BalbianiCordón de zapatocentralDoble burbujaTrapezoide(“Balbiani ring”)(“shoestring”)(“double Hubble”)(“trapezoide (al)”)IIL:tres bandas biendefinidasParabalbiani(“3 sharp”)(“parabalbiani”)IIIS: grupo de bandaspesadasAmpollaTelómero festoneado(“heavy band Group”)(“blister”)(“frazzled end”)IIIL: banda basal pesadaMarcador basal3 grupos pesados(“heavy basal band”)(“basal marker”)(three heavygroups”)

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