Espectrofotometría

RESUMEN
Antecedentes: La absortividad molar es la característica de una sustancia que nos
dice cuanta luz absorbe a una longitud de onda determinada. La ley de Beer se
cumple mejor cuando la absorbancia es casi constante a lo largo de la banda
escogida de longitudes de onda.
Objetivo: Se pretende determinar con un espectrofotómetro, la longitud de onda a la
cual una sustancia posee su absorbancia máxima, y determinar la concentración de
una solución con concentración desconocida por medio de la Ley de Beer.
Diseño: se determinó la longitud de onda a la cual la absorbancia del KMnO 4 1x10-4 M
es máxima, y a esa longitud se midió la absorbancia de soluciones de KMnO 4 a
diferentes concentraciones, utilizando agua destilada como blanco. Con los
resultados obtenidos se creó una curva de calibración Absorbancia vrs.
Concentración (M), y se determinó la ecuación de la recta de la curva de
calibración. Por último se midió la absorbancia de una muestra con concentración
desconocida.
Resultados: Se determinó que la absorbancia máxima del KMnO4 1x10-4 M se
encontraba a una longitud de onda de 520 nm. Y con esta misma longitud de onda
se midió que la absorbancia del KMnO4 5x10-4 M es 1.312, KMnO4 2x10-4 M es 0.426,
KMnO4 1x10-4 M es 0.160, KMnO4 5x10-5 M es 0.071, KMnO4 2x10-5 M es 0.147, y KMnO4
1x10-5 M es 0.045. Y la absorbancia de la solución problema fue de 0.109, su
concentración de 4.94x10-5 M con 64.84% de error.
Conclusiones: Se puede concluir que la concentración de la solución problema,
según las absorbancias determinadas, se encuentra entre 2x10-5 M y 5x10-5 M, y
efectivamente fue 4.94x10-5 M con 64.84% de error. Que la absorbancia máxima del
KMnO4 1x10-4 M se encuentra en una longitud de onda muy cercana a 520 nm, pues
como se midió de cada 20nm, no se puede asegurar que sea 520 nm exactos.

PALABRAS CLAVE
Espectrofotometría, ley de Beer-Lambert, absorbancia, transmitancia.

INTRODUCCIÓN relaciona la absorción de luz con las

La Ley de Beer declara que la
cantidad de luz absorbida por un
cuerpo depende de la concentración
en la solución. (1)
En la Ley de Lambert se dice que la
cantidad de luz absorbida por un
objeto depende de la distancia
recorrida por la luz. (1)
La absorbancia de una especie en
solución homogénea es directamente
proporcional a su actividad óptica,
longitud del paso óptico y su
concentración. La ley de Beer-Lambert
propiedades del material atravesado.
(1)
A = abc
La transmitancia es la cantidad de
energía que atraviesa un cuerpo en
determinada cantidad de tiempo. (1)
La espectrofotometría es el método de
análisis óptico más usado en las
investigaciones químicas y biológicas.
El espectrofotómetro es un instrumento
que permite comparar la radiación
absorbida o transmitida por una
solución que contiene una cantidad
desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la
misma sustancia. (2)
La espectrofotometría es utilizada para
determinar la cantidad de
concentración en una solución de
algún compuesto, determinar las
estructuras de diversas moléculas,
identificar unidades estructurales
específicas ya que estas tienen distintos
tipos de absorbancia. (2)
Se denomina espectro
electromagnético a la distribución
energética del conjunto de las ondas
electromagnéticas. Referido a un
objeto se denomina espectro
electromagnético o simplemente
espectro a la radiación
electromagnética que emite (espectro
de emisión) o absorbe (espectro de
absorción) una sustancia. La longitud
de una onda es el período espacial de
la misma, es decir, la distancia a la que
se repite la forma de la onda. (2)
El objetivo de la práctica fue
determinar con un espectrofotómetro,
la longitud de onda a la cual una
sustancia posee su absorbancia
máxima, y determinar la concentración
de una solución con concentración
desconocida por medio de la Ley de
Beer. (3)
MATERIALES Y MÉTODOS
1. Determinación del espectro de
absorción
 Se midió la absorbancia del
KMnO4 1x10-4 M cada 20 nm
desde 400 hasta 600 nm. Así se
determinó la longitud de onda
en la que su absorbancia era
máxima.
2. Obtención de la curva de
calibración
 Se midió la absorbancia de las
soluciones de KMnO4 5x10-4 M,
2x10-4 M, 1x10-4 M, 2x10-5 M, 5x10-5
M y 1x10-5 M, utilizando como
blanco el agua destilada. así se
creó una curva de calibración
Absorbancia vrs. Concentración
(M), y se determinó la ecuación
de la recta.
3. Medición de la muestra con
concentración desconocida
 Se midió la absorbancia de la
muestra problema, y se calculó
su concentración utilizando la
ecuación de la recta y
mediante la interpolación del
valor de absorbancia.
CÁLCULOS
1. Porcentaje de error
 Se calculó el porcentaje de
error de longitud de onda para
la máxima absorbancia de la
solución de KMnO4 1x10-4 M.
→ %E = 525 – 520 *100
525
→ %E = 0.95 %
2. Concentración de la solución
problema
 Se calculó la concentración a la
cual se encontraba la solución
problema mediante la
ecuación de la recta obtenida
en la curva de calibración.
→ y = 2584.2x – 0.0188
→ x = 0.109nm + 0.0188
2584.2
→ x = 4.94x10-5 M
3. Porcentaje de error
 Se calculó el porcentaje de
error de la concentración
obtenida para la solución
problema.
→ %E= 3x105 – 4.94x10-5 *100
3x10-5
→ %E = 64.84 %
 RESULTADOS DISCUSIÓN

Cuadro No. 1 “Longitud de onda de la El objetivo de la práctica fue

absorbancia máxima del KMnO4 1x10-4 determinar con un espectrofotómetro,
M”. Se midió la absorbancia de la la longitud de onda a la cual una
solución indicada a la cual la sustancia posee su absorbancia
absorbancia era máxima, máxima, y determinar la concentración
comparándola con el valor teórico y de una solución con concentración
encontrando su porcentaje de error. desconocida por medio de la Ley de
Longitud de Longitud de Beer.
% de
onda onda
Error
Experimental Teórica Al medir las absorbancias de una
520 525 0.95 solución de KMnO4 1x10-4 M, se
determinó que la absorbancia máxima
Cuadro No. 2 “Absorbancia y sucede a una longitud de onda de 520
concentración de la solución nm. Pero al comparar esta
problema”. Se midió la absorbancia a absorbancia con la teórica, 525 nm, se
la cual se encontraba una solución de puede decir que es una aproximación
KMnO4 con concentración muy cercana. Pues las absorbancias se
desconocida, y por medio de la midieron cada 20 nm desde 400 hasta
ecuación de la recta se obtuvo su 600 nm, y por lo mismo no se pudo
concentración. El valor teórico de la haber medido a una longitud de onda
concentración de la solución problema entre los 520 y los 540 nm. Por esto se
es de 3x10-5 M. considera que fue una medición muy
Concentración % de acertada, como se puede apreciar en
Absorbancia el cuadro No. 1.
(M) Error
0.109 4.94x10-5 64.84
A la longitud de onda de 520 nm, se
Gráfica No. 1 “Absorbancia vrs. midió la absorbancia de las soluciones
Concentración de las soluciones a de KMnO4 a diferentes
diferentes concentraciones de concentraciones. Así se obtuvo que la
KmNO4”. Se graficó la curva de absorbancia del KMnO4 5x10-4 M es
calibración se las soluciones a diversas 1.312, KMnO4 2x10-4 M es 0.426, KMnO4
concentración, con su absorbancia 1x10-4 M es 0.160, KMnO4 5x10-5 M es
respectiva. 0.071, KMnO4 2x10-5 M es 0.147, y KMnO4
1x10-5 M es 0.045. En la gráfica No. 1 se
Curva de Calibración del KmNO4 puede observar que la curva de
titulación es congruente, ya que a
1.4 mayor concentración, mayor
1.2
y = 2584.2x - 0.0188 absorbancia.
R2 = 0.9854
1
Absorbancia

Para la identificación de la
0.8 absorbancia de la muestra problema,
0.6 ésta se midió a una longitud de onda
0.4 de 520 nm, como para las mediciones
anteriores. Su absorbancia fue de
0.2
0.109, por lo que se concluyó una
0 hipótesis que indicaba que su
0.E+00 1.E-04 2.E-04 3.E-04 4.E-04 5.E-04 6.E-04 concentración debía permanecer
Concentración (M) dentro del rango de 2x10 M y 5x10-5 M.
-5
Luego, por medio de la ecuación de la cada medición, y no haber preparado
recta se obtuvo la concentración de las soluciones a las concentraciones
dicha solución, la cual fue 4.94x10-5M, adecuadas.
con un porcentaje de error del 64.84%,
como se muestra en el cuadro No. 2. Por ello, se puede concluir que la
longitud de onda más adecuada para
Al terminar la práctica, se indicó que la medir las absorbancias es de 520 nm,
concentración de dicha solución siempre y cuando se deba utilizar un
problema era de 3x10-5 M, por lo que se múltiplo de 20. Que la absorbancia
validó la hipótesis realizada determinada para la solución
previamente. problema coincide con su
concentración. Y que curva de
Las fuentes de error producidas a lo calibración tiene congruencia entre las
largo del experimento fueron el hecho absorbancias medidas y las
de no haber calibrado correctamente concentraciones de dichas soluciones.
el equipo de espectrofotometría, no
haber utilizado el blanco antes de

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. McKee, T. 2003. “Bioquímica: la base molecular de la vida”, 1era edición.
McGraw-Hill.
2. Lehninger. 2008. “Principios de la Bioquímica”, 4ta ed. W.H. Freeman and Co, New
York.
3. Skoog, D.A.; West, D.; Holler, F.; Crouch, S. 2005. “Fundamentos de la Química
Analítica”, 8ta edición. Mc Graw-Hill, México.