PROTEINAS TOTALES Y

ALBUMINAS

PilY Carmona calle

Docente: Valerio cárdenas Lévano

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Introducción

En las prácticas en los que se realiza exámenes de proteínas totales y fraccionadas

se busca encontrar los niveles de proteínas y determinar si las variaciones en estas
son los causantes de ciertas patologías en las personas.

En esta práctica utilizaremos el método colorimétrico usando un espectrofotómetro

para medir las concentraciones y definir los valores por medio del factor de
calibración.
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 Objetivos: Aprender a realizar un examen de proteínas y dar los

resultados correctos.

 Materiales y equipos:

 Equipos:

 Espectrofotómetro.
 Micropipeta.

 Materiales:

 Pipetas
 Peras para pipetear
 Tubos de ensayo
 Gradillas
 Parafin
 Reactivos para exámenes de proteínas y muestra problema.
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 Prueba de proteínas:

 Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares,

ampliamente distribuidos en el organismo, esencialmente para la vida
actúan como elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo
la forma de enzimas.
 Los enlaces pepiticos de las proteínas reacciona n con el ion cúprico
en medio alcalino para dar un complejo violeta con máximo de
absorción a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la
concentración de proteínas totales en la muestra.
 Incubar por 10 minutos.

BL ST MX
muestra - - 0.01
está nda - 0.01 -
r
reactivo 1.0ml 1.0ml 1.0ml

 Valores referenciales: 6 y 8.3 g/d

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 Prueba de albuminas:

 El tinte verde de bromocresol en un pH de 4.2 y en la presencia de un

surfactante no iónico ata específicamente la albumina para formar un BCG-
albumina coloreado complejo con absorbancia máxima en 620
nanómetros.

BL ST MP S MP
P
Muestra - - 0.01ml 0.01
Está nda - 0.01 - -
r
reactivo 1ml 1ml 1ml 1ml

 Mesclar e incubar por 3 minutos a temperatura ambiente

Y luego leer a 620 nm
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 Prueba de proteinuria:

1]. Muestra: 0.5 mL de orina (lo más fresca posible)

2]. Colocar 2.5 mL de ácido sulfosalicilico al 3% (Química Monterrey)
3]. Agitar suavemente
4]. Incubar a temperatura ambiente durante 10 min
5]. Evaluar el grado de turbidez con respecto a una muestra que contenga
agua destilada.
6]. A mayor turbidez, mayor cantidad de proteinuria. Se puede reportar en +,
++. +++. y ++++
7]. Si el resultado es positivo, repetir el ensayo utilizando procedimientos mas
específicos.
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Cuestionario

1. -hable sobre el pH y el pk.

a) pH urinario: el pH es el inverso del logaritmo de la concentración de

iones hidrogeno. Valores bajos indican acidez y valores altos alcalinidad. En
adultos sanos oscila entre 4,5 y 8,0 aunque normalmente es ligeramente acido.
Disminuye en situaciones de acidosis fisiológica (ayuno) y patológica (salvo en
Las acidosis tubulares), así como si se sigue una dieta rica en proteínas o si hay
deshidratación o proliferación en la orina de bacterias productoras de acido.
La participación de los diferentes amortiguadores de la orina en la formación de
acidez titulable depende de su pk. Si este está en la franja fisiológica del pH, como
por ejemplo el pk 6,8 del fosfato tendrá gran capacidad amortiguante. así al ph
7,4 de la sangre, el 80% de este amortiguador estará en forma de fosfato alcalino
(Na2 HPO4).al pH 6,8, la mitad estará en esta forma y la otra mitad habrá sido ya
transformada en sal acida.
A un ph urinario de 5 cerca del 98% del amortiguador ya estará en forma de sal
acida .
Por otro lado,un amortiguador como la creatinina con pkde 4.97 funcionara como
recptor importante de iones H .
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2. menciones los aa esenciales y los no esenciales

Aa esenciales |aa no esenciales

 Fenilalanina
 Alanina
 Metionina
 Histidina  Acido aspartico
 Triptófano  Glicina
 Treonina  Serina
 Leucina  Asparagina
 Isoleucina Acido glutamico
 Lisina  Arginina
 Valina  Cistina Tirosina
 Cistina
 Glutamina Prolina
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3.-clasificar los aa por sus características.
Propiedad aa aa Aa Aa aromá ticos Con
á cidos bá sicos azufrados alifá ticos grupo
aa amida
Acido aspartico 
valina 
alanina 
glicina 
leucina 
isoleucina 
Metionina 
cisteína 
Acido 
glutamico
Lisina 
histamina  
Asparagina 
glutamina
Fenilalanin 
a
Tirosina 
triptó fano 
arginina 
lisina 
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4¿Que patologías podemos observar con los niveles de
proteínas disminuidas.

 Síndrome nefrítico
 Catarata congénita
 Depresión
 Osteoporosis
 Clusterima
 marasmo

5¿qué es la microalbuminuria? hable sobre la técnica.

La microalbuminuria (MA) se define como las elevaciones persistentes de albúmina

en la orina entre 30 y 300 mg/día (20 a 200 μg/min). Estos valores son menores a
aquellos detectados con las tiras reactivas para la detección de proteína en orina,
lo cual no resulta positivo hasta que la excreción de proteína excede los 300 a 500
mg/día. Sin embargo, una nueva generación de tiras reactivas para orina
desarrolladas específicamente para detectar MA pueden detectar ahora niveles de
concentración al, o por debajo, del nivel definido de 30 mg/día que, con el gasto
urinario normal, corresponde a unas concentraciones de albúmina de 15 a 20
mg/L.

Aun cuando una recolección de orina de 24 horas era un buen estándar para la
detección de microalbuminuria, estudios recientes han demostrado fuertes
correlaciones entre la muestra de orina de la mañana y las recolecciones de 24
horas.2 Una muestra de orina por la mañana del paciente puede recolectarse en el
consultorio o gabinete y enviarse al laboratorio para la determinación de albúmina y
creatinina. La razón para cuantificar tanto la albúmina como la creatinina es que la
sola determinación de albúmina puede dar resultados falsos ya que ésta, pero no la
velocidad de excreción de albúmina, está influenciada por el volumen de orina. Un
valor por arriba de 30 mg/g (0.03 mg/mg) sugiere que la excreción de albúmina está
por arriba de 30 mg/día y, por tanto, está presente una microalbuminuria. La
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deshidratación, fiebre, ejercicio, insuficiencia cardiaca y un mal control glucémico se
encuentran entre los factores que pueden causar microalbuminuria transitoria.3 Se
recomienda el uso de la relación albúmina/creatinina como una estrategia de
escrutinio de preferencia para

6Esquematice un proteinograma electroforético.

7Que es la proteína de bence-jones.

La proteína de Bence Jones es una globulina monoclonal que se encuentra en sangre

u orina. El hallazgo de esta proteína en el contexto de manifestaciones de daño
orgánico como el cáncer de médula ósea maligna, fallo renal, enfermedad lítica del
hueso o anemia o grandes números de células plasmáticas en la médula ósea de
pacientes puede ser diagnóstico de mieloma múltiple, el cual está presente en los 2/3
de los casos.[1]

Las proteínas son cadenas ligeras libres de inmunoglobulina (para proteínas) y se

producen por células plasmáticas neoplásicas. Pueden ser de tipo kappa (en la
mayoría de los casos) o lambda.[1] Las cadenas ligeras pueden ser fragmentos de
inmunoglobulina o inmunoglobulinas simples homogéneas. Se encuentran en la orina
puesto que son pequeñas, y por tanto son fácilmente aclaradas por los riñones. Las
cadenas ligeras pueden ser detectadas por calentamiento o electroforesis de orina
concentrada. Éstas precipitan cuando se las calienta entre 50 y 60 ºC y se redisuelven
entre 90 - 100 ºC. Estos test son esenciales en pacientes sospechosos de tener
proteínas de Bence Jones en su orina ya que estas proteínas no reaccionan con los
reactivos que se utilizan normalmente en las pruebas habituales de orina.
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 Conclusiones:

Se concluye que la determinación de proteínas en sangre es diversa y que se tiene a

la mano diversos métodos de análisis clínicos para determinar la presencia de niveles
bajos de proteínas en el organismo.

 Bibliografía:

 Introducción al análisis fundamental, escrito por

Lucas Hernández pg. 120

 http://www.tuotromedico.com/temas/hemoglobina_g
licosilada.htm

 http://www.clinicadam.com/salud/5/003597.html

 http://www.portaldog.com.ar/textos/Proteinas_serica
s.htm