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Equipos de inmunología

¿QUE ES UN LABORATORIO CLÍNICO?

Es el lugar donde se realizan análisis clínicos que


contribuyen al estudio, prevención, diagnóstico y
tratamiento de los problemas de salud de los pacientes.

DOS TIPOS DE LABORATORIOS CLÍNICOS

LABORATORIOS DE RUTINA: tiene 4 departamentos básicos

 Hematología
 Inmunología
 Microbiología
 Química Clínica

LABORATORIOS DE ESPECIALIDAD: se realizan estudios


más especializados y sofisticados, que requieren equipo
especializado y personal calificado. Participan también en
programas de investigación.

Algunos ejemplos:
 Estudios genéticos
 Cromatografías de alta resolución
 Amplificación de ácidos nucléicos
 Citrometría de flujo

Inmunología
1.- DEFINICIÓN:
Realiza pruebas sobre anticuerpos que revelan la actividad y
presencia de microorganismos en el cuerpo.

2.-PRUEBAS
Miden la cantidad de inmunocomplejos (unión antígeno-
anticuerpo), utilizando radioisótopos, colorantes
fluorescentes o enzimas.

 Radioinmunoanálisis (RIA)

 ELISA

 Inmunofluorescencia.

 Serología

EL RADIOINMUNOANÁLISIS (RIA)
 Técnica utilizada para determinar la concentración de un
antígeno, anticuerpo u otra proteína del suero.

Diferencia del RIA y ELISA


RIA ELISA

Uso general medir los Utilizada con frecuencia en


niveles de hormonas en diagnósticos virales.
sangre y líquidos de tejido.

ELISA
 Es una técnica de inmunoensayo se basa en la detección
de un antígeno inmovilizado sobre una fase sólida
mediante anticuerpos que directa o indirectamente
producen una reacción, por ejemplo un colorante, puede
ser medido espectrofotométricamente.
 Se cuantifica con espectrofotómetro

 Utilizada con frecuencia en diagnósticos virales.

Tipos de ensayos ELISA


ELISA directo
• Las placas ELISA se preparan recubriendo los
pocillos con las soluciones en que se sospecha se
encuentra el antígeno.

• Se incuban con anticuerpos marcados.

• Indican la presencia de antígeno en la solución


analizada.

• Es necesario incluir controles negativos que serán


muestras del mismo tipo de las analizadas (sangre,
orina)

ELISA indirecto

• Los controles positivos y negativos son los mismos.


• El sistema de detección emplea dos anticuerpos
uno primario contra el antígeno, el secundario
marcado contra el primario.

ELISA sándwich
• Ensayo de captura de antígeno y detección
mediante inmunocomplejos Se trata de un ensayo
muy empleado en el que se recubre el pocillo con
un primer anticuerpo anti-antígeno.

VENTAJAS DE ELISA
-El ensayo puede ser automatizado

-Es cuantitativa

-Técnica más sensible, detecta menor cantidad de anticuerpos

-Útil para estudiar cualquiera de los anticuerpos antinucleares


Pruebas de inmunoflurescencia
 se utiliza inmunoglobulinas marcadas con sustancias
fluorescentes como isotiosyanato de fluoresceínas, parecido
a las enzimas empleadas en los de Elisa .Es un método muy
sensible que requiere el uso un microscopio de Florencia,
tiene y un campo muy amplio de aplicación y se utiliza para
la detención de antígenos en los tejidos.
 Estas pruebas son muy sensibles pero su
interpretación, las pruebas de inmunoflurescencia, tiene
dos variantes: Directa, Indirecta.

INMUNOFLURESCENCIA DIRECTA

 Mediante este examen, se puede detectar la presencia


de subespecies de T pallidum en tejidos, fluidos corporales,
secreciones y exudados de lesiones.

Inmunoflurescencia Indirecta
 Técnica de primera elección para detectar anticuerpos
antinucleares (ANA)

Tinción de inmunoflurescencia
La tinción fluorescente de los cromosomas presenta 4
principales patrones de inmunoflurescencia del núcleo:

PATRÓN HOMOGÉNEO O DIFUSO:

El núcleo se tiñe de manera uniforme y sugiere la presencia de


anticuerpos a ADN nuclear o histonas.

PATRÓN PERIFÉRICO O ANULAR:

El núcleo se tiñe predominantemente en la periferia e indica la


presencia de anticuerpos contra los complejos ADN nuclear-
histonas.
PATRÓN MOTEADO:

Presenta numerosos puntos uniformes y pequeños de


fluorescencia. Es un patrón inespecífico que se aprecia en
Artritis Reumatoide.

PATRÓN NUCLEOLAR:

Teñido intenso y homogéneo de los nucléolos,


frecuentemente relacionado con fluorescencia homogénea
débil del resto del núcleo. Relacionado con Esclerosis
sistémica progresiva (ESP)
PRUEBAS SEROLÓGICAS
1.-DEFINICI0N:
Son formas de evaluación relativas, que detectan
concentración comparativa de ciertas clases de
inmunoglobulinas que podrían estar presentes en algunas
alergias.

Son de dos tipos: no-treponémicas y treponémicas

 PRUEBAS NO TREPONÉMICAS:

Consisten en baja sensibilidad en sífilis primaria temprana,


con prueba de campo oscuro positiva, en sífilis tardía y la
posibilidad de fenómeno de prozona o de resultados falsos
positivos.

 LAS PRUEBAS TREPONÉMICAS:

Emplean como antígeno al T. pallidum subespecie pallidum y


detectan anticuerpos específicos antitreponémicos

OBJETIVOS DE SEROLOGÍA
 Identificación de problemas de salud.

 Determinación de la distribución de una enfermedad.

 Determinación de la incidencia y prevalencia de una


enfermedad.

 Evaluación del sistema inmune del individuo o de una


población.

 Programación de calendarios de vacunación.

 Evaluación de programas o campañas de vacunación.

3.- equipos
 Microscopio de
inmunoflurescencia.

 Espectrofotómetro.
Microscopia de inmunoflurescencia
En 1941 Coons intentó conjugar los anticuerpos con colorantes
fluorescentes

En 1942 publicó la primera aplicación de esta técnica inmunológica

La microscopia de inmunoflurescencia es una técnica


inmunohistoquímica que consiste en conjugar colorantes
fluorescentes.

DESCRIPCIÓN DEL MICROSCOPIO DE


INMUNOFLURESCENCIA

 Consta de una fuente de luz (lámpara de mercurio o halógena)


la cual debe emitir la mayor cantidad de luz ultravioleta.

 un sistema de filtros, el de excitación o selección de luz


ubicado entre la fuente de luz y el preparado, tiene por objeto
permitir el paso de ondas de luz con longitud que caiga en el
rango azul con el fin que el preparado sea alcanzado
exclusivamente por la luz azul y produzca emisión de luz
fluorescente.

 Es segundo filtro es el de calor y está ubicado entre la fuente


de luz y el filtro de excitación en los microscopios de luz
transmitida y entre la fuente de luz y el espejo dicrómico en
los microscopios de luz incidente.

 El tercer tipo de filtro es de barrera, colocado antes del ocular


para prevenir daños retinianos que podrían ser causados por
rayos ultravioleta que escapan el espejo dicrómico.
FUNCIONAMIENTO
La luz de una fuente de longitud de onda múltiple se mueve a
través de un filtro excitador que solo permite que pase la radiación
excitada de la longitud de onda deseada. Esta radiación es
reflejada por el filtro dicromático y enfocada por la lente del
objetivo sobre la muestra, las moléculas fluorescentes de la
muestra se excitan y emiten luz (por fluorescencia) de una longitud
de onda específica y mayor. Esta luz es enfocada por el objetivo y
la mayor parte pasa a través del filtro dicromático y no se refleja.
Un filtro de barrera final bloquea toda la luz residual con la
frecuencia de la radiación de excitación.

Espectrofotómetro
Lector de Elisa
Disponen de sistemas de filtros que sólo permiten la lectura de una
o pocas longitudes de onda. Son espectrofotómetros capaces de
realizar lecturas seriadas de cada uno de los pocillos de la placa
ELISA. A diferencia de un espectrofotómetro convencional, con
capacidad de leer todas las longitudes de onda del ultravioleta y el
visible de manera continua, los lectores de ELISA disponen de
sistemas de filtros que sólo permiten la lectura de una o pocas
longitudes de onda. Son la que se corresponden con las necesarias
para determinar la densidad óptica de los cromógenos más
comúnmente utilizados.

Convencional
Con capacidad de leer todas las longitudes de onda del ultravioleta
y el visible de manera continúa.

Referencias bibliográficas
• http://www.lib.mcg.edu/edu/esimmuno/ch4/radassay.htm
• www.google.com.pe
• www.wikipedia.com
Año de la consolidación económica y social del Perú

SERGIO BERNALES
Docente: ESQUECHE ÁNGELES, CARLOS

CURSO: INSTRUMENTACIÓN DE LABORATORIO

Tema: EQUIPOS DE INMUNOLOGÍA


Ciclo: III b

ESPECIALIDAD: laboratorio clínico

Integrantes: murrugarra angulo roger


Tirado zelada ruth

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