EXPLORAREA ÎN LABORATOR A

HEMOSTAZEI
Lucrarea practică nr. 8.
INDICAŢIILE EXPLORĂRII
HEMOSTAZEI

 Investigarea cauzei unei hemoragii/tromboze

 Monitorizarea terapiilor anticoagulante ,fibrinolitice

sau substituţiilor de factori de coagulare

 Aprecierea pericolului de apariţie a hemoragiilor

înaintea intervenţiilor chirurgicale

 Screeningul diatezelor hemoragice/trombotice

 Evaluarea capacităţii de sinteză a ficatului

 ASPECTE PREANALITICE

Pregătirea bolnavului:
 evitarea efortului fizic
 evitarea fumatului şi a băuturilor continând
cofeină

Explorarea funcţiei plachetelor:

 nu se consumă medicamente care influentează
funcţia plachetară (antiagregante plachetare)

Explorarea trombofiliilor:
 Nu se administrează derivaţi de cumarină
(Syncumar)
 RECOLTAREA SÂNGELUI

Tuburi cu citrat 3,2%

Se evită aplicarea garoului timp îndelungat

Nu se recoltează primele 5 ml de sânge pentru probe

de hemostază (conţinut crescut de TF)

Nu se recoltează de pe branule spălate cu heparină

Omogenizare imediată

Testarea – în 3 ore de la recoltare

 HEMOSTAZA

Primară – legarea plachetelor la colagenul

expus din subendoteliul vaselor lezate

Secundară – activarea factorilor de coagulare

generarea trombinei
HEMOSTAZA
 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE

 Trombocite (PLT)
Număr
Morfologie
Funcţie 1. Timpul de sângerare
2. Adezivitatea plachetară
3. Agregabilitatea plachetară
 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE

Număr trombocite
- V. N.: 150.000- 400.000 ∕ mm³
- Trombocitopenii: < 100.000 ∕ mm³→ purpură ∕hemoragii

- Trombocitoze:
- fiziologice → mobilizare de la nivel splenic
- patologice → creşterea producţiei de plachete
 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
Morfologie
 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
Funcţia
1. Timpul de sângerare
- injurie capilară TS trombus plachetar
ferm

- informaţii despre mecanismul coagulării

vascular
plachetar
 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
Timpul de sângerare Ivy modificat

- stază venoasă la nivelul antebraţului

- incizii standardizate
- aprecierea duratei şi abundenţei hemoragiei

- V.N.: 2,5-9,5 min.

 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE

Timpul de sângerare Ivy modificat

TS crescut:
 trombocitopenii, trombocitopatii (afecţiuni ale
agregării, adeziunii trombocitare şi ale proceselor
de secreţie trombocitară), afecţiuni ale pereţilor
capilari;

TS normal in coagulopatii (exc.: afibrinogenimii).

 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE

2. Adezivitatea plachetară
unul din st. precoce ale hemostazei
Principiu:
- măsurarea descreşterii nr. de PLT dintr-o probă
care vine în contact cu o suprafaţă străină (strat
subendotelial- in vivo, perle sau vata de sticlă in
vitro)
- timp standardizat, 37 º C

- activare plachetară (stări pretrombotice)

- trombopatii, tratament cu aspirină, b. von
Willebrand
 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI PRIMARE
3. Agregabilitatea plachetară

Principiu:
- determinarea densităţii optice a plasmei bogate în
PLT (37ºC), înainte şi după adăugarea a diferiţi
agenţi inductori ai agregării
- transmisia optică: direct proporţională cu
agregarea plachetară

- boli trombo- embolice

- trombopatii
REACTIA LA ADP Inregistrarea grafica in dinamica a curbei
modificarii transmisiei optice a unei plasme
bogate in plachete (constant agitata la 37ºC)
in prezenta unor inductori agreganti
 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI
SECUNDARE
 COAGULOMETRIA
 Măsoară timpul scurs
de la momentul
adăugării reactivului
până la apariţia
cheagului de fibrină
(în general momentul
gelificării şi nu
cheagul de fibrină
stabilizat)
 Principiu: inducţie
electromagnetică
 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI
SECUNDARE
1. Timpul de protrombină (TP)

Principiu:
- explorarea factorilor căii extrinseci (VII, X, V,
II)

Tehnică:

TP: timpul scurs de la adăugarea tromboplastinei

tisulare până la formarea cheagului (sec)
 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI SECUNDARE

1. Timpul de protrombină (PT) - Quick

- V.N.: 11- 16 sec.

- lipsa factorilor II, V, VII, X

- avitaminoză K
- hepatită, ciroză
- anticorpi anti factor II, V, VII, X, hipo-
sau afibrinogenemie,disproteinemie.
 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI SECUNDARE
2. APTT
Principiu:
- test de coagulabilitate plasmatică globală
intrinsecă
APTT: timpul scurs de la contactul
plasmei (cu substituent
plachetar-cefalina) cu o suprafaţă
electronegativă (caolină-activator F
XII), după adaos de Ca2+, până la
apariţia cheagului de fibrină (sec.)
V.N.: 25- 40 sec
Alungirea APTT cu peste 9s se consideră valoare
patologică
 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI SECUNDARE
3. Timpul de trombină (TT)
- informaţii asupra fibrinoformării
Principiu:
- în prezenţa unei cantităţi standard de trombină
o plasmă normală, cu nivel de fibrinogen normal,
coagulează într-un timp definit şi constant

TT: timpul scurs de la adăugarea trombinei până la

formarea cheagului de fibrină (sec.)

V.N.: 10- 14 sec.

 INVESTIGAREA HEMOSTAZEI SECUNDARE
3. Timpul de trombină (TT)
Indicaţii:
- evidenţierea hipofibrinogenemiilor,
disfibrinogenemiilor şi afibrinogenemiilor
- monitorizarea terapiei cu heparină

- anomalii calitative şi cantitative ale

fibrinogenului
- prezenţa unei antitrombine în exces
 TRATAMENTUL ANTICOAGULANT

Boala tromboembolica principală cauză de deces

Forme clinice: - izolată (tromboze venoase,arteriale)

- generalizată (sindromul CID)

Tratamente antitrombozante:
- antiagregante plachetare
- antivitamine K1 şi heparina
- trombolitice
 Monitorizarea terapiilor cu heparină
nefracţionată
 Complexul heparină-
ATIII inactivează

 trombina şi Fxa,
 FXIIa, FXIa, FIXa;

 Testul recomandat:
APTT
Monitorizarea terapiilor cu heparină
fracţionată
 Se obţine din heparină prin
depolimerizare controlată
 Inhibă FXa, în mai mică
măsură FIIa
 Monitorizare obligatorie
doar în:
 Hemoragie pe parcursul
terapiei
 Insuficienţă renală
 Ineficienta profilaxiei
trombozelor venelor
profunde
 Test de laborator: testul de
inactivare a FX
MONITORIZAREA TERAPIILOR CU
ANTICOAGULANTE ORALE (CUMARINICE)
 Cumarina (antagonist al vitaminei K) inhibă sinteza
factorilor dependenţi de vit. K (II, VII, IX,X, proteina
C, proteina S)

 Teste de laborator: Timpul de protrombină (PT)

INR=PR ISI (PR=rata protrombinică)
 PR=PT plasmă bolnav/PT plasmă control
PT plasmă control (MNPT- Mean Normal Protrombin Time):
Media geometrică a PT determinat pe minimum 20 plasme
provenite de la persoane sănătoase;
ISI: International Sensitivity Index;
 Rezultate:
Profilaxie secundară antitrombotica: INR 2-3;
Terapie antitrombotică (valve mecanice): INR 2,5-3,5
Terapie antitrombotică (endocardită infecţioasă, valvulopatii
): INR 2-3
COAGULOPATIE DOBÂNDITĂ: CID
 Sindrom (40-50 de stări patologice individuale):
 Embolie amniotică, sindrom dead-fetus, malignoame, traume,
muşcătură de şarpe, etc.)

 starea de activare a sistemului de coagulare sub acţiunea

factorului tisular şi al diferitelor citokine, eliberate din monocite,
elemente subendoteliale;

 Tromboembolism diseminat cu ocluzii arteriale şi necroză

tisulară;

 Activarea continuă determină consumul factorilor de coagulare

cu apariţia hemoragiilor;
COAGULOPATIE DOBÂNDITĂ: CID
 Explorare de laborator:
 PT
 APTT;
 testul monomerilor de fibrină,
 Evidenţierea produşilor de degradare a firinogenului/fibrinei (testul
FDP,/D-dimeri)
 Numărătoarea trombocitelor;
COAGULOPATIE DOBÂNDITĂ: CID

 Indicaţii:

 Diagnosticul
coagulopatiilor prin
consum (DD.
Fibrinoloză primară şi
secundară)
 Diagnosticul
tromboemboliilor

 Dozare: metode imune

cantitative şi
semicantitative
COAGULOPATIE DOBÂNDITĂ: CID
 Evidenţierea D-dimerilor:
 FXIIIa stabilizează monomerii de fibrină prin
legături covalente încrucişate;
 Fibrinoliza secundară degradează filamentele
de fibrină;
 Fibrinoliza primara degradează fibrina prin
mecanism asemănător, rezultând fragmente D
şi E;
 Dacă anterior fibrinolizei s-a format fibrină
stabilizată, rezultă pe lângă monomerii de
fibrină şi fragmente D-dimerice legate prin
legături covalente;