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N O T AD E I N V E S T I G A C I ó N

PrimerReporte delVirusdelRayadodelBanano
(BSV) AfectandoPlantaciones
dePlátano
Wuso
Helena
5 AABSimmonds),
Belalcázar,2
Reichel,'Silvio Cañade azúcar(Sochorum
Emilio
GladysMúnera,i Arévalo
y Javier y Achira(Canna
' offícinorum)
Narváez, edulis)enColombia

ABSTRACT
Title:First Report of BananaStreakVirus En noviembrede 1995,en los Municipios de Andes,Veneciae Hispania (Antioquia),
(BSV) Infecting Plantain (MusaAAB La Tebaiday Montenegro(Quindío),seobservaronhojasde plantasdel clon Domini-
Simmonds), Sugarcane (Sacharum co-Hartón (Musa AAB Simmonds) con rayascloróticasy necróticas,síntomasque ca-
officinarum) andAchira racterizanIa enfermedaddel rayadodel banano.En ocasioneslas plantaspresentaban
(Cannaedulis)in Colombia síntomasde mosaicoen el pseudotalloy el engrosamientoy/o rompimiento de la base
Viruslike symptoms of yellow striate del mismo. Además,en las cercaníasde las plantacionesde plátano de los Municipios
mosaicto necrotic streakswere observed de Andes y Montenegro,se observaronrespectivamente plantasde caña de azucar
on olantain leavesof the cultivar Domini- (Saccharumofficinarum) con síntomasde clorosisy de achira (Canna edulis) con sín-
co-Hartón (MusaAAB Simmonds)in the tomas de mosaicoleve en sushojas.Muestrasde tejido foliar de éstastres especiesde
municipalitiesof Andes,Veneciaand plantasfueron analizadaspara detectarla presenciadel badnavirusdel rayado del
Hispania (Antioquia) and Tebaidaand
banano (BSV)y del virus del mosaicodel pepino (CMV), mediantela pruebaserológica
Montenegro( Quindío), Colombia.
Symptomssometimesincludedmosaic DAS-ELISA,empleando anticuerpos policlonalescomerciales(AGDIA Inc., Elkhart,
and swelling at the baseof the IN). En el casodel plátano, en la región de Antioquia únicamentesedetectóel BSV en
pseudostem. Furthermore,in the el 5oo/ode las plantas sintomáticasanalizadas,mientras que en el Quindío, el 6oo/ode
neighborhoodof the plantain crops,at the las plantasestuvieroninfectadassimultáneamentepor BSV y CMV. El BSV se detectó
localitiesof Andes and Montenegro,it was también en muestrasde tejido foliar de cala de azicar y achira, pero en ningún caso
observedrespectivelyplants of sugarcane resultaron positivas para el CMV, segúnIa prueba DAS-ELISA.El análisismediante
(Saccharum oficinarum L.) with chlorotic microscopíaelectrónicade immunoabsorbancia(ISEM) del tejido foliar de plátanoy
foliar tissueand of achira(Cannaedulis cañade azicar infecfado,indicó la presenciade partículasbaciliformestípicasdel BSV
L.) with symptomsof mild mosaicin their de aproximadamente30 x r1o nm. Hasta donde conocemos,estees el primer reporte
leaves. The foliar tissueof symptomatic
sobrela presenciadel BSVafectandoplátano,cañade azicar y achiraen Colombia y es
plants of thesethree species,was testedfor
la primera vez que sereporta a la achira como hospederode éstevirus en el mundo.
bananastreakvirus (BSV)and cucumber
mosaicvirus (CMV) by doubleantibody
sandwichenzime-linked immunosorbent PalabrasClaves:Virus del rayadodel banano,BSV virus del mosaicodel pepino, CMV,
assay(DAS-ELISA)with commercial plátano, Musa spp.,Saccharumofficinarum, Canna edulis.
polyclonal antisera(Agdia Inc., Elkhart,
IN). BSVwasdetectedin samplesof all
I NTRODUCC I ON
plant species. In Plantain,5ooloof the
examinedplants from the Antioquia T-r
-8Er-nroro^o y el banano(Musa spp.l primera vez en ;.974en Costade Marfil,
regionwereinfectedby BSV but not
CMV; whereas,at the Quindío region, son alimentosbásicosen la canastafami- Africa, donde ocasionópérdidashastade
6ooloof the plants were simultaneously liar de los colombianosy su exportación w )oo/oen banano Cavendish,cultivar
infectedby both viruses,as detectedby constituyeun factor importante en la ge- Povo (AAA)(Lockhart, 1993).Estaenfer-
DAS-ELISA.CMV wasnot detectedin neraciónde divisaspara el país.De igual medad ha sido reportadacasien todaslas
foliar tissueof either sugarcaneor achira manera,la industria derivada del cultivo regionesen donde se cultivan plátano y
plants.Immunosorbentelectron banano,incluyendoAustralia,Asia,Afri-
de la caña de azucar (Saccharumoffici-
miéroscopyanalysis(ISEM) of BSV narum) es un renglón sobresalienteen la cay varios paísesde Centro y Sur Améri-
inf-ectedfoliar tissueof plantain and ca, como Honduras, Ecuador,Venezuela
economía nacional. Las enfermedades
sugarcane, showedthe presence ofviral
causadaspor virus limitan la producción y Brasil(Iones,1994).
bacilliformparticlesmeasuringca.30x rro
de estoscultivos. El único virus reporta- El BSVesun miembro del grupo de los
nm, typical of BSV.Up to our knowledge,
this is the first report of BSV infecting do en Colombiaafectandoplantacionesde badnavirus(Plotz et a1.,1994), caracteri-
Musaspp.,Saccharumofficinarumand plátanoy banano (Belalcázar,r99r; Casta- zadospor tener un genomacircular de
Canna edulisin Colombia, and the first io et a1.,1995),esel virus del mosaicodel ADN de cadenadoble de 2.4kb, conteni-
time that Cannaedulisís reportedasa pepino (CUV;. Por su parte,el virus del do dentro de partículas baciliformes de
host foi this virus. mosaicode la cañade azicar (SCMV) es aproximadamente119+8x 27+3 nm. Las
la única enfermedadde etiologíaviral re- plantasafectadaspor BSV presentanini-
r. Programa Nacional de BiotecnologíaAgrícola,
Corpoica, A.A. z4or42 - Las Palmas,SantaFe de portada en este cultivo en Colombia cialmenteun rayadoclorótico continuo o
Bogotá,Colombia;z. ProgramaRegional (CENICAñA,rg8z). interrumpido en lashojas,y perpendicu-
Agrícola, Regional 9, Corpoica, A.A. t287, lar a la nervadura central. El rayado
La enfermedaddel rayadodel banano,
Manizales,Colombia; 3. CRECEDSuroeste,
es causadapor el virus del rayado del clorótico seconvierteluego en un rayado
Occidente de Antioquia y Sur del Chocó,
Regional4, Corpoica, A.A.51764,Medellín. banano (BSV),el cual fue reportadopor necrótico (Lockhart, 1986).Las plantas

REV|SC
TA VA
ORPOTC O.L| . N " l . O C T U B Rr 9E9 6
¡6 delvirusBSV
Primerreporte

presentanmenor creclmlento y vlgor, ra-


cimos pequeños,deformesy menor ren-
dimiento (PIoIzet a1.,ry94).El virus suele
encontrarseen bajasconcentraciones en el
tejido foliar infectadoy debido a la perio-
dicidad en la aparición o expresiónde los
síntomas,se recomiendan períodos de
cuarentenaentre 9 y 12 meses,en estas
plantas(Frisony Putter,1989).
Como la mayoríade los badnavirus,el
BSVtieneun rangorestringidode hospe-
deros.El otro hospederoreconocidoesla
caña de az:úcar. El BSV estransmitido de
manera semipersistenteentre plantas de
banano por el insecto Planococcus citri,
"cochinilla chinche ha-
conocido como o
rinoso de los cítricos".Además,puedeser
transmitido mediante inoculación mecá-
nica de plantasde banano a cafa de azi-
car, a través de la semilla y mediante
propagaciónvegetativa(Lockhart,1988).
A finalesde noviembrede 1995'sevisi-
taron diferentesplantacionesdeplátanocv. F¡gural. Mapa deColombiadonde se
Dominico-Ha rtón (Musa AAB Simonds) deVenecia
losMunicipios
indican (t),
Hispania (3),localizados
(2)y Andes enel
en la zonacafeterade los Departamentdos
departamento losMunicipios
deAntioquia;y
de Antioquia y Quindío en Colombia, los deTebaida (5)enel
(4)y Montenegro
cuales presentabansíntomas de rayado departamento delQuindí0.
cloróticoy necrótico,semejantesa los cau-
sadospor la enfermedaddel rayado del
banano.Seobservarontambiénsíntomas anticuerpospoliclonalescomerciales(Ag- Resultados
de clorosisen lashojasde plantasde caña dia, Inc. Elkhart, IN) para detectarel virus Sintomatología. La Figuraz muestralos
de azicar (Saccharumofficinarum) sem- del mosaicodel pepino (CMV) y el virus síntomasde rayado clorótico y necrótico,
bradasen plantacionesvecinas.Se inició del rayadodel banano (BSV).El antisuero observadosen hojas del clon de plátano
una investigacióncon el objetivo de iden- paraBSVcorrespondea una mezclade va- Dominico-Hartón. El rayadoclorótico se
tificar el agentecausalde éstaenfermedad rios antisuerospoliclonalesobtenidosa presentaen bandasde color amarillo y/o
en plátano y cañade azucar.En ésteestu- partir de lascepasdeMarruecos(BSV-Ma), anaranjado,perpendicularesa la nervadu-
dio sedemuestraque el agentecausaldel Ruanda (BSV-Rw) y Tiinidad-Mysore ra centralde lashojas,lascualesposterior-
rayadoclorótico observadoen los cultivos (BSV-My). mente se tornan necróticas.En algunas
de plátano y cafa de azicar en la región Microscopíaelectrónica.Se realizó la plantascon síntomasde rayadoen lasho-
antioqueñaesel BSV.Además seencontró prueba de serología específica para jas, también se observaronsíntomasde
que la achira (Canna edulis)es un nuevo microscopíade transmisión (Immuno- mosaico en el pseudotallo,acompañado
hospederodel BSV. sorbentelectronmicroscopy- ISEM). Para de necrosis interna, así como un
realizaréstaprueba,el tejido foliar sema- cuarteamientoen la basedel pseudotallo
Materialesy Métodos ceróen tampón fosfatoo.ot M, pH7.6,en (yaguaso calcetas),debido al hinchamiento
Material vegetal.Serecolectaronmues- una relaciónr:ro (p/v) y se centrifugóa de éste(Figura3). Los síntomasque seob-
tras de tejido foliar con síntomasde raya- 8.ooo g durante r5 min. Se recolectóel servaron en las hojas de caña de azicar
do clorótico y necrótico,así como tejidos sobrenadantey se conservóa 4oC.Seco- fueron de rayascloróticasdelongitudesdife-
del pseudotallode plantasde plátanode la locó una gota de una dilución r:roo del rentes,paralelasa Ia nervaduracentral de las
variedadDominico-Hartón, en plantacio- antisueroparaBSVen tampón fosfatoo.or hojas (Figura 4). En las hojas de achira se
nes cercanasa los municipios de Andes, M, pH 7.6, sobre rejillas de cobre observaronsíntomasde un leve mosaico
HispaniayVenecia,Departamentode An- recubiertascon collodión y se incubaron (Figura 5).
tioquia y La Tebaiday Montenegro en el a temperatura ambiente durante 5 h Serología.El BSVsedetectómediantela
DepartamentodelQuindío (Figurar). Ade- (Robertset al., 1984).Las rejillasse lava- prueba serológicaDAS-ELISAen ro de las
más se recolectaron muestras de tejido ron con el tampón solo, se colocaron so- 20 muestrasde tejido foliar de Dominico-
foliar con síntomasde clorosisde plantas bre una gota del sobrenadanteobtenido Har tón analizadas(5oolo), p rovenientesdel
de cañade azicar y achíra,encontradasen del maceradode tejido infectado y se in- Departamentode Antioquia. En éstema-
lascercanías de lasplantacionesde plátano, cubaron a 4oCpor z4 h. Despuésde la terial no se detectóla presenciade CMV.
en las localidades de Andesy Montenegro, incubación,lasrejillasselavaroncon agua Sin embargo,en las muestrasde tejido
respectivamente. destilada,se tiñeron negativamentecon foliar de plantassintomáticasobtenidasde
Serología.Lasmuestrasfueron analiza- acetatode uranilo al zo/oduranle z min y plantacionesde laslocalidadesde Tebaida
das mediantela prueba serológicaDAS- se observaronal microscopio eldctrónico y Montenegro,Departamentodel Quindío
ELISA(AdamsyClark gTT). Seemplearon de transmisión(HITACHI HU-rzA). (Fig.r),se logró detectarpor serologíala

C O R P O I C .A V O t | . N o l . O C T U B R E
REVISTA 1996
PrimerreportedelvirusBSV ¡7

(A)y de dehinchamiento
5 Síntomas
Fagura y
Figura2 Síntomasderayadoclorótico
rayado (B)enhojasdeplátano
necrótico dela delpseudotallo
cuarteamiento en
Dominico-Hartón
variedad porel BSV
infectadas olantas
deolátanodelavariedad
porBSV.
infectada
Dominico-Harión

Figura5
Slntomasde
mosaicoleveen
hojasdeachira
(Connoedulis)
por
infectada
BSV.

F¡gura4 Síntomas
enhojas
declorósis
decañadeazúcar
(Socchorun
officinorun)
porBSV.
infectada
58 PrimerreportedelvirusBSV

presenciasimultáneade BSVy CMV en 13


de zz plantasanalizadas(6o0/o);aunquese
encontraron también plantas infectadas
separadamentepor cadavirus. Así mismo
se detectóla presenciade BSV en extrac-
tos de tejido del pseudotallode plantasque
presentabanslntomasde rayadoclorótico
en las hojas.EI anrílisisserológicode teji-
do foliar de caña de aztJcary achira tam-
bién resultó positivo para BSV, pero
negativopara CMV.
Microscopía electrónica. La prueba
ISEM de los extractosfoliares de plantas
de plátano y caña de azucar que resulta-
ron positivasmediante serologla,permi-
tió determinar la presenciade partículas
baciliformes de aproximadamente3o X rro
nm, característicasde BSV (Figura ó).

Discusión
Basadosen los síntomasobservadosy
en los resultadosde laspruebasserológicas
DAS-ELISAe ISEM. en esteestudiosede-
terminó que el agentecausalde la enfer-
medad que se observó inicialmente
afectandoplantacionesde plátano y caña
de azúcaren el suroestedel Departamen-
to de Antioquia, esel virus del rayado del
banano.Además,el BSV selogró detectar
en tejido foliar de achira con slntomasde
mosaicoleve.Hastadonde seconoce,este
esel primer reporte sobrela presenciadel
virus del rayado del banano infectando a
estostrescultivosen Colombia yla prime-
ra vez que se reporta a la achira (Canna
edulis) como hospederodel BSV.Hasta el
momento, el BSV sólo sehabía reportado
afectando a Musa spp. y, Saccharum
officinarum, obedeciendo al restringido
rango de hospederosdel grupo de los
badnavirus,al cual perteneceel BSV.
El diagnósticodel BSV esdiffcil de rea-
lizar,debido a la heterogeneidadgenómica
y serológicade los diferentesaislamientos
del BSV (Lockhart,1993).La deteccióndel
BSV no sepuede realizarmediantela téc-
nica de aniílisisde la doble cadenadeARN
de
Figura6 Microfotografí.a (dsRNA), debido a que el virus no posee
partículas deBSV
baciliformes en intermediariosreplicativosde estetipo (su
(A)y de
tejidofoliardeplátano genomaconsisteen ADN de doble cade-
cañadeazúcar (B).
na). De igual forma,la detecciónmedian-
te la amplificación de fragmentos de su
ADN genómico,empleandola reacciónen
cadenade la polimerasa(PCR),escompü-
cada por la gran variabilidad del virus.
Además,la concentracióndel virus esge-
neralmente baja, ocasionandoincluso la
desapariciónperiódica de los síntomasen
lashojasy resultadosnegativosen los aná-
lisis serológicos(Lockhart, r986).Posible-
mente por las anterioresrazones,algunas
de las plantas sintomáticas de plátano y

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PrimerreportedelvirusBSV 59

caña de azicar resultaron negativaspara cultivo de meristemos,para la erradica- Dodds, f.A., Morris, T.J.,and Jordan, R.
el diagnósticodel BSV. ción del BSV y la producción de material L. 1984.Plant viral double-stranded RNA.
El BSV puede ser transmitido por in- de siembra (semilla) libre del virus (Berg Ann. Rev. Phytopathol. 22ir5t-r68.
y Bustamante,1974;Krikorian y Cronaver, Frison, E.A., and Putter, C.A.J. (eds).
sectosvectoresentre plantas de banano y
1984).Esimportante igualmente,determi- 1989.Technical guidelines for the safe
mediante inoculación mecánica de
nar qué germoplasmade Musa spp. co- movement of Musa germplasm. En: Food
banano a caña de azicar (Lockhart y
and AgricultureOrganization,
Autre¡ 1988).Puestoque el BSVsedetec- lombiano esresistenteo tolerante al BSV.
International Board for Plant Genetic
tó también en cultivos de caña de azucar En cuanto al control de la enfermedad
Resources,Rome, pp. 23.
vecinosa lasplantacionesde plátano en la del rayado del banano, se recomienda
Jones,D.R. 1994.fusks involved in the
localidadde Andes,Antioquia,y que an- erradicarlas plantasafectadaspor BSV,el
transfer ofbanana and plantain
teriormenteestaera una zona predomi- uso de material de siembraprovenientede germplasm.En: The Improvement and
nantementecañera,esfactible que el BSV plantaciones libres de la enfermedad o Testingof Musa: a Global Partnership.
haya sido transmitido de alguna manera semilla certificadalibre de ürus. Además, INIBAP, Montpellie¡ France, 93-93.
(v. gr. insectosvectores)dela cai'ade azu- esnecesarioel empleode prácticascuaren- Lockhart, B.E.L. 1986.Purification and
car al plátano.Sin embargo,como seano- tenarias(9-rz meses)paramaterialesintro- serology of a bacilliform virus associated
tó anteriormente,el BSV no había sido ducidos de zonaso paísesen donde está with banana streak disease.Ph¡opathology
reportado en ninguno de estosdos culti- presenteel BSV ()ones,t99l.En lo posi- 76t 995-999.
vos en Colombia. ble, sedebeevitar la siembrade Musaspp. Lockhart, B.E.L.,and Autre¡ L.f .C.
El BSVtambién pudo habersido intro- en áreasadyacentes a cultivos hospederos 1988.Ocurrence in sugarcaneof a
ducido y diseminadoen el país,a travésde del BSV.Támbiénserecomiendael control bacilliform virus related serologicallyto
la importación de material de siembra de los insectosvectoresy desinfectarlas banana streak virus. Plant Dis. 72i 230-43.
comercialde banano,producido in vitro, herramientas de trabajo, especialmente Loclüart, B.E.L., 1990.Evidencefor a
en laboratorios de paísesproductores de cuando semanejan simultáneamentecul- circular double-strandedgenomein a
estetipo de material, donde el BSV ya es- tivos de Musáceasy cafa de azicar. secondgroup of plant viruses.
taba presente.Es sabido que el BSV es di- Phytopathology 8oi r27-r31.
Lockhart, B.E.L.,and Olszewski N.E.
fícil de erradicarpor la técnicadel cultivo AGRADECIMIENTOS
1993.Serologicaland genomic
in vitro de ápicesmeristemáticos,facilitan-
Los autores agradecenla colaboración de heterogeneityof banana streak badnavirus:
do de estamanerasu diseminaciónpor la
las bacteriólogasDiana Carrasquilla y Implications for virus detection in Musa
micropropagaciónmasivade materiales
Liliana Pachóny la valiosa asistenciatécnica germplasm, En: Breeding Banana and
contaminados.La periodicidad en la ex-
en los estudios de microscopía electrónica Plantain for Resistanceto Diseasesand
presión de los síntomasdel BSV es un
de RosalíaPérezdel Instituto Colombiano Pests.Montpellier, France,pp. lo5-n3.
agravantedel problema, dificultando la Ploetz, R.C., Zentmyer' G.A.' Nishijima,
de Neurología.
selecciónde plantasmadreslibres del vi- W.T., Rohrbach, K.G., and Ohr' H.D. (eds).
rus. 1994. Banana Streak,En: Compendium of
En Musáceas,los síntomasproducidos Tiopical Fruit Diseases.APS, pp. r9-zo.
srsLrocnerí¡
por el BSVsepuedenconfundir fácilmen- Roberts, I.M., Robinson, D.f., and
te con los ocasionadospor el CMV. De esta Harrison, B.D. 1984.Serological
Belalcázar,S.1991.El Cultivo del Plátano
manera)la presenciadel BSV pudo haber relationships and genome homologies
en el Tiópico. Manual de AsistenciaTécnica
pasadoinadvertida por algún tiempo en among geminiüruses. f. Gen. Virol. 65:
No.5o. Comité de Cafeterosdel Quindío,
las regionesproductoras de plátano y r723-r73o.
CIID, INIBA| ICA, Cali, Colombia. pp.278-
bananode Colombia, especialmenteen la 279.
zona cafeferade Antioquia y Quindío, en Berg, L.N., and Bustamante.M. 1974.
donde se produce cercadel 7oo/odelplá- Heat treatment and meristem culture for the
tano que seconsumeen el p ais(BeIalcázar, banana plant. Tiop. Agric. (Tiinidad) 36:
r99r).En éstaregión,el bananosecultiva 275-284.
intercaladocon caféy esfrecuenteencon- Krikorian,A.D., and Cronaver' S.S.1984.
trar pequeñasplantacionesde caña de Aseptic culture techniquesfor banana and
azicar parala producción de panela. plantain improvement. Econ. Bot. J8:.322-337
Actualmente,se adelantaun estudio Castaño,M.,Arroyave, f., Galves,G., and
en el suroesteantioqueño,tendientea de- Morales. F. 1995.Cucumovirus afectando
terminar la incidenciade estevirus y su plantacionesde banano y plátano en
efectoen los rendimientosdel cultivo de Caicedonia (Valle del Cauca).ASCOLFI
plátano.Igualmente,esnecesarioadelan- INFORMA zr: r4-r5.
tar estudiosque permitan establecerla Centro de Investigación de la Caña de
distribución geográficadel BSV en el Azicar (CENICAÑA). Informe Anual,
país,determinar el rango de especieshos- 1987-r989.Cali, Colombia.
pederasy establecerla variabilidad de Clark, M.F., and Adams, A.N. 1977.
Characteristicsof the microplate method of
cepasde éstepatógeno.Además,se debe
enzyme-linked immunosorbent assayfor
investigar el uso de técnicas de
the detection of plant viruses.J. Gen. Virol.
termoterapia(tratamiento de la semilla
34i 475-4v.
con altastemperaturas),combinadascon

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