La liberación de acetilcolina

Yves Dunant y Maurice Israel

Tamara Palma Rojas

Fisiología Animal I
Profesora: Griselda Ruiz
Transmisión de la información.

Acetilcolina (ACh) Neurotransmisor.

La colina acetiltransferasa enzima que

cataliza la síntesis de acetilcolina, mediante
la transferencia de una molécula de colina a
un grupo acetilo del compuesto
Acetilcoenzima A.
Acetilcolinesterasa: Degradación.
Aunque las vesículas almacenan ACh,
la ACh liberada al espacio
postsinápticos no procede de estas
vesículas sino que del citoplasma
neuronal y que algún factor proteico
actuaría como válvula para el paso de
ACh a través de la membrana

Liberación de ACh
Años 50: Vesículas como fuente de acetilcolina.
1952, Katz y Fatt: Potenciales miniatura de placa
terminal (PMPT) ACh de una vesícula sináptica.

Hipótesis:
1. Misma magnitud y curva de tiempo.
2. Mismas propiedades que el potencial de placa
terminal de valor mucho más alto, producido por la
estimulación total de una neurona.
3.Cada (PMPT) se genera por la acción de miles de
moléculas de ACh, cantidad que una vesícula puede
contener.
En 1970 Kruebel y sus colaboradores:
Lo que se había considerado PMPT constaba
probablemente de elementos de magnitud aun
menor.

1959 - 1964, Victor Whittaker y Eduardo Robertis y

colaboradores, trabajaron los sinaptosomas.
Sinaptosomas: Terminaciones nerviosas perforadas.

Aislaron sus vesículas y encontraron ACh y que

también había ACh en el citoplasma.
Roger Marchbanks, ACh citoplasmática tenia un papel
fundamental en la neurotransmisión.
Torpedo, material experimental ideal.
Vive en aguas costeras poco profundas.
Posee órganos especializados llamados órganos
eléctricos los cuales tienen como función la defensa de
sus depredadores.
1940 Fessard, Feldberg y Nachmansohn descubrieron
que las sinapsis de este órgano eran colinérgicas.

Torpedo Marmorata
• Localización y funcionamiento del órgano
eléctrico.
2 órganos, uno en cada lado en la aleta dorsal.
400 prismas: Apilamiento de electroplacas.
Terminaciones liberan acetilcolina.
Se abren canales en la membrana ventral para
sodio.
Genera corriente eléctrica que se propaga en el
agua.
• 1968 Gautran, Lesbats e Israel aislaron vesículas del
órgano eléctrico del torpedo.
• Vesículas con más acetilcolina que en
experimentos anteriores.
• Comparación de cantidad de ACh en vesículas y en
todo el terminal nervioso.
* Tratar con ácido que rompe membranas y destruye la
acetilcolinesterasa, sin afectar a la ACh.
* Destrucción mecánica, que sólo rompe la membrana
externa del terminal. La ACh vesicular permanece
intacta. Se mide la cantidad de ACh utilizando ácido
que rompe la membrana vesicular.
Se comprueba:
Vesículas sinápticas almacenan gran cantidad de ACh.
Vesículas del órgano eléctrico como las del tejido
cerebral almacenan casi la mitad de la ACh de toda la
terminal nerviosa.
Apoyan la hipótesis vesicular.
También existía ACh citoplasmática.
Si la hipótesis vesicular era correcta, al estimular una
terminal nerviosa debería liberarse ACh de las vesículas
antes que de cualquier otra parte de la célula.
En 1970, comienzas las experiencias para comprobar lo
anterior.
Estimularon los nervios de los órganos hasta observar
un agotamiento de la respuesta eléctrica, por lo que
ellos suponían una disminución notable de vesículas
así como el contenido de ACh en las mismas.
Se agoto primero la ACh extravesicular, renovándose
durante la estimulación. Por el contrario a lo que
pensaban, las vesículas se mantuvieron constantes
varios minutos y sólo después comenzó a agotarse la
ACh de las vesículas...
• Se realizaron experiencias que pudiesen comprobar lo
descubierto.
• En una de ellas se trabajo con sinaptosomas de torpedo.
Se le aplicaban diversas sustancias químicas al material de
estudio las cuales al producirse la liberación de ACh,
producirían emisión de luz proporcional a la cantidad de
ACh presente.
Se ocuparon sustancias peptidicas (Ionoforos) que
facilitaran el paso de calcio y posterior descarga de ACh.
Posteriormente se midió la ACh incluso en sinaptosomas a
los cuales se les había extraído gran cantidad de vesículas.
• La ACh vesicular no era imprescindible en la liberación
de ACh.
Posteriormente se realizaron mediciones en tejidos
intactos de órgano eléctrico y se comprobó que la ACh
de las vesículas sinápticas parecían no cambiar con los
estímulos eléctricos.
También se observo que la ACh extravesicular,
disminuía durante la primera fracción de estimulación y
luego aumentaba para luego de nuevo disminuir.

Se observo también exocitosis de vesículas que no

siempre va acompañada de liberación de ACh.

Un cambio estructural simultáneo a la liberación de

ACh.
Cuando las membranas se congelaban, se observaron
partículas de diferentes tamaño.
Al liberar ACh las partículas de mayor tamaño eran las
más abundantes.
Esto sugiere que el mecanismo de descarga de ACh
esta presente en la membrana de la
terminación nerviosa. El mecanismo consiste
probablemente en un cambio en la configuración de
las proteínas de membrana.
• Si la hipótesis era correcta al extraer las proteínas de la
membrana nativa y posteriormente insertarlas en
membranas artificiales, estas deberían ser capaces de
liberar ACh al exponerlas a iones cálcicos.
Se trataron los sinaptosomas de
torpedo para extraer la membrana y
posteriormente extraer sus
componentes e insertarlos en
membrana artificiales hechas con
lecitina.

Membranas tratadas con ultrasonido,

generaban pequeñas bolsitas aunque
sin orgánulos internos.
Al llenar estas membranas con ACh y
aplicarles calcio, se liberaba la ACh y se
observaban las partículas antes
observadas.
¿Entonces cual es la función de las vesículas sinápticas,
si sabemos que el mecanismo de liberación de la ACh
se ubica en la membrana de la terminación y que la
ACh liberada es la citoplasmática?

Función de reserva.
Acumulación de Calcio.

Tras una estimulación prolongada del nervio, las

vesículas comienzan a liberar la ACh y comienzan a
llenarse de calcio. Para eliminar este calcio se produce
exocitosis y la liberación del calcio al exterior.
Finalmente…
La incógnita que este mecanismo puede
responder es: ¿Cómo se explican los potenciales
miniatura de placa terminal?

Por liberación de pequeñas cantidades de ACh en

breves momentos durante el acoplamiento de los
elementos de las proteínas de membrana.

Modelos trabajados en condiciones experimentales lo

más naturales posibles.
 ¡Muchas gracias!

La liberación de acetilcolina
Yves Dunant y Maurice Israel