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AMIBA EN FRESCO

Es un método, sencillo de realizar y que nos ayudará en la


búsqueda de protozoarios, así como sus quistes y trofozoitos
El diagnostico de la amebiasis se realiza demostrando la
presencia de trofozoitos oquiste
Los quistes resisten condiciones adversas. Son las formas
infectantes para el hombre porque aguantan la acidez
gástrica. Esta acidez los rompe y dan origen a trofozoitos.
Llegan a la luz del colon e invaden la pared. Se reproducen
por división binaria. Salen con las materias fecales en forma
de quiste inmaduros (1 núcleo) o maduros (4 núcleos),
pasando previamente por pre quiste.
  
Este estudio se realiza en niños menores de 1 año, por
las condiciones de la toma de la muestra.
El paciente debe presentarse al laboratorio.

    • No es necesario que el paciente se encuentre en


ayuno.

    • El paciente debe de evitar purgantes


TECNICA
 1.- Se llena una jeringa de 10 mL con SSI estéril, a la jeringa se le
conecta un sonda de alimentación naso gástrica k30
 2.-Al paciente acostado se le introducen unos 5-10 cm del extremo
libre de la sonda por el recto y se le vacía el contenido de la jeringa.
 3.-si el paciente esta muy deshidratado, se vuelve a llenar la jeringa
con otros 10 mL de SSI y se le aplica al paciente.
 4.-Una vez que se a vertido toda la SSI se deja reposar al paciente sin
sacarle la sonda por unos 2-3 minutos, con la finalidad de que la SSI
entre en contacto con la última porción del intestino
 5.- Transcurrido el tiempo se aspira la SSI que ha estado en contacto
con el intestino a través de la sonda, rotando un poco la sonda para
evitar que los orificios de la sonda entren en contacto con la paredes
del intestino y se tape la sonda y evite la succión de la SSI.
6.- Ya que se hayan succionado de 3-5 mL de SSI se retira la
sonda poco a poco, luego una vez afuera del ano se absorbe aire
de manera que todo el liquido contenido en la sonda pase a la
jeringa.
7.- Se mezcla uniformemente el contenido de la jeringa y se
colocan 2 gotas en un porta objetos, una de las cuales se
observa directamente y la otra se le añade una gota de lugol
parasicológico.
8.- Observar con objetivo 10x y 40x para buscar la presencia de
trofozoitos móviles (gota sin lugol) y quistes o huevecillos de
otros parásitos .
Por otro lado se toma una pequeña cantidad de moco de las
heces con un aplicador y se hace un extendido del mismo en un
portaobjetos, se seca al aire y se tiñe con tinción de Gram y
Wright o May –Greenwald para la observación de la biota
bacteriana y la búsqueda de células que puedan observarse.
MATERIAL
Guantes
Aplicadores de madera
Colorantes para tinción de Gram
Colorantes para la tinción de Wrigth o May- Greenwald
Cubreobjetos
Jeringa de 10 mL
Microscopio
Muestra fecal
Portaobjetos
Sonda de alimentación naso gástrica K 30
SSI estéril
Paciente infantil
TECNICA II
  
    • La muestra se toma directamente del recto del paciente por medio de rotación  
delicada, para lo cual se emplea un hisopo estéril de algodón delgado, o una cucharilla
rectal introduciendo unos cinco centímetros en el recto del lactante esto se debe.
realizar solamente una vez, es decir no se debe de estar metiendo y sacando el hisopo

    • El hisopo se coloca en un tubo de ensayo con 2 o 3 ml, de solución salina estéril a


37°C.

    • Posteriormente se coloca un poco en el portaobjetos, se coloca el cubreobjetos y se


observa de inmediato al microscopio.

    • . Lo que se busca es la presencia de trofozoitos de E. histolytica estos son móviles, la


identificación se realiza diferenciando a los trofozoitos de los macrófagos, los
trofozoitos presentan pseudópodos hialinos, son más grandes que los macrófagos.

    • También se puede utilizar formol al 10%, se introduce el hisopo en el tubo y observar


al microscopio agregando una gota de azul de metileno, los trofozoitos se tiñen de color
azul.
MOCO FECAL
Citología de Moco Fecal: Dentro de las pruebas de
laboratorio recomendadas para abordar la enfermedad
diarreica, se encuentra en primer lugar la citología del moco
fecal, la cual nos permite diferenciar la etiología de una
infección en viral o bacteriana; esto es, el reporte de más de
10 leucocitos por campo orienta a una etiología infecciosa; si
estos son predominantemente mono nucleares debe
pensarse en etiología viral, pero si el predominio es de
polimorfo nucleares, su etiología será probablemente
bacteriana. En caso de que la citología se reportara positiva
con probable etiología bacteriana, es recomendable realizar
un coprocultivo para conocer el agente causal de la diarrea
Es una prueba que se solicita para descartar la
presencia de un cuadro viral o bacteriano, de acuerdo
al predominio de polimorfo nucleados en las heces
fecales
Importante
La muestra debe tomarse de las zonas que muestran
aspecto mucoso.
Si no puede coger la muestra de un menor de edad
puede llevar el pañal al laboratorio
UTILIDAD CLINICA
Prueba de utilidad en la Investigación de enterocolitis
infecciosa
Más de 10 leucocitos por campo en moco fecal orienta a una
patología infecciosa.
Si el predominio es de mono nucleares, es más probable que
la etiología sea viral.
En cambio, si el predominio es de polimorfo nucleares, se
puede pensar en patología bacteriana.
Cuando aparecen eosinófilos, entonces podemos pensar en
infestación dérmica(gusanos).
Si encontramos eritrocitos, habrá que pensar en
complementar datos para síndrome
disentérico, pues con ello cambia radicalmente el abordaje
terapéutico.
METODO:
Microscopia y Tinción de wright.

TECNICA
1.Se toma una pequeña porción de moco presente en la muestra o
materia fecal, se realiza un extendido en un portaobjetos limpio y
desengrasado.
2.Se deja secar , a continuación se tiñe con la tinción de wrigth : cubrir
el frotis con colorante de wright durante 8 minutos, sin volcar
agregar una cantidad igual del amortiguador de wright soplando
ligeramente para mezclar ambos líquidos, dejar actuar de 6 a 10
minutos, se formara una superficie de brillo metálico. Volcar y lavar
con agua corriente y dejar secar.
3.Se observa al microscopio en objetivo de 100 X y se realiza un
recuento de 100 células mono nucleares y polimorfo nucleares.
INTERPRETACIÓN
En condiciones normales, las heces no suelen contener células epiteliales, ni
leucocitos, ni eritrocitos. Es fácil apreciar la presenciad leucocitos. En la
deposición mucosa de los que sufren alergia intestinales observa un exceso de
eosinófilos. La presencia de células epiteliales es un indicador de irritación
gastrointestinal.
La presencia de células epiteliales, eritrocitos y bacterias se reporta en cruces de
la siguiente manera:
ABUNDANTES (+++)
MODERADAS (++)
ESCASAS (+)
La presencia de leucocitos se encuentra asociada con moco y se observa en
diferentes enfermedades intestinales. Se observa un predominio de PMN en
amibiasis aguda, shigelosis, colitis, también se observan macrófagos y MN con
gran predominio en fiebre tifoidea. Los PMN  y MN se reportan contando en
total 100 células.

*Nota: la tinción puede variar de acuerdo al laboratorio no es una tinción


estándar

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