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Informe de resultados del examen práctico de Microbiología

Informe de resultados del examen práctico de Microbiología

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Informe de resultados del examen práctico deMicrobiologíaPruebas con la cepa del alumno (
 Klebsiella penumoniae
)
Aislamiento de cultivo, agotamiento por estría
Medios y reactivos:
Agar nutritivo en placa de 90 mm
Método:
Se toma la placa con agar nutritivo y con un rotulador, sobre la base de la placa, se divide en cuartos que se numeran del 1 al 4. Se toma la cepa y se siembra en la placa (en este caso
 Klebsiella pneumoniae
) con un asa curva haciendo una estría en el primer cuarto, luego se esteriliza el asa, y después de enfriarla, se pasa por el final de laestría del primer cuarto y se hace una nueva estría en el 2º, y así sucesivamente hastallegar al 4º. Luego se incuba durante 24h a 37º C.
Incidencias:
Hubo un error en la siembra y se hizo una estría por toda la placa.Además, el agar nutritivo se proporcionó en tubos, por lo que se fundió en baño maría yse paso a la placa de 90mm
Pruebas bioquímicas: KIA
Medios y reactivos:
Tubo de agar hierro de Kligler en slant
Objetivo:
Observación de la capacidad de fermentación de glucosa y lactosa, ademásde la producción de H
2
S.
Método:
Hacer una siembra tanto en superficie como por picadura con un asa recta,dejándolo incubar después 24h a 37º C
Resultados e interpretación:
La zona del pico adquirió una coloración anaranjadaamarillenta mientras que la base permaneció roja. El cambio de color del medio se debea la capacidad de la bacteria de fermentar tanto lactosa como glucosa, lo que produceuna variación de pH que es lo que motiva el cambio de color. La ausencia de burbujas yde ennegrecimiento determinan que no produce gases ni H
2
S.
Incidencias:
La picadura no fue lo suficientemente profunda, por lo que en la base nose produjeron cambios. 
 
Pruebas bioquímicas: Catalasa
Objetivo:
Determinar si la bacteria de la cepa posee la enzima catalasa.
Método:
Tomar con un asa curva una pequeña muestra de la cepa y depositarla sobreun portaobjetos de vidrio, después, depositar 2 ó 3 gotas de H
2
O
2
al 10% sobre la mismay observar, si produce burbujas o no.
Resultados e interpretación:
Hubo burbujeo al realizar el ensayo por lo que la cepa posee la enzima catalasa.
Pruebas bioquímicas: Oxidasa
Medios y reactivos:
Reactivo de Kovacs
Objetivo:
Determinar si la cepa bacteriana posee la encima oxidasa.
Método:
Coger el reactivo de Kovacs (solución acuosa al 1% de diclorhidrato detetrametil-
 p
-fenilendiamina) y depositar 1 ó 2 gotas en un papel de filtro, sobre el que sedepositará una pequeña muestra de la cepa bacteriana tomada con un asa curva si la prueba es positiva torna a un color azulado, en caso contrario, no se produce cambio.
Resultados e interpretación:
El reactivo no cambio de color, por lo que la prueba esnegativa.
 
Pruebas bioquímicas: Fermentación de lactosa y producciónde gas en medio líquido
Medios y reactivos:
Tubo de caldo lactosado con campana de Durham con rojo defenol como aditivo.
Objetivo:
Determinar si la cepa es capaz de fermentar la lactosa y
 
además, produce gasal hacerlo.
Método:
Tomar una muestra de la cepa con asa curva y depositarla en el tubo, despuésincubar a 37º C durante 24h.
Incidencias:
Hubo un error en la elección del aditivo, utilizando rojo de metilo en lugar de rojo de fenol, por lo que no se aprecia si la bacteria utiliza la lactosa o no.
Resultados e interpretación:
Por el error mencionado el tubo mantiene el color rojodel aditivo, además, no se observan burbujas en la campana de Dirham, por lo elresultado es negativo en producción de gas
Prueba de movilidad en la cepa de
 K. pneumoniae
por latécnica de la gota suspendida
Objetivo:
Determinar si la cepa posee movilidad y si es de tipo browniano o vital (oambas)
Método:
Se toma un cubreobjetos al que se le untan los bordes de un lado con una pequeña cantidad de vaselina y se coloca con el lado untado hacia arriba sobre la mesadel laboratorio. Después se deposita una muestra de la cepa con un asa curva en elcentro del cubreobjetos y se le añade una pequeña gota de 2%d de carboxil-metil-celulosa disuelta en sacarosa 0,2 molar que se extiende con ayuda del asa. Después secoloca con cuidado un portaobjetos con uno de los lados excavado sobre el cubreobjetos(lógicamente el lado excavado hacia abajo) con cuidado de que la gota no se adhiera al

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