NDICE Introduccin .

Objetivos

. 2

Procedimiento

...2.1

Materia Prima

.2.2

Materiales

.. ..2.3

Reactivos

..

Conclusiones

.3.1

Bibliografa

..3.2

Cinetica de la Alfa Milasa Introduccin

La cintica enzimtica tiene por objeto el estudio de la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas, as como los factores que en ella influyen y los mecanismos por los cuales transcurren. La velocidad de las reacciones enzimticas se puede medir: - por la cantidad de sustrato que desaparece en la unidad de tiempo - por la cantidad de producto que aparece en la unidad de tiempo En esta prctica de laboratorio se comprobar la influencia de la concentracin del sustrato (S) y de la enzima (E) en la cintica del alfa-amilasa en su accin sobre los enlaces alfa 1-4 del almidn. Para ello nos basaremos en la desaparicin del almidn en la unidad de tiempo mediante el seguimiento de la reaccin de color que produce el mismo, as como sus productos de hidrlisis con el Iodo en disolucin de Ioduro de potasio (Reactivo de Lugol). Dado que el almidn est integrado por dos fracciones, la amilosa y la amilopectina, debe tenerse en cuenta las reacciones que ambas producen (as como sus respectivos productos de hidrlisis) con el reactivo de Lugol: AMILOSA AMILOPECTINA + Amilasa -------------- AMILODEXTRINAS +IODO = resultado Color azul violeta MALTOSA + GLUCOSA -----------------------+IODO No dan coloracin Basndonos en las reacciones anteriores podemos estudiar el efecto que provocan en la cintica enzimtica la variacin de los factores que en ella influyen: c(S), c(E), pH y T, fundamentalmente. En Esta prctica no estudiaremos el efecto del pH y la temperatura. La influencia de la c(E) podremos estudiarla midiendo la velocidad de la reaccin de la forma ya descrita pero utilizando diferentes c(E), manteniendo constante los dems factores. De forma similar se procede con el estudio de la influencia de la c(S).

2.1 Objetivo

Observar el efecto de la concentracin de sustrato y de enzima en la velocidad de Reaccin enzimtica.

2.2 Procedimiento Parte inicial del procedimeiento Limpiar la materia prima, reducir la pulpa en aquella materia prima que lo necesite, para asi dejar expuesto el almidon que la misma contenga. Colocar cada una de las muestras en cajas petri. Agregar Lugol a cada una de las muestras. Observar reaccion . Parte final del procedimiento Realizar una dilucin de almidn. Colocar en tubos de ensayo 25 ml de almidn y adicionar 4 ml de aci do clorhdrico y, adicionar hidrxido de sodio has ta ligeramente bsico. Observar la reaccin hidrolitica con el yodo agregandole gotas del mismo

1. 2. 3. 4. 1. 2. 3.

y y y

2.3 Materia Prima Maz Manzana Yuca 2.4Materiales Pipetas Probetas Cajas Petri Vaso de precipitacin Esptula Agitador Cuchillo

y y y y y y y

y y

3.1 Reactivos Disolucin de Lugol: Seprepara disolviendo 1 g de iodo, 2 g de KI (Ioduro de Potasio) en 2000 ml de agua destilada Hidrxido de Sodio 3.2 Conclusiones La obtencioonde glucosa a partie de la almidon es importante para el metrabolismo celular, consecucin de este se logra tras una serie de rreavcione que logran desdoblar el almidon, al amilasa es protagonsta en esta proceso ya que su efectividad es bastanrte alta al igual que la ecomnomia que represen ta y es inversamente proporcional al abrasivismmo.La proporcin de sustrato es conveniente para la accin de la amilasa. Teniendo en cuenta q la amilasa es una enzima que esta relacionado de manera directa con factores externos como es la temperatura y el ph, hay que mencionar que estos parametros son impresindibles en el momento que se busca la inactivacion de la enzim 3.3 BIbliografia Wikipedia: La Enciclopedia Libre. Cintica enzimtica. http://es.wikipedia.org/wiki/Cintica_enzimatica. Domingo, 4 de junio del 2011. http://mazinger.sisib.uchile.cl/repositorio/lb/ciencias_quimicas_y_farmaceuticas/schmidth02/parte07/01.html

y y

Escuela superior politcnica del litoral

Bioingeniera de Alimentos

Estudio Cintico de la Enzima Alfa-Amilasa

Termino I -2011

Profesora: Ing.MirellaBermeo Alumno: Hernn Herrera